Behandling av helminthiaser hos barn er ekstremt viktig, siden konsekvensene av dette kan være et etterslep i utviklingen av fysiske og mentale, patologiske prosesser av indre organer og systemer, til og med død. I tillegg er helminth-angrep svært smittsomt, og derfor sprer de seg så lett i førskole- og skoleinstitusjoner. Basert på dette er det klart hvor viktig rettidig behandling av helminthiasis hos barn er.
De første tegnene på helminths hos barn
Ormer er opportunistiske agenter for menneskekroppen, ormer som en person er den endelige verten for. I tillegg spiller ikke eierens alder noen rolle i denne saken, forskjellige typer helminthiaser kan observeres både hos barn og hos voksne pasienter.
Hvor farlig er helminthiasis for et barn?
Som nevnt tidligere, kan helminth hos barn forårsake alvorlige sykdommer og patologier, som et resultat av at mental og fysisk utvikling bremses. Mulige komplikasjoner for hver type helminthiasis kan være helt forskjellige, for eksempel:
Derfor krever barns helminthiaser enda mer oppmerksomhet, rettidig legehjelp, langsiktig observasjon hos en spesialist og forebygging.
Hovedsymptomer hos barn
Symptomer på helminthiasis hos et barn kan være forskjellige, avhengig av typen ormer:
1. Ascaris manifesterer seg umiddelbart som en allergisk reaksjon, feber og kvalme hos barnet. De første opptredenene er vanligvis lyse, men avtar raskt. Da kan følgende symptomer oppstå: 
- kolikk og dysbakteriose og nyfødte;
- hos babyer under 1 år, smerter i navlen, problemer med avføring, allergier og diatese;
- eldre barn har søvnproblemer, urolig oppførsel, mareritt;
- for barn 3-7 år er kvalme, feber, hoste og magesmerter, utslett karakteristiske.
2. Enterobiasis, det utløsende middelet er pinworms, manifesterer seg som et slettet klinisk bilde. Og først etter 1 måned kan du merke følgende symptomer:
- hos nyfødte, betennelse, hevelse og rødhet i anus, nektet å spise, gråt om natten, mangel på appetitt;
- barn under ett år har de samme symptomene, så vel som alvorlig kløe i anus om natten (fra 23.00 til 01.00), jenter lider av betennelse i kjønnsorganene;
- hos eldre barn, smerter i magen nær navlen, søvnforstyrrelser, kløe i baken.
3. Symptomer på Toxocariasis er vanskelig å gjenkjenne, bortsett fra en lett kroppstemperatur og allergiske reaksjoner (utslett, elveblest, kløe og hevelse). Etter infeksjon kan det oppstå hoste som senere gir lungebetennelse eller bronkitt, spesielt hos de minste pasientene. 
Trikinose antyder milde tegn hos nyfødte, ellers observeres følgende tegn:
- febertilstand;
- hevelse i ansiktet;
- Muskelsmerte;
- allergiske reaksjoner;
- barn 5 år og eldre kan ha forstørrede mandler, milt, utslett og sår hals.
Det er vanskeligst å diagnostisere symptomene på helminthiasis hos barn 2 år og yngre, siden barnet ikke kan forklare sin oppførsel og tilstand. Derfor, for eventuelle atypiske manifestasjoner og oppførsel til barnet, er det bedre å vise legen.
Hva må gjøres først?
Ormer som ble funnet i avføringen til et barn er det viktigste tegnet på sykdommen, hvoretter du umiddelbart bør søke hjelp fra en lege. Ingen helminthbehandling kan være vellykket uten riktig diagnose. Undersøkelsesmetoder i dette tilfellet bør være omfattende, inkludert følgende prosedyrer: 
- tar en skraping fra anus;
- studie av barnets avføring;
- blodanalyse;
- muskelbiopsi i sjeldne tilfeller med mistanke om trikinose;
- serologisk blodprøve;
- røntgen, ultralyd, tomografi;
- ELISA for å oppdage antistoffer i blodet.
Behandlingsmetoder
Behandling av helminthiasis hos barn bør være omfattende, gjennomtenkt, planlagt med nøyaktige doser og hyppighet av å ta medikamenter. Dette skyldes at det brukes legemidler med giftige komponenter for den anthelmintiske effekten, noe som betyr at irrasjonell bruk kan føre til bivirkninger. I tillegg, hjemme, er alternativ behandling med medisinplanter passende.
Folkemidler
Moderne behandling med folkemedisiner for slike sykdommer for barn involverer 4 effektive måter: 
Enhver metode for hjemmebehandling bør diskuteres med legen din på forhånd. Det må huskes at kontraindikasjoner i form av individuell intoleranse er gitt for urter og folkemedisiner.
Medisinsk behandling
- Ved enterobiasis og ascariasis brukes vanligvis medisiner som Pirantel og Mebendazole. Mottak av Pirantel er hensiktsmessig i en dose på 10 mg av stoffet per kilo vekt fra nåleorm, og 5 mg / kg fra rundorm. Mebendazol tas to ganger daglig med 50 mg for barn 2-3 år i tre dager på rad, to ganger for 100 mg i tre dager på rad for barn over 3 år, etter 3 uker gjentas behandlingen.
- Med toxocariasis foreskrives Mebendazol i en annen dose - for barn 2 år og eldre, 100 mg to ganger daglig i 14-10 dager.
- Behandling av trikinose aksepterer Mebendazole 5 mg per kilo vekt, hvoretter dosen deles inn i tre doser per dag. Behandlingsforløpet er 1 uke under streng tilsyn av en lege.
Forebygging av helminthiaser
- vaske hendene umiddelbart etter kontakt med dyr, etter gaten og sandkasser, toalettbesøk og før spising;
- spiser bare ren mat;
- riktig utført varmebehandling av kjøtt- og fiskeprodukter;
- drikker kokt vann;
- overholdelse av personlig hygiene og sanitær;
- regelmessig ormekur av kjæledyr;
- forebyggende ormekur hos barn i alderen 2 år og eldre.
Blodprøve for toxocara
Funksjoner av menneskelig infeksjon med toksocariasis
Smittebærere er hunder, sjelden katter. Toxocara-egg spres med avføring fra løse hunder. En gang på bakken, i vann eller dvelende på pelsen til et dyr, blir de introdusert i en sunn organisme på forskjellige måter.
Reaksjon på en inntrenger
Det er kjent fra medisinsk statistikk at voksne har mindre sannsynlighet for å bli smittet med toksokariasis, med mindre yrket deres er i fare. Barn er mye mer sannsynlig å få en infeksjon.
De vanligste symptomene på toksokariasis er:
- Feber uten tegn til sykdom.
- Temperaturøkning.
- Voksende og falmende smerter i hodet eller magen.
- Utseendet til et hudutslett som ikke kan elimineres.
- Puffiness i ansiktet.
- En økning i nivået av eosinofiler i blodet, avslørt i den generelle analysen.
For å stille en nøyaktig diagnose er en immunologisk analyse for toxocara foreskrevet. Tilstedeværelsen av proteinforbindelser i blodet som bærer den genetiske informasjonen til helminth (antigener) provoserer immunitet for å produsere antistoffer av igg-klassen. Dette er det første tegn på infeksjon med toksocariasis.
Foreløpig diagnostikk
Den innledende fasen av pasientens historie er kollektiv. Før du sender en pasient for å ta en blodprøve for toksokariasis, er det nødvendig å studere sykdomshistorien og foreta en foreløpig undersøkelse.
Primærdiagnose:
- Undersøkelse av skjerpende omstendigheter som kan utløse smitte - spesifikt arbeid med dyr eller tilstedeværelse av et kjæledyr, utgraving i potensielt farlige områder, barn som leker i hundeturer.
- Fysisk undersøkelse av pasienten. Undersøkelse av huden for subkutan invasjon av toksobiler, øyelokk og øyeepler, palpasjon.
- Utnevnelse av en detaljert blodprøve. Under infeksjon med toksokariasis er en betydelig økning i noen indikatorer karakteristisk - eosinofiler (70–80%), lymfocytter, ESR. Mens nivået av hemoglobin synker markant.
- Tar leverprøver. Ved alvorlig invasjon påvirkes belastningen på leveren, noe som manifesteres av et sterkt hopp i bilirubin.
Det er umulig å få direkte bekreftelse på toxocara-invasjon ved bruk av konvensjonelle tester (blod, medprogram, utstryk). Duodenalundersøkelse er også lite informativ, da det er vanskelig for larvenes migrerende natur.
Etter å ha mottatt resultatene av en foreløpig undersøkelse, som indikerer en mulig infeksjon med toxocara og differensiert den påståtte diagnosen fra sykdommer med lignende symptomer, foreskrives pasienten en ELISA for toksokariasis.
Koblet immunosorbentanalyse
Hovedformålet med denne studien er å bekrefte tilstedeværelsen av toksocars i menneskekroppen. Antistoffer mot disse helminthene finnes i blodplasmaet, så det tas fra en vene.
Toxocara-analyse krever litt forberedelse:
- Ikke spis fet og tung mat dagen før prosedyren.
- Ikke drikk sukkerholdige, kullsyreholdige og alkoholholdige drikker i løpet av dagen før du besøker laboratoriet.
- Gi fastetester.
- Ikke bruk medikamenter dagen før og dagen da analysen er planlagt.
Det skal bemerkes at denne svært informative metoden for å oppdage invasjon kan påvirkes av noen omstendigheter. Et falskt positivt resultat kan oppstå hvis pasienten har:
- Onkologiske sykdommer.
- Tuberkulose i lungene.
- Alvorlige leverpatologier.
- autoimmunt syndrom.
- Antifosfolipidsyndrom.
- Svangerskap.
I dette tilfellet vil det ikke være mulig å oppnå en 100 % bekreftende analyse, siden under de oppførte omstendighetene produserer beskyttelsessystemet også immunglobuliner (antistoffer). Det er nødvendig å utføre ytterligere diagnostikk og skille toxokariasis fra de oppførte faktorene.
Konsentrasjonen av immunglobuliner (titer) av IgG-klassen når maksimalt mulig verdi etter 2-3 måneder fra invasjonens begynnelse. Jo mer alvorlig infeksjonen er, desto høyere er denne frekvensen.
ELISA-resultater
For å stille en diagnose blir enzymimmunoassay nøye studert, de oppnådde resultatene sammenlignes med referanseverdier. Normen er en antistofftiter på 1:100 med en positivitetsindeks på mindre enn 0,9.
Numeriske verdier av titler
Resultatene som oppnås kan være negative, positive, svakt positive eller tvilsomme. Antall antistofftitere avhenger av alvorlighetsgraden av invasjonen og varigheten av dens forekomst.
Analyseutskrift:
- AT-titer opp til 1:100 - resultatet er negativt. Toxocara-larver ble ikke funnet i pasientens kropp.
- AT-titer opp til 1:400 - resultatet er svakt positivt. Pasienten har en svak invasjon eller utvikler en okulær form for toksocariasis. I noen tilfeller indikerer indikatoren en nylig infeksjon.
- AT-titer opp til 1:600 - resultatet er positivt. En person lider av en klinisk form for helminthiasis, ved påvisning av hvilken umiddelbar terapi er nødvendig.
- AT-titer opp til 1:800 - resultatet er positivt. Det snakker om en alvorlig invasjon av progressiv natur og en høy grad av sannsynlighet for utvikling av en patologisk prosess av indre organer.
Med sjeldne unntak avslører studiet av ELISA en neglisjert form for invasjon med en blanding av helminthiaser av annen opprinnelse. I dette tilfellet kan det totale antallet antistoffer være høyere enn 1:800.
Positivitetskoeffisient
I enzymimmunoassay for toksokariasis med en titer på 1:400 - 1:600 for å skille invasjon fra sidefaktorer, sammenlignes de oppnådde indikatorene med referanseverdien. Forskjellen mellom disse tallene kalles vanligvis indeksen eller positivitetskoeffisienten.
Vanligvis, i form av utført ELISA, er den ene indikatoren motsatt av den andre. Den første er normen, den andre kan bety:
- Opp til 0,9 - resultatet er negativt. Toxocara-larver ble ikke funnet.
- 0,9-1,1 - resultatet er tvilsomt. I dette tilfellet tildeles en ny diagnose.
- 1,1-2,2 - resultatet er litt positivt. En person er en bærer med en svak invasjon.
- 2,2-4,2 - resultatet er positivt. Toxocariasis av moderat alvorlighetsgrad utvikler seg i lang tid.
- Over 4,4 - resultatet indikerer toppen av helminthic invasjon eller en nylig helminthiasis.
KP med et resultat på 4,4 og en påvist økning i eosinofili med 10 % kan indikere utvikling av en okulær form for toksokariasis og tilstedeværelse av antistoffer mot kryssinvasjon, totalt mot toksokariasis.
Immunresponsen og den optiske tettheten av antistoffer (positivitetskoeffisient) avhenger av graden av infeksjon med Toxocara og stedet for deres lokalisering. Den laveste titeren og CP-indikatoren tillater bare å anta fravær av helminths, men ikke å hevde dette.
Informasjonen som presenteres kan ikke tjene som kilde for selvdiagnose eller egenbehandling. Resultatene av ELISA, sammen med en forundersøkelse, kan bare fortelle en spesialist om tilstedeværelsen av et problem. I Invitro-laboratoriet utføres bloddiagnostikk med høy nøyaktighet, resultatet av analysen er ledsaget av kommentarer fra spesialister om positivitetskoeffisienten. Dette hjelper legen til å stille en mer nøyaktig diagnose.
Ledende russiske produsenter I segmentet av reagenssett for diagnostisering av infeksjoner: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - LLC NPO Diagnostic Systems, N.Novgorod; - CJSC "Ecolab", Elektrogorsk MO. Innenfor reagenssett for diagnostisering av ikke-smittsomme sykdommer og fysiologiske tilstander: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moskva. I segmentet av reagenser for laboratoriediagnostikk av allergier: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - NPO Immunoteks LLC, Stavropol. Produksjon av laboratorieutstyr: - OOO Pikon, Moskva
Vurdering av graden av mulig importsubstitusjon i henhold til nomenklaturen for tester Nomenklatur for analytter, enheter Godkjent for bruk i den russiske føderasjonen Produsert i den russiske føderasjonen Grad av mulig importsubstitusjon Infeksjonssykdomsmarkører % Ikke-infeksjonssykdomsmarkører og indikatorer på fysiologiske tilstander % Allergimarkører % Totalt: %
Estimering av graden av importsubstitusjon etter volumet av markedet for produkter for nettbrett ELISA Markedssegmenter Markedsvolum i Russland, mln. Salgsvolum av innenlandske produsenter, millioner rubler Andel importsubstitusjon Infeksjonssykdomsmarkører % Ikke-smittsomme sykdomsmarkører og indikatorer på fysiologiske tilstander % Allergimarkører % Utstyr50051 % Totalt: %
Vurdering av graden av importsubstitusjon med tanke på volumet av markedet for produkter for immunkjemiske metoder som helhet Markedssegmenter Markedsvolum i Russland, mln. Salgsvolum av innenlandske produsenter, millioner rubler Andel importsubstitusjon Infeksjonssykdomsmarkører % Ikke-smittsomme sykdomsmarkører og indikatorer på fysiologiske tilstander % Allergimarkører % Utstyr % Totalt: %
Problemer for innenlandske produsenter i industrien: ELISA-metoden begynner å bli foreldet. Det er en gradvis utskifting av innenlandske IF-reagenser med importerte kjemiluminescerende; Det eksisterende offentlige anskaffelsessystemet stimulerer enten kjøp av de billigste varene eller importerte produkter med unike egenskaper; En av hovedårsakene til den utilstrekkelige utviklingen av innenlandske produsenter av automatisk utstyr og lokaliseringen av produksjonen av importerte produkter er den tolladministrative barrieren; Det viktigste nyere problemet er kollapsen av systemet for statlig registrering av nye produkter i RZN. Opptaket av nye produkter til markedet har praktisk talt stoppet, og de utenlandske produsentene som tidligere har registrert seg med lange lister, fortsetter å ha en fordel i forhold til innenlandske; Hovedårsaken til den teknologiske tilbakegangen er manglende evne til å oppnå retten til å produsere kompatible produkter for moderne utstyr; Den lave graden av konsolidering av innenlandske produsenter og konstante priskriger seg imellom gjør det umulig å utvikle avanserte produkter og konkurrere med ledende aktører på lik linje, inkludert i utenlandske markeder.
Forslag: Innenfor rammen av FCC, innfør en ikke-konkurranseutsatt prosedyre for offentlige anskaffelser av medisinsk utstyr med påfølgende spesifisert publisering. Fastsettelse av finansieringsgrenser basert på gjennomsnittlig markedspris vil gi visse fordeler for innenlandske produsenter, vil tillate å begrense forbruket av dyre importerte reagenser og mer effektivt kontrollere utviklingen av budsjettmidler; Fremme utvidelse og konsolidering av innenlandske produsenter for å konsentrere ressursene om utvikling av moderne produkter og komme inn på det internasjonale markedet. En ikke-konkurranseutsatt offentlig anskaffelsesprosedyre vil raskt etterlate bare virkelig konkurransedyktige virksomheter på markedet; Bevilge statlige midler for å stimulere, på prinsippene for offentlig-privat partnerskap, utviklingen av en rekke tester som er tilstrekkelige til å sikre den biologiske sikkerheten i landet; Tollfritak bør være for komponenter, ikke for ferdige produkter; Harmoniser registreringssystemet med det europeiske, hvor medisinsk utstyr med lavt potensiell risiko registreres på grunnlag av en samsvarserklæring.
Antall definisjoner 96 (48 i duplikater)
Format på arbeidsnettbrettet: strippet 12x8, bryter 1 brønn.
Følsomhet: 1,5 U/ml.
Måleområde: 0-400 U/ml.
Volumet av testprøven er ikke mer enn 25 µl.
Standardisering av betingelsene for å utføre en enzymatisk reaksjon med et kromogen i en termostatstyrt shaker ved 37ºС.
Sett komposisjon:
1. Stripete plate 12 x 8 hull, klar til bruk - 1 stk.
2. Bruksklare kalibreringsprøver (0-400 U/ml) farget med varierende grad av intensitet avhengig av konsentrasjonen - 6 ampuller.
3. Kontrollprøve - 1 hetteglass.
4. En-komponent konjugat, klar til bruk, krever ikke fortynning - 1 hetteglass.
5. Serumfortynningsløsning - 1 hetteglass.
6. Substrat kromogen, en-komponent - løsning av tetrametylbezidin pluss (TMB+) klar til bruk, som ikke krever fortynning - 1 hetteglass.
7. Fosfat-saltvannbufferløsning med tvilling - 2 flasker.
8. Stopp reagens, klar til bruk - 1 hetteglass.
9. Film for liming av nettbrettet - 1 stk.
10. Sjablong for å konstruere en kalibreringsgraf - 1 stk.
11. Skuff for reagens - 2 stk.
12. Pipettespisser for 5-200 µl - 16 stk.
Emballasjen til nettbrettet er en "zip-lock"-pakke i teak.
Stabiliteten til FST-T arbeidsløsningen er minst 5 dager ved en temperatur på +2...8°C.
Oppbevar settet ved +2...8°C. Utløpsdato - 1 år fra produksjonsdatoen.
Registrert i Roszdravnadzor.
NARIKASJONER
EVALUERING AV ET NYTT ELISA TESTSYSTEM
"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 Federal State Scientific Institution SSC VB "Vector" av Rospotrebnadzor, Koltsovo-bosetningen, Novosibirsk-regionen;
2 Institutt for kjemisk biologi og grunnleggende medisin, Novosibirsk;
3 Statens institutt for standardisering og kontroll av medisinsk biologiske preparater oppkalt etter L.A. Tarasevichag Moskva
Resultatene av testing av sensitiviteten, spesifisiteten og reproduserbarheten til et nytt sett med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" utviklet i JSC "Vector-Best" (Novosibirsk) presenteres. De innhentede dataene gjør det mulig å forutsi den diagnostiske påliteligheten til resultatene ved bruk av dette testsystemet for å detektere gruppe A rotavirusantigen i klinisk materiale.
Nøkkelord: ELISA testsystem, effektivitet, rotavirus A
Gruppe A rotavirus (familie Reoviridae, slekt Rotavirus) er den vanligste årsaken til alvorlig gastroenteritt hos små barn over hele verden. Immunkompromitterte voksne blir også ofte syke. Rotavirusinfeksjon (RVI) er en svært smittsom sykdom med flere spredningsveier. Smittekilden er en person med en manifest eller asymptomatisk form av sykdommen, samt en virusbærer. Blant barn og voksne kan RVI vise seg i form av sporadiske tilfeller, lokale gruppesykdommer, utbrudd og er utbredt. Den fekal-orale mekanismen for overføring av denne infeksjonen er realisert av mat (melk og meieriprodukter, babymat), vann og kontakt med husholdningsruter.
Diagnosen rotavirus gastroenteritt i henhold til det kliniske bildet, spesielt med sporadisk sykelighet, gir en viss vanskelighet, siden symptomene som er karakteristiske for denne infeksjonen, avviker lite fra symptomene på andre akutte tarminfeksjoner (AII) av forskjellige etiologier. Differensialdiagnose hos pasienter med rotavirus gastroenteritt utføres både med mattoksiske infeksjoner og med andre virale (norovirus, astrovirus, adenovirus, koronavirus, Coxsackie enterovirus og ECHO) og bakterielle (salmonellose, dysenteri, kolera, yersiniose, opportunistiske) infeksjoner). etiologi. Dessverre utfører ikke alle spesialiserte medisinske institusjoner i den russiske føderasjonen diagnostikk av rotavirusinfeksjon.
Diagnostiske metoder for RVI er rettet mot å påvise hele virioner, viralt antigen eller virusspesifikt RNA i feces. En lovende tilnærming til direkte påvisning av virus både i klinisk materiale og i miljøobjekter er metoden omvendt trans(RT-PCR). De siste årene har testsystemer blitt laget basert på moderne vitenskapelig utvikling med en kombinasjon av ulike metoder for å detektere rotavirus: multipleks PCR med hybridisering-fluorescensdeteksjon av amplifikasjonsprodukter "ved endepunkt"; endepunktsimmuno-PCR (IPCR) med sanntidsdeteksjon; kvantitativ RT-PCR med sanntidsdeteksjon. I forskningslaboratorier brukes elektronmikroskopi for raskt å oppdage rotavirus. Imidlertid er alle de ovennevnte metodene ganske arbeidskrevende og krever dyre instrumenter og høyt kvalifisert personell. Ved utførelse av laboratoriediagnostikk på sykehus og poliklinisk foretrekkes derfor metoder basert på påvisning av viralt antigen i avføring ved bruk av enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA) med mono- og polyponiske antistoffer mot rotavirus. Denne metoden er tilgjengelig for praktiske laboratorier, er enkel å sette opp og lar deg raskt få resultatet.
Formålet med dette arbeidet er å studere den diagnostiske effektiviteten til et nytt sett med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" utviklet i JSC "Vector-Best", Novosibirsk.
^September-desember
Materialer og metoder
Materialet i studien var fekale prøver av små barn diagnostisert med akutt tarminfeksjon og uten kliniske manifestasjoner av tarminfeksjon, som ble innlagt på sykehus ved avdelingene for tarminfeksjoner og luftveisinfeksjoner ved Children's City Clinical Hospital nr. 3 i Novosibirsk. Avføringsprøver ble samlet i sterile engangsplastbeholdere i et volum på 2-3 ml ved innleggelse av pasienter til sykehusavdelingen og oppbevart ved -20 °C i 15 dager. Lengre lagring av materialet ble utført ved -70 °C.
Et panel med 104 fekale prøver som tidligere ble testet for tilstedeværelse av AII-patogener ble brukt i arbeidet. Av dem:
30 prøver hvor kun gruppe A rotavirus ble påvist ved ELISA og RT-PCR; genotyping ved RT-PCR viste at fekale prøver inneholdt rotavirus av genotypen PG1 (18 prøver), PG2 (4 prøver), PG3 (3 prøver), PG4 (2 prøver), PG4 (1 prøve), PG9 (1 prøve) , PG3 (1 prøve);
14 prøver hvor kun norovirus av den andre genotypen ble påvist ved RT-PCR, som ble bekreftet ved å bestemme nukleotidsekvensen til 5"-regionen av kapsidgenet lokalisert på genomet til norovirus i området 5085-5485 timer;
15 prøver der kun astrovirus ble påvist ved RT-PCR, som ble bekreftet ved å bestemme nukleotidsekvensen til 5"-regionen av kapsidgenet lokalisert på astrovirusgenomet i området 4526-4955 bp; 15 prøver der kun adenovirus ble påvist ved PCR;
30 fekale prøver (kontroll) fra barn uten kliniske manifestasjoner av tarminfeksjon, innlagt på sykehuset i respirasjonsavdelingen; Foreløpig analyse avslørte ikke de ovennevnte virale patogenene i disse prøvene.
Prøver ble testet for tilstedeværelse eller fravær av rota-, noro-, astro- og adenovirus ved RT-PCR ved bruk av kommersielle sett registrert i den russiske føderasjonen "AmpliSense No virus 1, 2 genotyper - 306/322", "AmpliSense Astrovirus -165 ", "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (produsert av Central Research Institute of Epidemiology, RF). Studien av prøver ble utført i samsvar med bruksanvisningen for de respektive settene med reagenser i løpet av utløpsdatoen. Prøver positive for rotavirus ble genotypet ved RT-PCR. Bestemmelsen av tilstedeværelsen eller fraværet av rotavirusantigenet ble også utført ved ELISA ved bruk av et kommersielt testsystem IDEIA™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) i samsvar med instruksjonene for settet.
Ved testing av settet med reagenser "Rota-virus-antigen-ELISA-BEST" ble alle de ovennevnte prøvene (104) kryptert og testet tre ganger med testsettet. Etter fullføring av testene ble prøvene dekodet og resultatene analysert.
Resultater og diskusjon
Sensitiviteten til settet med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" ble vurdert ved antall sammenfall av positive resultater (i %) av testprøver ved bruk av det testede testsystemet og komparatorene. Samtidig ble det funnet at ved bruk av reagenssettet "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST", var alle 30 prøvene med bekreftet tilstedeværelse av rotavirus A positive (tabell 1). Derfor var sensitiviteten til testsettet med reagenser for påvisning av rotavirus A 100 %. Det skal bemerkes at panelet inkluderte prøver med syv forskjellige rotavirus-genotyper, og alle ble påvist av Rota-virus - antigen - OG FAB EST-reagenssettet.
Spesifisiteten til testsystemet ble vurdert ved antall sammenfall av negative resultater (i %) av testprøver ved bruk av det testede testsystemet med data fra foreløpige studier. For å vurdere spesifisiteten inkluderte panelet som ble brukt 30 prøver der ingen virale patogener ble påvist, samt 14 prøver der kun norovirus av den andre genotypen ble påvist ved bruk av RT-PCR-metoden, 15 prøver der RT-PCR-metoden oppdaget bare astrovirus; 15 prøver hvor kun adenovirus ble påvist ved PCR. Det ble bestemt at i 69 av 74 negative prøver, oversteg ikke verdiene av optiske tettheter ved påvisning av Rotavirus-antigen-ELISA-BEST-reagenssettet for tilstedeværelse av rotavirus A bakgrunnsverdiene, det vil si verdiene oppnådd som et resultat av måling av den optiske tettheten i kontrollnegative prøver. To prøver som inneholder astrovirus, en prøve - norovirus av den andre genotypen, en prøve - adenovirus og to prøver der ingen av de ovennevnte virale patogenene ble påvist, viste positive optiske tetthetsverdier. Det skal bemerkes at i prøver hvor ingen av viruspatogenene tidligere var påvist, ble positive signaler kun registrert i en av de gjentatte studiene (tabell 2). Spesifisiteten til settet med reagenser "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" var således 93,2 %.
Under testene ble reproduserbarheten av resultatene oppnådd ved bruk av testsettet med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" på klinisk materiale evaluert - alle prøver ble undersøkt tre ganger i forskjellige eksperimenter for å bestemme variasjonen i resultatene. I nesten alle tilfeller ble lignende resultater oppnådd: testsystemet oppdaget alle negative og positive prøver på samme måte. Unntaket var to prøver der ingen av de virale patogenene tidligere hadde blitt påvist: i en av gjentakelsene for begge prøvene oversteg de optiske tetthetsverdiene ODcrit. Det skal bemerkes at overskuddet var ubetydelig (tabell 2). Dermed var reproduserbarheten av resultatene 98,8 %.
Resultatene av testene som ble utført viste at det testede settet med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" når det gjelder diagnostisk effektivitet - spesifisitet, sensitivitet og reproduserbarhet - er sammenlignbart med diagnostikken som er tilgjengelig i den russiske føderasjonen.
ved bruk av testsettet "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" for påvisning av gruppe A rotavirusantigen i klinisk materiale.
Litteratur
1. Bogomolov B.P. // "Smittsomme sykdommer: akuttdiagnose, behandling, forebygging". - M., Ny diamed. - 2007.
2. Vasilyev B.Ya., Vasilyeva R.I., Lobzin Yu.V.// “Akutte tarmsykdommer. Rotavirus og rotavirusinfeksjon. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., et al.// "BIOpreparations". - 2008 - nr. 2. - s. 15 - 18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. og andre // JMEI - 2008 - nr. 4. - Med. 12 - 16.
5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S., et al. // Problems of Virology. - 2003. - v. 48. - Nr. 6. - s. 1721.
6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chup-rova A.B. // "Problemer med virologi". - 2007. - v.52. -№ 3 - med. 19-23.
7. A. T. Podkolzin, A. A. Mukhina, G. A. Shipulin, et al.//
"Smittsomme sykdommer". - 2004. - v. 2. - Nr. 4. - s. 85-91.
8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// Terapeutisk arkiv. - 2007. - v. 79. - Nr. 11. -s. 10-16.
9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Epidemiology and Infectious Diseases. -2004.-nr 6.-s. 17-20.
10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Hygiene og sanitet. - 2007. - Nr. 1. - s. 56-58.
11. Arcangeletti M.C., De Conto E, Pinardi F., et al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005.-V. 76(3). - S. 165-170.
12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., et al. // Epidemiol. Infisere. - 2008. V. 136(3). - S. 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. metoder. -2006. - V. 137(2). - S. 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., et al. //J. Clin. mikrobiol. - 2008. V. 46 (2). - S. 462 - 469.
15 Schets F.M., van Wijnen J.H., Schijven J.F., et al. //Appl. Environ. mikrobiol. - 2008. - V. 74 (7). - S. 2069 - 2078.
16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., et al. // J. Clin. mikrobiol. - 2008. - V. 46 (5). - S. 1842 - 1843.
Evaluering av sensitiviteten og spesifisiteten til settet med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
Tabell 1
Nr. Antall prøver Deteksjonsresultater med sammenligningsmedisiner IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Deteksjonsresultater med Rotavirus-antigen-ELISA-BEST-settet
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Evaluering av spesifisiteten til settet med reagenser "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST> -
tabell 2
PCR AmpliSense
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotavirus-antigen-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPCrit OPCrit OPCrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ september
desember 2009
AmpliSense
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavirus-
OPcrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"
OPcrit OPcrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EectT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
desember 2009
PCR AmpliSense
adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ negativ
IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavirus - antigen - ELISA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPCrit O P Crit OPCrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131