Laboratoriemetoder for diagnostisering av syfilis. Komplementfikseringstest (RCC) Hva er grunnlaget for den serologiske forskningsmetoden

Hva viser en serologisk blodprøve? Diagnostiske tiltak er det viktigste stadiet i behandlingen av enhver sykdom. Suksessen til behandlingen avhenger ikke bare av de foreskrevne legemidlene, men også i stor grad av hvor riktig diagnosen ble stilt.

I tillegg kan diagnostikk forebygge komplikasjoner og komorbiditeter. Ved hjelp av en serologisk analyse av pasientens blod oppdages tilstedeværelsen av antistoffer og antigener. Studien bidrar til å finne mange sykdommer, bestemme deres fase og kontrollere behandlingsforløpet.

Hva er serologi?

Serologi er grenen av immunologi som studerer reaksjonene mellom antigener og antistoffer. Denne grenen av medisinen omhandler studiet av blodplasma og dets immunologiske egenskaper.

I dag er en serologisk blodprøve for antistoffer en pålitelig måte å oppdage humant immunsviktvirus, hepatitt, brucellose, kjønnssykdommer og andre livstruende sykdommer. La oss finne ut i hvilke tilfeller det er foreskrevet.

Indikasjoner for avtale

En serologisk blodprøve er nødvendig for å identifisere årsaken til sykdommen i tilfelle problemer med å stille en diagnose.

For å utføre denne reaksjonen injiseres antigener av patogener i plasmaet, og deretter studerer laboratorieassistenten den pågående prosessen. Eller de utfører en omvendt reaksjon: antistoffer injiseres i det infiserte blodet for å bestemme den spesifikke tilknytningen til patogenet.

Anvendelsesområde

Denne studien brukes i ulike grener av medisinen. Ved hjelp av denne reaksjonen oppdages spesifikke celler og antistoffer produsert av kroppen for å bekjempe infeksjoner og virus.

I tillegg, ved hjelp av den serologiske metoden, bestemmes en persons blodtype.

En lignende serologisk blodprøve brukes i gynekologi for å diagnostisere seksuelt overførbare sykdommer. Denne metoden praktiseres også for omfattende undersøkelser av gravide kvinner (påvisning av toksoplasmose, HIV, syfilis, etc.). Det er obligatorisk å bestå denne testen ved påmelding til svangerskapsklinikken.

Hos barn brukes en serologisk test for å bekrefte diagnosen såkalte "barnesykdommer" (vannkopper, meslinger, røde hunder, etc.) i tilfelle symptomene ikke har uttalte manifestasjoner og det er umulig å identifisere sykdommen ved å analysere kliniske indikasjoner.

Påvisning av kjønnssykdommer

For venerologer er denne testen virkelig uunnværlig og lar deg stille en diagnose veldig nøyaktig.

Med et uskarpt klinisk bilde lar en serologisk blodprøve for syfilis, giardiasis, ureaplasmose, klamydia, herpes og andre sykdommer deg raskt identifisere tilstedeværelsen av antistoffer.

Virale og infeksjonssykdommer

Serologisk analyse brukes aktivt av gastroenterologer, hepatologer og spesialister på infeksjonssykdommer for å diagnostisere viral hepatitt.

Dechiffrering av en serologisk blodprøve gjør det mulig å bestemme stadiet av sykdomsforløpet og svare på spørsmålet om hvor mye sykehusinnleggelse som er nødvendig for øyeblikket. Hvordan forberede seg riktig?

Forberedelse til levering av analysen

Serologiske blodprøver utføres i både offentlige og kommersielle klinikker. Preferanse bør gis til et laboratorium med moderne utstyr og kvalifisert personell.

Biologiske prøver for forskning kan være spytt og avføring, men i de fleste tilfeller brukes venøst ​​blod til pasienten. Blod for en serologisk test tas fra cubitalvenen i et laboratorium. Før du tar testen, bør du rådføre deg med legen din om forberedelse til denne prosedyren.

For å forberede deg på levering av en analyse for en serologisk studie, må du følge noen få enkle regler.

Blod tas i en rolig tilstand før måltider, det vil si på tom mage. Før dette bør du ikke gjennomgå andre studier, som røntgen, ultralyd osv.

Det er nødvendig å utelukke bruken av antibakterielle og noen andre legemidler noen uker før du donerer blod. Visse anbefalinger i dette tilfellet avhenger av sykdommen som testen gjøres for. For eksempel innebærer en hepatitttest å unngå fet mat og alkohol 48 timer før prosedyren.

Fluorescensreaksjon

Blant variantene av serologiske reaksjoner er det en fluorescensreaksjon. Denne teknikken bruker et reagens som fremhever antistoffer i blodserumet.

Å sette en serologisk reaksjon av direkte type innebærer merking av spesifikke antistoffer med et fluorescerende stoff. Denne reaksjonen er den raskeste og utføres i ett trinn.

Et annet alternativ for å gjennomføre en slik analyse kalles indirekte, eller RNIF. Det utføres i to trinn. I det første trinnet er ikke antistoffer merket med fluorescerende etiketter, og i det andre trinnet brukes passende merkede antistoffer for å påvise antigener og antistoffer. Luminescensen skjer først etter at binding til et spesifikt antistoff oppstår.

Hva viser en serologisk blodprøve? Resultatet av hele prosedyren blir evaluert av en spesiell enhet som analyserer strålingsstyrken, avslører formen og størrelsen på objektet som studeres. Årsaksmidlene til infeksjonssykdommer oppdages med et resultat, hvis pålitelighet er 90-95%, avhengig av type og stadium av patologi.

Koblet immunosorbentanalyse

Denne typen serologi bruker unike, stabile reagenser. Markerte stoffer ser ut til å holde seg til de ønskede antistoffene. Som et resultat får vi et kvalitativt eller kvantitativt resultat.

Hvis ingen uttrykte markører blir funnet, vil resultatet bli ansett som negativt. Hvis tilstedeværelsen av antistoffer i biologiske prøver under en kvalitativ studie oppdages, anses resultatet av analysen som positivt. Ved kvantifisering av celler gir analysen et mer nøyaktig resultat.

Ved å analysere indikatorene for analysen (for eksempel mengden oppdagede celler), bestemmer spesialisten om sykdommen er i det innledende stadiet, i det akutte stadiet, eller om den kroniske formen av patologien har forverret seg. For å stille en diagnose tar legen hensyn til ikke bare dataene fra den serologiske studien, men også det kliniske bildet av sykdommen.

Funksjoner ved denne testen

Å gjennomføre denne analysen er ikke alltid i stand til å gi 100 % sikkerhet for at en bestemt sykdom er oppdaget. Det hender at resultatene kan være tvetydige og andre prosedyrer er nødvendige.

For eksempel, under en test for brucellose, testes serum for selvretensjon uten antigen. Dette øker testingens pålitelighet betydelig. En analyse for brucellose kan være positiv eller negativ, og også forårsake tvil.

Dersom du får tvilsomme resultater som ikke har en entydig tolkning, anbefales det å ta analysen på nytt. I tillegg kan brucellose påvises ved blodkulturer, undersøkelse av benmarg og cerebrospinalvæske.

Fordeler med en serologisk blodprøve

Diagnostiske teknikker ved bruk av serologiske tester er mye brukt i moderne medisinsk praksis. Dette gjøres spesielt ofte ved bestemmelse av virale og smittsomme patologier.

De samme testene brukes i geografisk screening og medisinsk undersøkelse for å hindre epidemiologisk spredning av smitte.

Fordelene med metoden inkluderer:

  • Høy grad av selvtillit.
  • Rask respons og resultater. Resultatene av RSC er kjent innen 24 timer. I en spesiell situasjon, på sykehus, vil analysen være klar om noen timer.
  • Overvåke utviklingen av sykdommen og effektiviteten av terapien.
  • Lave kostnader og tilgjengelighet for pasienter.

Ulemper med metoden

Serologiske studier har imidlertid også sine ulemper.

Disse inkluderer det faktum at analysen bør ta hensyn til inkubasjonstiden til sykdommen for å få et mer pålitelig bilde.

For eksempel er bestemmelse av herpes simplex av den første eller andre typen bare mulig etter 14 dager fra infeksjonsøyeblikket. En analyse for tilstedeværelsen av immunsviktviruset utføres etter 30 dager, etter 90 dager og seks måneder etter kontakt med en infisert person.

Selvfølgelig kan påliteligheten til resultatene også påvirkes av den menneskelige faktoren: forsømmelse av reglene for å forberede blodprøvetaking eller en feil gjort av laboratorieassistenten under reaksjonen.

I følge statistikk kan et feilaktig resultat oppnås i 5% av tilfellene. En erfaren lege, når han undersøker en pasient, etter å ha studert det kliniske bildet, kan i de fleste tilfeller beregne feilen som er gjort.

Innholdsfortegnelse for emnet "Metoder for påvisning av virus. Metoder for diagnostisering av mykoser (soppsykdommer). Metoder for påvisning av protozoer.":










Påvisning av antivirale antistoffer (AT) i blodserum. RTGA. RSK. REV. Immunsorptive metoder for påvisning av antivirale antistoffer.

En enklere og rimeligere tilnærming - påvisning av antivirale antistoffer (AT) i serum. Blodprøver bør tas to ganger: umiddelbart etter debut av kliniske tegn og etter 2~3 uker. Det er ekstremt viktig å undersøke nøyaktig to serumprøver. Resultatene av en enkelt studie kan ikke anses som avgjørende på grunn av manglende evne til å koble utseendet til AT med den foreliggende saken. Det er mulig at disse antistoffene sirkulerer etter en tidligere infeksjon. I en slik situasjon kan rollen til studiet av serum oppnådd i løpet av rekonvalesensperioden neppe overvurderes. Tilstedeværelsen av sykdommen i perioden med å ta den første prøven indikeres av minst en firedobling av AT-titeren, som ble oppdaget under studien av den andre prøven.

Metodene som er oppført nedenfor tillater ikke differensiering av antistoffer(AT) dannet under sykdom og sirkulerer etter bedring (varigheten av denne perioden varierer for ulike infeksjoner). Siden for adekvat diagnose er det nødvendig å bekrefte en betydelig økning i AT-titere i to prøver, undersøkes den første prøven i den akutte fasen, og den andre - i gjenopprettingsperioden (etter 2-3 uker). Resultatene som er oppnådd er retrospektive og mer egnet for epidemiologiske undersøkelser.

RTGA oppdager AT syntetisert mot hemagglutininene til virus (for eksempel influensavirus). Metoden gjør det enkelt å påvise slike antistoffer (AT) i pasientens serum.

RSK- grunnleggende serodiagnose av virusinfeksjoner(blant tilgjengelig). Reaksjonen detekterer komplementfikserende IgM og IgG, men skiller dem ikke; for å optimalisere de oppnådde resultatene, krever formuleringen av reaksjonen visse ferdigheter hos personellet.

REV. Hvis en biopsi av infisert vev er tilgjengelig og kommersielle fluorescein-merkede AT-sett er tilgjengelige, kan direkte immunfluorescens bekrefte diagnosen. Formuleringen av reaksjonen inkluderer inkubering av det studerte vevet med AT, deres påfølgende fjerning og fluorescerende mikroskopi av prøven.

Immunsorpsjonsmetoder for påvisning av antivirale antistoffer

Immunosorpsjonsmetoder(for eksempel ELISA og RIA) er mer informative, siden de oppdager IgM og IgG separat, noe som lar deg trekke visse konklusjoner om dynamikken i den smittsomme prosessen eller rekonvalesenstilstanden. For å påvise AT adsorberes kjent Ag på et fast underlag (for eksempel på veggene av reagensrør, plastmikroplater, petriskåler) og ulike fortynninger av pasientens serum tilsettes. Etter passende inkubering fjernes ubundne AT-er, enzymmerket antiserum mot humant Ig tilsettes, prosedyren for inkubering og vasking av ubundne AT-er gjentas, og eventuelt kromogent substrat (sensitivt for virkningen av enzymet) tilsettes. Siden fargeendringen er proporsjonal med innholdet av spesifikke antistoffer, er det fullt mulig å bestemme deres titer ved spektrofotometrisk metode. Ved diagnostisering av HIV-infeksjon har immunblottingmetoden funnet den mest utbredte bruken.

Komplementfikseringsreaksjonen (RCC) utføres i to faser: i den første fasen kombineres antigenet med testserumet, hvor tilstedeværelse av antistoffer antas og komplement tilsettes, inkuberes i en termostat i 30 minutter.

Andre fase: legg til det hemolytiske systemet (sauerytrocytter + hemolytisk serum). Etter inkubering i termostat i 30 minutter, tas resultatet i betraktning.

Med en positiv RSK danner serumantistoffer, etter å ha kombinert med antigenet, et immunkompleks som fester komplement til seg selv, og hemolyse vil ikke forekomme. Hvis reaksjonen er negativ (det er ingen antistoffer i testserumet), vil komplementet forbli fritt og hemolyse vil skje.

RSK brukes til serologisk diagnose av syfilis, gonoré, tyfus og andre sykdommer.

Immunitetsreaksjoner ved bruk av merkede antigener og antistoffer er basert på det faktum at en av ingrediensene som er involvert i reaksjonen (antigener eller antistoffer) er kombinert med et merke som lett kan oppdages. Fluorokromer (RIF), enzymer (ELISA), radioisotoper (RIA), elektrontette forbindelser (IEM) brukes som etiketter.

Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA), som andre immunreaksjoner, brukes: 1) for å påvise et ukjent antigen ved bruk av kjente antistoffer, eller 2) for å påvise antistoffer i blodserum ved å bruke et kjent antigen. Det særegne ved reaksjonen er at den kjente ingrediensen i reaksjonen er kombinert med et enzym (for eksempel peroksidase). Tilstedeværelsen av enzymet bestemmes av substratet, som farges av enzymets virkning. Den mest brukte fastfase ELISA.

1) Antigenpåvisning. Det første trinnet er adsorpsjonen av spesifikke antistoffer på den faste fasen, som brukes som polystyren- eller polyvinylkloridoverflater på brønnene til plastpaneler. Det andre trinnet er tilsetningen av testmaterialet, som forutsetter tilstedeværelsen av et antigen. Antigen binder seg til antistoffer. Brønnene vaskes deretter. Det tredje trinnet er tilsetning av et spesifikt serum som inneholder antistoffer mot et gitt antigen merket med et enzym. Merkede antistoffer festes til antigener, og deres overskudd fjernes ved vask. Således, hvis det er antigener i testmaterialet, dannes et antistoff-antigen-antistoff-kompleks, merket med et enzym, på overflaten av den faste fasen. Et substrat tilsettes for å påvise enzymet. For peroksidase er substratet ortofenylendiamin blandet med H 2 O 2 i en bufferløsning. Under virkningen av enzymet dannes produkter som har en brun farge.



2) Påvisning av antistoffer. Det første trinnet er adsorpsjonen av spesifikke antigener på veggene i brønnene. Vanligvis, i kommersielle testsystemer, er antigener allerede adsorbert på overflaten av brønnene. Den andre fasen er tilsetningen av det studerte serumet. I nærvær av antistoffer dannes et antigen-antistoffkompleks. Det tredje trinnet - etter vask, tilsettes antiglobulinantistoffer (antistoffer mot humane globuliner) merket med et enzym til brønnene. Resultatene av reaksjonen blir evaluert som beskrevet ovenfor.

Kjente positive og kjente negative prøver, som er tilgjengelige i kommersielle systemer, brukes som kontroller.

ELISA brukes til å diagnostisere mange infeksjonssykdommer, spesielt HIV-infeksjon, viral hepatitt.

Immunoblotting er en type ELISA (en kombinasjon av elektroforese og ELISA). Biopolymerer, slik som humane immunsviktvirusantigener, separeres ved gelelektroforese. De separerte molekylene overføres deretter til overflaten av nitrocellulosen i samme rekkefølge som de var i gelen. Overføringsprosessen kalles blotting, og den resulterende utskriften kalles en blot (engelsk blot - spot). Dette avtrykket påvirkes av det undersøkte serumet. Deretter tilsettes peroksidase-merket anti-humant globulinserum, etterfulgt av substratet, som blir brunt under påvirkning av enzymet. Brune striper dannes der antistoffer har kombinert med antigener. Metoden lar deg oppdage antistoffer mot individuelle antigener av viruset.



Radioimmunoassay (RIA). Metoden lar deg bestemme mengden antigen i testprøven. Først festes et materiale som antagelig inneholder et antigen til immunserumet, deretter et kjent antigen merket med en radioisotop, for eksempel I 125 . Som et resultat binder det detekterbare (umerkede) og kjente merkede antigenet til et begrenset antall antistoffer. Siden det merkede antigenet tilsettes i en viss dose, er det mulig å bestemme hvilken del av det som bandt seg til antistoffene, og som forble fri på grunn av konkurranse med det umerkede antigenet og ble fjernet. Mengden merket antigen bundet til antistoffene bestemmes ved bruk av en teller. Det er omvendt proporsjonalt med mengden antigen som bestemmes.

Immunelektronmikroskopi (IEM). Et antigen, for eksempel et influensavirus, er festet til et spesifikt antiserum merket med et elektrontett stoff. Metallholdige proteiner (ferritin, hemocyanin) eller kolloidalt gull brukes som etikett. Ved mikroskopering i et elektronmikroskop blir det tatt bilder som viser influensavirioner med mørke prikker festet til seg - molekyler av merkede antistoffer.

test spørsmål

Ervervet immunitet, dens forskjell fra arvelig (arter, medfødt). Typer ervervet immunitet.

En oppgave. I familien ble barnet Valery, tre år gammel, syk med difteri. Andre familiemedlemmer ble ikke syke, og moren hadde vært syk med difteri i barndommen, og faren ble vaksinert med difteritoksoid. Den eldre søsteren Natasha, fem år gammel, ble ikke vaksinert med difteritoksoid på grunn av medisinske kontraindikasjoner, så hun måtte gjennom nødprofylakse ved hjelp av anti-difteri antitoksisk serum. Den yngre broren, Vitaly, ble ikke syk på tre måneder, selv om han ikke var vaksinert med noe. Det er en katt og en hund i huset, de ble ikke syke. Nevn for hvert av familiemedlemmene og for dyr hvilken type immunitet de ikke ble syke av.

Hva er et antigen? Hvilke stoffer kan være antigener? Komplette antigener og haptener, hvordan skiller de seg fra hverandre? Strukturen til antigenet. Hva er navnet på den delen av et antigenmolekyl som bestemmer dets spesifisitet? Nevn antigenene du kjenner. Hva er autoantigener? Antigen struktur av en mikrobiell celle. Flagella og somatiske antigener; lokalisering, bokstavbetegnelse, kjemisk natur, forhold til temperatur, fremgangsmåte, praktisk anvendelse. Anatoksin, dets egenskaper, anvendelse, produksjon. Hvilket vev utgjør kroppens immunsystem? Spesifiser de sentrale og perifere organene til det menneskelige immunsystemet. Beskriv prosessen med dannelse av humoral og cellulær immunrespons. Spesifiser cellene som fanger og fordøyer antigenet; celler som samhandler i dannelsen av humoral immunitet, cellulær immunitet; celler som transformerer og blir antistoffproduserende plasmaceller; celler som stimulerer denne prosessen; celler som undertrykker immunresponsen; celler som dreper tumorceller og virusinfiserte celler. Hva er antistoffer? Hvordan få immunserum? Hvordan få et serum som nøytraliserer tetanustoksin? Antitoksiner, agglutininer, hemolysiner dannes mot hvilke antigener? Hvilke antistoffer dannes når difteritoksoid injiseres i kroppen? difteri bakterier? Kjemisk natur og struktur av antistoffer. Hva er det aktive stedet til et immunglobulin? Liste klassene av immunglobuliner, deres egenskaper. Spesifiser klassen av immunglobuliner som kan krysse placenta. Hvilken klasse tilhører sekretoriske immunglobuliner? Dynamikk ved akkumulering av antistoffer. Hvordan er en sekundær immunrespons forskjellig fra en primær? Hvordan brukes kunnskap om dynamikken i immunresponsen i praktisk medisin? Hva er immunitetsreaksjoner, hva er deres mekanisme, reaksjonsfaser. I hvilke 2 retninger brukes immunreaksjoner? List opp reaksjonene til immunsystemet.

En oppgave. Erstatt de manglende ordene med "toksoid" eller "antitoksin": _________ er et antigen, _________ er et antistoff, __________ skaper aktiv immunitet når den introduseres i kroppen, __________ skaper passiv immunitet når den introduseres i kroppen, __________ oppnås ved immunisering av dyr , __________ fås fra et giftstoff når det utsettes for formalin og varme, ___________ nøytraliserer giftstoffer, __________ forårsaker dannelse av antistoffer i kroppen.

Agglutinasjonsreaksjon: hva er agglutinasjon, hva er et antigen, hva er et antistoff; metoder for innstilling, hvilke kontroller er satt og for hva; hvordan kontrollene skal se ut. Agglutinerende sera, hva de inneholder, hvordan de oppnås, hva de brukes til; hva er titeren til agglutinerende serum? Reaksjonen av indirekte (passiv) hemagglutinasjon: hva fungerer som et antigen i denne reaksjonen, hvordan det oppnås, reaksjonsmekanismen. Hva er en erytrocyttdiagnostik? Hva er et antistoff erytrocytt diagnosticum? Nedbørsreaksjoner: hva er nedbør, hva fungerer som et antigen; hvordan få utfellende serum? Hva er titeren til utfellende serum? Uttalelsesmetoder, praktisk anvendelse.

Komplementfikseringsreaksjon (RCC): CFR-prinsipp; hva som dannes når immunserumet interagerer med et spesifikt antigen; hva skjer med komplement hvis det er tilstede i denne interaksjonen? Hva er skjebnen til komplement hvis det ikke er noen spesifikk affinitet mellom antigen og antistoffer? Hvis sluttresultatet av RSK er hemolyse, betyr det et positivt eller negativt resultat? RSC-innstillingsteknikk. Hvorfor skal testserumet inaktiveres? Hemolytisk serum: hva inneholder det, hvordan oppnås det, hva er en titer og hvordan bestemmes det? Komplement: kjemisk natur, forhold til høy temperatur, hvor er det inneholdt? Hvordan kan komplement ødelegges? Hva er praktisk brukt som komplement?

En oppgave. Det ble funnet en blodflekk på klærne til en mann anklaget for drap. Hvilken reaksjon kan brukes for å avgjøre om det er menneskeblod; hva vil være antigenet i denne reaksjonen, og hva vil være antistoffene; hvilket diagnostisk legemiddel skal være i laboratoriet for denne reaksjonen, hvordan tilberedes det?

En oppgave. Hvordan bestemme, ved hjelp av nedbørsreaksjonen, om en prøve av storfekjøtt eller hestekjøtt levert til analyse; hvilke diagnostiske forberedelser er nødvendig?

Utfellingsreaksjon i agargel, formuleringsmetoder, praktisk anvendelse.

Serologisk undersøkelse (tester)- laboratorieforskningsmetoder basert på påvisning av antistoffer eller antigener i pasientens biologiske materiale. Oftest brukes blod til analyse, sjeldnere - urin, spytt, purulent utflod eller vevsprøver tatt under en biopsi.

Bruksområde

  • Bestemmelse av blodgruppen.
  • Identifikasjon av spesifikke tumorproteiner - tumormarkører (for eksempel ved mistanke om kreft i eggstokkene, prostata, blære, mage, etc.).
  • Diagnose av virale, bakterielle, sopp-, protozoinfeksjoner (HIV, syfilis, toksoplasmose, klamydia, røde hunder, herpes, helmintiaser, flått-encefalitt, etc.).
  • Bestemmelse av hormoner, enzymer og legemidler inneholdt i det undersøkte biomaterialet i mindre konsentrasjoner (mindre enn 10−10 g/l).

Essensen av metoden for serologiske tester

Serologiske tester er forskjellige i teknikk, men de er alle resultatet av interaksjonen mellom antigener (fremmede forbindelser) med de tilsvarende antistoffene. Studien består av to påfølgende faser. Den første fasen er preget av interaksjonen mellom antigener og antistoffer med dannelse av immunkomplekser (positiv reaksjon). I den andre fasen dukker det opp ytre tegn som bekrefter tilstedeværelsen av de samme kompleksene (avhengig av reaksjonstypen kan dette være uklarhet av testløsningen, en endring i fargen, flassing osv.). Fravær av synlige fysiske fenomener regnes som et negativt testresultat.

Forberedelse til serologiske studier

Avhenger av type forskning. En medisinsk spesialist bør fortelle deg om funksjonene ved å bestå en spesifikk analyse når du registrerer deg for prosedyren.

Du kan ta nødvendig serologisk test på Spectra-klinikken. Vi bestiller analyser i de beste storbylaboratoriene som opererer i henhold til europeiske standarder, noe som garanterer raske og pålitelige resultater. Legene våre vil hjelpe til med å tyde konklusjonen og gi anbefalinger for videre diagnose.

Nettstedet gir kun referanseinformasjon for informasjonsformål. Diagnose og behandling av sykdommer bør utføres under tilsyn av en spesialist. Alle legemidler har kontraindikasjoner. Ekspertråd er påkrevd!

Serologisk blodanalyse er en metode for laboratorietesting av visse antigener eller antistoffer ( spesifikke proteiner) i pasientens serum basert på kroppens immunresponser. Denne metoden brukes når diagnostikk infeksjonssykdommer for å oppdage tilstedeværelsen av antistoffer i pasientens blod mot en bestemt type virus eller bakterier, samt å bestemme blodtypen.

Materiale under utredning

Først av alt, for serologisk analyse, brukes biologisk materiale samlet fra pasienten:
  • blodserum
  • spytt
  • avføring
I noen tilfeller blir materialet isolert fra visse miljøobjekter undersøkt:
  • jorden

Metode for analyse eller blodprøvetaking

Denne analysen krever ikke spesiell forberedelse av pasienten. Blodprøvetaking utføres om morgenen på tom mage og utføres i behandlingsrommene til medisinske institusjoner, i henhold til generelt aksepterte hematologiske metoder. For serologisk testing utføres blodprøvetaking ved to metoder: venøst ​​blod tas fra pasientens cubitale vene, og kapillærblod tas fra ringfingeren. Blodet legges i sterile forseglede reagensglass.

Funksjoner ved blodtransport og serumlagring

Umiddelbart etter blodprøvetaking transporteres det til et spesielt laboratorium, hvor serumet tilberedes samme dag. Serumlagring er ikke tillatt mer enn 4-6 dager i kjøleskap ved en temperatur på 2-4 grader. Hvis lengre oppbevaring er nødvendig, fryses serumet. For å unngå å krenke serumkvaliteten, er det tillatt å fryse det en gang og følgelig tine det. Ved langtidslagring mister antistoffer sine egenskaper og blir delvis inaktive, de mest følsomme for frysing er immunglobuliner av klassen M. Etter å ha tint serumet, er det nødvendig å blande det grundig til en homogen masse, noe som bidrar til å gjenopprette konsentrasjonen av antistoffer i dette serumet.


Hva brukes serologi til?

Serologiske laboratoriediagnostiske metoder brukes for å oppdage sykdommer som f.eks echinokokkose, trikinose, toksocariasis, opisthorchiasis, cysticercosis, toksoplasmose, amoebiasis, giardiasis, for å bestemme effektiviteten av behandlingsforløpet og til slutt for å oppdage et tilbakefall av sykdommen etter at pasienten har blitt helt frisk.

Grunnleggende metoder for serologisk diagnostikk

Immunfluorescensreaksjon (RIF)

Denne reaksjonen er en indirekte versjon av en serologisk studie, det vil si at den utføres i to trinn. I det første trinnet påvises det nødvendige antistoffet i det sirkulerende antigen-antistoffkomplekset ved bruk av antiglobulin, som i struktur ligner immunserumproteiner. Identifikasjon av det ønskede antistoffet er også mulig når man studerer et forhåndspreparert antigenpreparat under et fluorescerende mikroskop, uten bruk av antiglobuliner.

Immunfluorescerende reaksjon er en svært tidkrevende prosess som krever mye tid og ansvar fra en spesialist. Reaksjonen begynner med tilberedning av løsninger, deretter blir sera og deres kontrollprøver utsatt for titrering ( en prosess som gjør det mulig å bestemme innholdet av et bestemt stoff ved gradvis å blande en testløsning med en kontrollert mengde av et reagens). Tidligere forberedte fortynninger og deres kontrollprøver påføres forsiktig på objektglass med antigen. Deretter blir preparatene utsatt for inkubering, etterfulgt av vask og tørking i luft. Et tynt lag med antiserum påføres de antigenholdige objektglassene, hvoretter preparatene inkuberes på nytt og hele den forrige handlingskjeden gjentas, og avsluttes med at preparatet tørker. Som et resultat blir preparatet på et objektglass behandlet med glyserol og undersøkt under et fluorescerende mikroskop.

Resultatene av reaksjonen blir evaluert på en firepunkts skala, som er preget av intensiteten av overflatens gulgrønne glød av antigenceller:
+ svært svak glød av cellen, merkbar bare på periferien
++ svak glød av celleperiferien, men med en godt synlig grønn fargetone
+++/++++ lysegrønn glød av celleperiferien
Reaksjonstiteren anses å være en slik serumfortynning der minst 50 % av antigencellene viser en klar overflateglød, det vil si resultatet av reaksjonen +++ eller ++++ . Verdien av reaksjonsområdet er fra 1/80 til 1/100.

Intensiteten av reaksjonen avhenger av antall utfelte erytrocytter i bunnen av de dannede brønnene:
en negativ reaksjon, som er preget av avsetning av erytrocytter på bunnen av brønnene i form av en liten ring med glatte kanter eller "knapper"
+ lav intensitet er denne reaksjonen preget av små enkeltavsetninger i bunnen av hullet. Ikke-agglutinerte erytrocytter danner en "liten ring" i midten av brønnen
++ middels intensitet, den er preget av dannelsen av en "bred tett ring" av ikke-agglutinerte erytrocytter i bunnen av brønnen
+++ intens reaksjon, agglutinerte erytrocytter danner de såkalte "paraplyene", i midten av hvilke ringer dannet av faste ikke-agglutinerte erytrocytter er tydelig synlige
++++ en skarp intens reaksjon der alle erytrocytter agglutineres og danner "paraplyer" langs bunnen av hullene.
Titeren til denne reaksjonen regnes som den siste fortynningen av serum, der åpenbar agglutinasjon av erytrocytter påvises minst +++ , det vil si med en intens eller skarp intens reaksjon.

Påliteligheten og kvaliteten til serologiske diagnostiske metoder avhenger av organiseringen av intern og ekstern laboratoriekontroll, bestående av flere uavhengige prosedyrer designet for å vurdere kvaliteten på resultatene av analysen.