Mga pamamaraan sa laboratoryo para sa diagnosis ng syphilis. Complement fixation test (RCC) Ano ang batayan ng serological na paraan ng pananaliksik

Ano ang ipinapakita ng isang serological blood test? Ang mga hakbang sa diagnostic ay ang pinakamahalagang yugto sa paggamot ng anumang sakit. Ang tagumpay ng paggamot ay nakasalalay hindi lamang sa mga iniresetang gamot, ngunit higit sa lahat sa kung paano tama ang pagsusuri ay ginawa.

Bilang karagdagan, ang mga diagnostic ay maaaring maiwasan ang mga komplikasyon at comorbidities. Sa tulong ng isang serological analysis ng dugo ng pasyente, ang pagkakaroon ng mga antibodies at antigens ay napansin. Ang pag-aaral ay nakakatulong upang makahanap ng maraming sakit, matukoy ang kanilang yugto at kontrolin ang kurso ng paggamot.

Ano ang serology?

Ang serology ay ang sangay ng immunology na nag-aaral ng mga reaksyon ng antigens sa antibodies. Ang sangay ng gamot na ito ay tumatalakay sa pag-aaral ng plasma ng dugo at mga katangian ng immunological nito.

Ngayon, ang isang serological blood test para sa mga antibodies ay isang maaasahang paraan upang makita ang human immunodeficiency virus, hepatitis, brucellosis, STD at iba pang mga sakit na nagbabanta sa buhay. Alamin natin kung anong mga kaso ang inireseta.

Mga indikasyon para sa appointment

Ang isang serological na pagsusuri sa dugo ay kinakailangan upang matukoy ang causative agent ng sakit sa kaso ng kahirapan sa paggawa ng diagnosis.

Upang maisakatuparan ang reaksyong ito, ang mga antigen ng mga pathogen ay iniksyon sa plasma, at pagkatapos ay pinag-aaralan ng katulong sa laboratoryo ang patuloy na proseso. O nagsasagawa sila ng isang baligtad na reaksyon: ang mga antibodies ay iniksyon sa nahawaang dugo upang matukoy ang partikular na kaugnayan ng pathogen.

Saklaw ng aplikasyon

Ang pag-aaral na ito ay ginagamit sa iba't ibang sangay ng medisina. Sa tulong ng reaksyong ito, ang mga partikular na selula at antibodies na ginawa ng katawan ay natutukoy upang labanan ang mga impeksiyon at mga virus.

Bilang karagdagan, gamit ang serological na pamamaraan, ang uri ng dugo ng isang tao ay tinutukoy.

Ang isang katulad na serological blood test ay ginagamit sa ginekolohiya upang masuri ang mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik. Ang pamamaraang ito ay ginagawa din para sa komprehensibong pagsusuri ng mga buntis na kababaihan (detection ng toxoplasmosis, HIV, syphilis, atbp.). Ang pagpasa sa pagsusulit na ito ay sapilitan kapag nagparehistro sa antenatal clinic.

Sa mga bata, ang isang serological test ay ginagamit upang kumpirmahin ang diagnosis ng mga tinatawag na "mga bata" na sakit (chickenpox, tigdas, rubella, atbp.) Kung sakaling ang mga sintomas ay walang binibigkas na mga pagpapakita at imposibleng makilala ang sakit sa pamamagitan ng pagsusuri ng mga klinikal na indikasyon.

Pagtuklas ng mga sakit sa venereal

Para sa mga venereologist, ang pagsubok na ito ay tunay na kailangan at nagbibigay-daan sa iyo upang makagawa ng diagnosis nang napakatumpak.

Sa isang malabong klinikal na larawan, ang isang serological blood test para sa syphilis, giardiasis, ureaplasmosis, chlamydia, herpes at iba pang mga sakit ay nagbibigay-daan sa iyo upang mabilis na makilala ang pagkakaroon ng mga antibodies.

Viral at nakakahawang sakit

Ang serological analysis ay aktibong ginagamit ng mga gastroenterologist, hepatologist at mga espesyalista sa nakakahawang sakit upang masuri ang viral hepatitis.

Ang pag-decipher ng isang serological blood test ay ginagawang posible upang matukoy ang yugto ng kurso ng sakit at sagutin ang tanong kung gaano karaming ospital ang kailangan sa sandaling ito. Paano maghanda nang maayos?

Paghahanda para sa paghahatid ng pagsusuri

Ang mga pagsusuri sa serological na dugo ay ginagawa sa parehong pampubliko at komersyal na mga klinika. Ang kagustuhan ay dapat ibigay sa isang laboratoryo na may modernong kagamitan at mga kwalipikadong tauhan.

Ang mga biological sample para sa pananaliksik ay maaaring laway at dumi, ngunit sa karamihan ng mga kaso ang venous blood ng pasyente ay ginagamit. Ang dugo para sa isang serological test ay kinuha mula sa cubital vein sa isang laboratoryo. Bago kumuha ng pagsusulit, dapat kang kumunsulta sa iyong doktor tungkol sa paghahanda para sa pamamaraang ito.

Upang maghanda para sa paghahatid ng isang pagsusuri para sa isang serological na pag-aaral, kailangan mong sundin ang ilang simpleng mga patakaran.

Ang dugo ay kinuha sa isang kalmado na estado bago kumain, iyon ay, sa walang laman na tiyan. Bago ito, hindi ka dapat sumailalim sa iba pang pag-aaral, tulad ng x-ray, ultrasound, atbp.

Kinakailangang ibukod ang paggamit ng antibacterial at ilang iba pang gamot ilang linggo bago mag-donate ng dugo. Ang ilang mga rekomendasyon sa kasong ito ay nakasalalay sa sakit kung saan ginagawa ang pagsusuri. Halimbawa, ang isang pagsusuri sa hepatitis ay kinabibilangan ng pag-iwas sa matatabang pagkain at alkohol 48 oras bago ang pamamaraan.

Reaksyon ng fluorescence

Kabilang sa mga varieties ng serological reaksyon mayroong isang fluorescence reaksyon. Ang pamamaraan na ito ay gumagamit ng isang reagent na nagha-highlight ng mga antibodies sa serum ng dugo.

Ang pagtatakda ng direktang uri ng serological na reaksyon ay kinabibilangan ng pag-label ng mga partikular na antibodies na may fluorescent substance. Ang reaksyong ito ay ang pinakamabilis at isinasagawa sa isang hakbang.

Ang isa pang opsyon para sa pagsasagawa ng naturang pagsusuri ay tinatawag na hindi direkta, o RNIF. Ito ay isinasagawa sa dalawang yugto. Sa unang hakbang, ang mga antibodies ay hindi nilagyan ng label na fluorescent, at sa pangalawang hakbang, ang mga antibodies na may naaangkop na label ay ginagamit upang makita ang mga antigen at antibodies. Ang luminescence ay nangyayari lamang pagkatapos na nagbubuklod sa isang tiyak na antibody ay nangyayari.

Ano ang ipinapakita ng isang serological blood test? Ang resulta ng buong pamamaraan ay sinusuri ng isang espesyal na aparato na sinusuri ang lakas ng radiation, ipinapakita ang hugis at sukat ng bagay na pinag-aaralan. Ang mga causative agent ng mga nakakahawang sakit ay napansin na may isang resulta, ang pagiging maaasahan ng kung saan ay 90-95%, depende sa uri at yugto ng patolohiya.

Naka-link na immunosorbent assay

Ang mga uri ng serology na ito ay gumagamit ng natatangi, matatag na reagents. Ang mga minarkahang sangkap ay tila dumidikit sa ninanais na mga antibodies. Bilang resulta, nakakakuha tayo ng isang husay o dami ng resulta.

Kung walang nakitang mga ipinahayag na marker, ituturing na negatibo ang resulta. Kung ang pagkakaroon ng mga antibodies sa mga biological sample sa panahon ng isang husay na pag-aaral ay nakita, kung gayon ang resulta ng pagsusuri ay itinuturing na positibo. Kapag nagbibilang ng mga cell, ang pagsusuri ay nagbibigay ng mas tumpak na resulta.

Pag-aaral ng mga tagapagpahiwatig ng pagsusuri (halimbawa, ang dami ng mga nakitang selula), tinutukoy ng espesyalista kung ang sakit ay nasa paunang yugto, sa talamak na yugto, o kung ang talamak na anyo ng patolohiya ay lumala. Upang makagawa ng diagnosis, isinasaalang-alang ng doktor hindi lamang ang data ng serological na pag-aaral, kundi pati na rin ang klinikal na larawan ng sakit.

Mga tampok ng pagsubok na ito

Ang pagsasagawa ng pagsusuring ito ay hindi palaging makapagbibigay ng 100% na katiyakan na ang isang partikular na sakit ay nakita. Ito ay nangyayari na ang mga resulta ay maaaring hindi maliwanag at iba pang mga pamamaraan ay kinakailangan.

Halimbawa, sa panahon ng pagsusuri para sa brucellosis, sinusuri ang serum para sa pagpapanatili sa sarili nang walang antigen. Ito ay makabuluhang pinatataas ang pagiging maaasahan ng pagsubok. Ang pagsusuri para sa brucellosis ay maaaring maging positibo o negatibo, at magdulot din ng pagdududa.

Kung nakatanggap ka ng mga kahina-hinalang resulta na walang malinaw na interpretasyon, inirerekumenda na ulitin ang pagsusuri. Bilang karagdagan, ang brucellosis ay maaaring makita ng mga kultura ng dugo, na sinusuri ang utak ng buto at cerebrospinal fluid.

Mga kalamangan ng isang serological blood test

Ang mga pamamaraan ng diagnostic gamit ang mga serological test ay malawakang ginagamit sa modernong medikal na kasanayan. Ito ay kadalasang ginagawa kapag tinutukoy ang mga viral at nakakahawang pathologies.

Ang parehong mga pagsusuri ay ginagamit sa geographic na screening at medikal na pagsusuri upang maiwasan ang epidemiological na pagkalat ng impeksyon.

Ang mga bentahe ng pamamaraan ay kinabibilangan ng:

  • Mataas na antas ng kumpiyansa.
  • Mabilis na tugon at resulta. Ang mga resulta ng RSC ay malalaman sa loob ng 24 na oras. Sa isang espesyal na sitwasyon, sa isang setting ng ospital, ang pagsusuri ay magiging handa sa loob ng ilang oras.
  • Pagsubaybay sa pag-unlad ng sakit at ang pagiging epektibo ng therapy.
  • Mababang gastos at kakayahang magamit para sa mga pasyente.

Kahinaan ng pamamaraan

Gayunpaman, ang mga pag-aaral ng serological ay mayroon ding mga kakulangan.

Kabilang dito ang katotohanan na ang pagsusuri ay dapat isaalang-alang ang panahon ng pagpapapisa ng itlog ng sakit upang makakuha ng isang mas maaasahang larawan.

Halimbawa, ang pagpapasiya ng herpes simplex ng una o pangalawang uri ay posible lamang pagkatapos ng 14 na araw mula sa sandali ng impeksiyon. Ang pagsusuri para sa pagkakaroon ng immunodeficiency virus ay isinasagawa pagkatapos ng 30 araw, pagkatapos ng 90 araw at anim na buwan pagkatapos makipag-ugnayan sa isang taong nahawahan.

Siyempre, ang pagiging maaasahan ng mga resulta ay maaari ding maimpluwensyahan ng kadahilanan ng tao: kapabayaan ang mga patakaran para sa paghahanda para sa sampling ng dugo o isang pagkakamali na ginawa ng katulong sa laboratoryo sa panahon ng reaksyon.

Ayon sa mga istatistika, ang isang maling resulta ay maaaring makuha sa 5% ng mga kaso. Ang isang nakaranasang doktor, kapag sinusuri ang isang pasyente, na pinag-aralan ang klinikal na larawan, sa karamihan ng mga kaso ay maaaring kalkulahin ang pagkakamaling nagawa.

Talaan ng mga nilalaman ng paksang "Mga Paraan para sa Pagtukoy ng mga Virus. Mga Paraan para sa Pag-diagnose ng Mycoses (Mga Sakit sa Fungal). Mga Paraan para sa Pagtukoy ng Protozoa.":










Ang pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum ng dugo. RTGA. RSK. REEF. Mga pamamaraan ng immunosorptive para sa pagtuklas ng mga antiviral antibodies.

Isang mas simple at mas abot-kayang diskarte - pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum. Ang mga sample ng dugo ay dapat kunin ng dalawang beses: kaagad pagkatapos ng simula ng mga klinikal na palatandaan at pagkatapos ng 2~3 linggo. Napakahalaga na suriin ang eksaktong dalawang sample ng serum. Ang mga resulta ng isang pag-aaral ay hindi maituturing na konklusibo dahil sa kawalan ng kakayahang maiugnay ang hitsura ng AT sa kasalukuyang kaso. Posible na ang mga antibodies na ito ay umiikot pagkatapos ng isang nakaraang impeksiyon. Sa ganoong sitwasyon, ang papel na ginagampanan ng pag-aaral ng suwero na nakuha sa panahon ng convalescence ay halos hindi ma-overestimated. Ang pagkakaroon ng sakit sa panahon ng pagkuha ng unang sample ay ipinahiwatig ng hindi bababa sa isang apat na beses na pagtaas sa AT titer, na nakita sa panahon ng pag-aaral ng pangalawang sample.

Ang mga pamamaraan na nakalista sa ibaba huwag payagan ang pagkakaiba-iba ng mga antibodies(AT) na nabuo sa panahon ng karamdaman at umiikot pagkatapos ng paggaling (ang tagal ng panahong ito ay nagbabago para sa iba't ibang mga impeksyon). Dahil para sa sapat na pagsusuri, kinakailangan upang kumpirmahin ang isang makabuluhang pagtaas sa mga titer ng AT sa dalawang sample, ang unang sample ay sinusuri sa talamak na yugto, at ang pangalawa - sa panahon ng pagbawi (pagkatapos ng 2-3 na linggo). Ang mga resultang nakuha ay retrospective at mas angkop para sa epidemiological survey.

RTGA nakakakita ng AT na synthesize laban sa mga hemagglutinin ng mga virus (halimbawa, ang influenza virus). Pinapadali ng pamamaraan ang pagtuklas ng mga naturang antibodies (AT) sa serum ng pasyente.

RSK- basic serodiagnosis ng mga impeksyon sa viral(kabilang sa magagamit). Nakikita ng reaksyon ang complement-fixing IgM at IgG, ngunit hindi pinagkaiba ang mga ito; upang ma-optimize ang mga resulta na nakuha, ang pagbabalangkas ng reaksyon ay nangangailangan ng ilang mga kasanayan ng mga tauhan.

REEF. Kung ang isang biopsy ng nahawaang tissue ay magagamit at ang komersyal na fluorescein-labeled AT kit ay magagamit, direktang immunofluorescence ay maaaring kumpirmahin ang diagnosis. Ang pagbabalangkas ng reaksyon ay kinabibilangan ng pagpapapisa ng itlog ng pinag-aralan na tissue na may AT, ang kanilang kasunod na pag-alis at fluorescent microscopy ng sample.

Mga pamamaraan ng immunosorption para sa pagtuklas ng mga antiviral antibodies

Mga paraan ng immunosorption(halimbawa, ang ELISA at RIA) ay mas nagbibigay-kaalaman, dahil natukoy nila ang IgM at IgG nang hiwalay, na nagbibigay-daan sa iyo upang makagawa ng ilang mga konklusyon tungkol sa dinamika ng nakakahawang proseso o ang estado ng paggaling. Upang makita ang AT, ang kilalang Ag ay na-adsorbed sa isang solidong substrate (halimbawa, sa mga dingding ng mga test tube, plastic microplate, Petri dish) at iba't ibang dilution ng serum ng pasyente ay idinagdag. Pagkatapos ng naaangkop na incubation, ang mga hindi nakatali na AT ay aalisin, ang antiserum na may label na enzyme laban sa Ig ng tao ay idinagdag, ang pamamaraan para sa pagpapapisa ng itlog at paghuhugas ng mga hindi nakatali na AT ay paulit-ulit, at anumang chromogenic substrate (sensitibo sa pagkilos ng enzyme) ay idinagdag. Dahil ang pagbabago ng kulay ay proporsyonal sa nilalaman ng mga tiyak na antibodies, posible na matukoy ang kanilang titer sa pamamagitan ng spectrophotometric na pamamaraan. Sa diagnosis ng impeksyon sa HIV, natagpuan ng immunoblotting na paraan ang pinakalaganap na paggamit.

Ang complement fixation reaction (RCC) ay isinasagawa sa dalawang yugto: sa unang yugto, ang antigen ay pinagsama sa test serum, kung saan ang pagkakaroon ng mga antibodies ay ipinapalagay at ang pandagdag ay idinagdag, na incubated sa isang thermostat sa loob ng 30 minuto.

Ikalawang yugto: idagdag ang hemolytic system (sheep erythrocytes + hemolytic serum). Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog sa isang termostat sa loob ng 30 minuto, ang resulta ay isinasaalang-alang.

Sa isang positibong RSK, ang mga serum antibodies, na pinagsama sa antigen, ay bumubuo ng isang immune complex na nakakabit ng pandagdag sa sarili nito, at hindi mangyayari ang hemolysis. Kung negatibo ang reaksyon (walang antibodies sa test serum), mananatiling libre ang complement at magaganap ang hemolysis.

Ginagamit ang RSK para sa serological diagnosis ng syphilis, gonorrhea, typhus at iba pang mga sakit.

Ang mga reaksyon ng immune gamit ang mga may label na antigen at antibodies ay batay sa katotohanan na ang isa sa mga sangkap na kasangkot sa reaksyon (antigens o antibodies) ay pinagsama sa ilang label na madaling matukoy. Ang mga fluorochromes (RIF), enzymes (ELISA), radioisotopes (RIA), electron-dense compound (IEM) ay ginagamit bilang mga label.

Ang Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), tulad ng iba pang immune reactions, ay ginagamit: 1) para makakita ng hindi kilalang antigen gamit ang mga kilalang antibodies, o 2) para makakita ng mga antibodies sa blood serum gamit ang isang kilalang antigen. Ang kakaiba ng reaksyon ay ang kilalang sangkap ng reaksyon ay pinagsama sa isang enzyme (halimbawa, peroxidase). Ang pagkakaroon ng enzyme ay tinutukoy ng substrate, na may kulay sa pamamagitan ng pagkilos ng enzyme. Ang pinakakaraniwang ginagamit na solid-phase na ELISA.

1) Pagtuklas ng antigen. Ang unang yugto ay ang adsorption ng mga tiyak na antibodies sa solid phase, na ginagamit bilang polystyrene o polyvinyl chloride na ibabaw ng mga balon ng mga plastic panel. Ang ikalawang yugto ay ang pagdaragdag ng materyal sa pagsubok, na ipinapalagay ang pagkakaroon ng isang antigen. Ang antigen ay nagbubuklod sa mga antibodies. Pagkatapos ay hinuhugasan ang mga balon. Ang ikatlong yugto ay ang pagdaragdag ng isang tiyak na serum na naglalaman ng mga antibodies laban sa isang ibinigay na antigen na may label na isang enzyme. Ang mga may label na antibodies ay nakakabit sa mga antigen, at ang kanilang labis ay inaalis sa pamamagitan ng paghuhugas. Kaya, kung mayroong mga antigen sa materyal ng pagsubok, isang antibody-antigen-antibody complex, na may label na isang enzyme, ay nabuo sa ibabaw ng solid phase. Ang isang substrate ay idinagdag upang makita ang enzyme. Para sa peroxidase, ang substrate ay orthophenylenediamine na hinaluan ng H 2 O 2 sa isang buffer solution. Sa ilalim ng pagkilos ng enzyme, ang mga produkto ay nabuo na may kulay kayumanggi.



2) Pagtuklas ng mga antibodies. Ang unang yugto ay ang adsorption ng mga tiyak na antigens sa mga dingding ng mga balon. Karaniwan, sa mga komersyal na sistema ng pagsubok, ang mga antigen ay na-adsorbed na sa ibabaw ng mga balon. Ang ikalawang yugto ay ang pagdaragdag ng pinag-aralan na suwero. Sa pagkakaroon ng mga antibodies, nabuo ang isang antigen-antibody complex. Ang ikatlong yugto - pagkatapos ng paghuhugas, ang mga antiglobulin antibodies (antibodies laban sa mga globulin ng tao) na may label na enzyme ay idinagdag sa mga balon. Ang mga resulta ng reaksyon ay sinusuri tulad ng inilarawan sa itaas.

Ang mga kilalang positibo at kilalang negatibong sample, na available sa mga komersyal na sistema, ay ginagamit bilang mga kontrol.

Ang ELISA ay ginagamit upang masuri ang maraming mga nakakahawang sakit, sa partikular, impeksyon sa HIV, viral hepatitis.

Ang immunoblotting ay isang uri ng ELISA (kombinasyon ng electrophoresis at ELISA). Ang mga biopolymer, tulad ng mga antigen ng human immunodeficiency virus, ay pinaghihiwalay ng gel electrophoresis. Ang mga hiwalay na molekula ay inililipat sa ibabaw ng nitrocellulose sa parehong pagkakasunud-sunod tulad ng nasa gel. Ang proseso ng paglipat ay tinatawag na blotting, at ang resultang pag-print ay tinatawag na blot (English blot - spot). Ang imprint na ito ay apektado ng pinag-aralan na suwero. Pagkatapos ay idinagdag ang peroxidase-label na anti-human globulin serum, na sinusundan ng substrate, na nagiging kayumanggi sa ilalim ng pagkilos ng enzyme. Ang mga brown streak ay nabuo kung saan ang mga antibodies ay pinagsama sa mga antigens. Ang pamamaraan ay nagpapahintulot sa iyo na makita ang mga antibodies sa mga indibidwal na antigens ng virus.



Radioimmunoassay (RIA). Ang pamamaraan ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang dami ng antigen sa sample ng pagsubok. Una, ang isang materyal na malamang na naglalaman ng isang antigen ay nakakabit sa immune serum, pagkatapos ay isang kilalang antigen na may label na radioisotope, halimbawa, I 125 . Bilang resulta, ang nakikita (walang label) at kilalang may label na antigen ay nagbubuklod sa isang limitadong bilang ng mga antibodies. Dahil ang may label na antigen ay idinagdag sa isang tiyak na dosis, posibleng matukoy kung aling bahagi nito ang nakatali sa mga antibodies, at kung alin ang nanatiling libre dahil sa kumpetisyon sa walang label na antigen at inalis. Ang dami ng may label na antigen na nakatali sa mga antibodies ay tinutukoy gamit ang isang counter. Ito ay inversely proportional sa dami ng antigen na tinutukoy.

Immunoelectron microscopy (IEM). Ang isang antigen, halimbawa, isang influenza virus, ay nakakabit sa isang partikular na antiserum na may label na may electron-dense substance. Ang mga protina na naglalaman ng metal (ferritin, hemocyanin) o koloidal na ginto ay ginagamit bilang isang label. Kapag ang microscopy sa isang electron microscope, kinukunan ang mga litrato na nagpapakita ng mga influenza virion na may mga madilim na tuldok na nakakabit sa kanila - mga molekula ng may label na antibodies.

mga tanong sa pagsusulit

Nakuha ang kaligtasan sa sakit, ang pagkakaiba nito mula sa namamana (species, innate). Mga uri ng nakuha na kaligtasan sa sakit.

Isang gawain. Sa pamilya, ang batang si Valery, tatlong taong gulang, ay nagkasakit ng dipterya. Ang ibang miyembro ng pamilya ay hindi nagkasakit, at ang ina ay may sakit na dipterya sa pagkabata, at ang ama ay nabakunahan ng diphtheria toxoid. Ang nakatatandang kapatid na si Natasha, limang taong gulang, ay hindi nabakunahan ng diphtheria toxoid dahil sa mga kontraindikasyon sa medisina, kaya kinailangan niyang sumailalim sa emergency prophylaxis sa tulong ng anti-diphtheria antitoxic serum. Ang nakababatang kapatid na lalaki, si Vitaly, ay hindi nagkasakit sa loob ng tatlong buwan, bagaman hindi siya nabakunahan ng anuman. May pusa at aso sa bahay, hindi sila nagkasakit. Pangalanan para sa bawat miyembro ng pamilya at para sa mga hayop ang uri ng kaligtasan sa sakit kung saan hindi sila nagkasakit.

Ano ang isang antigen? Anong mga sangkap ang maaaring maging antigens? Kumpleto ang mga antigen at haptens, paano sila naiiba sa isa't isa? Ang istraktura ng antigen. Ano ang pangalan ng bahagi ng isang molekula ng antigen na tumutukoy sa pagiging tiyak nito? Pangalanan ang mga antigen na kilala mo. Ano ang mga autoantigens? Antigenic na istraktura ng isang microbial cell. Flagella at somatic antigens; lokalisasyon, pagtatalaga ng liham, likas na kemikal, kaugnayan sa temperatura, paraan ng paghahanda, praktikal na aplikasyon. Anatoxin, mga katangian nito, aplikasyon, produksyon. Anong tissue ang bumubuo sa immune system ng katawan? Tukuyin ang mga sentral at paligid na organo ng immune system ng tao. Ilarawan ang proseso ng pagbuo ng humoral at cellular immune response. Tukuyin ang mga cell na kumukuha at hinuhukay ang antigen; mga cell na nakikipag-ugnayan sa pagbuo ng humoral immunity, cellular immunity; mga selula na nagbabago at nagiging mga selulang plasma na gumagawa ng antibody; mga selula na nagpapasigla sa prosesong ito; mga cell na pinipigilan ang immune response; mga selula na pumapatay ng mga selulang tumor at mga selulang nahawaan ng virus. Ano ang mga antibodies? Paano makakuha ng immune serum? Paano kumuha ng serum na magne-neutralize sa tetanus toxin? Ang mga antitoxin, agglutinin, hemolysin ay nabuo laban sa anong mga antigens? Anong mga antibodies ang nabuo kapag ang diphtheria toxoid ay iniksyon sa katawan? diphtheria bacteria? Ang kemikal na kalikasan at istraktura ng mga antibodies. Ano ang aktibong site ng isang immunoglobulin? Ilista ang mga klase ng immunoglobulins, ang kanilang mga katangian. Tukuyin ang klase ng mga immunoglobulin na maaaring tumawid sa inunan. Anong klase nabibilang ang secretory immunoglobulins? Ang dinamika ng akumulasyon ng mga antibodies. Paano naiiba ang pangalawang tugon sa immune mula sa isang pangunahin? Paano ginagamit ang kaalaman tungkol sa dynamics ng immune response sa praktikal na gamot? Ano ang mga reaksyon ng kaligtasan sa sakit, ano ang kanilang mekanismo, mga yugto ng reaksyon. Sa anong 2 direksyon ginagamit ang mga immune reaction? Ilista ang mga reaksyon ng immune system.

Isang gawain. Palitan ang mga nawawalang salita ng "toxoid" o "antitoxin": Ang _________ ay isang antigen, ang _________ ay isang antibody, Ang __________ ay lumilikha ng aktibong kaligtasan sa sakit kapag ipinasok sa katawan, Ang __________ ay lumilikha ng passive immunity kapag ipinasok sa katawan, Ang __________ ay nakukuha sa pamamagitan ng pagbabakuna ng mga hayop , Ang ___________ ay nakukuha mula sa lason kapag nalantad sa formalin at init, ___________ ay nagne-neutralize ng mga lason, __________ nagiging sanhi ng pagbuo ng mga antibodies sa katawan.

Agglutination reaction: ano ang agglutination, ano ang antigen, ano ang antibody; paraan ng pagtatakda, anong mga kontrol ang itinakda at para saan; kung ano dapat ang hitsura ng mga kontrol. Agglutinating sera, kung ano ang nilalaman ng mga ito, kung paano sila nakuha, kung ano ang mga ito ay ginagamit para sa; ano ang titer ng agglutinating serum? Ang reaksyon ng hindi direktang (passive) hemagglutination: kung ano ang nagsisilbing isang antigen sa reaksyong ito, kung paano ito nakuha, ang mekanismo ng reaksyon. Ano ang isang erythrocyte diagnosticum? Ano ang isang antibody erythrocyte diagnosticum? Mga reaksyon sa pag-ulan: ano ang pag-ulan, kung ano ang nagsisilbing isang antigen; paano kumuha ng precipitating serum? Ano ang titer ng precipitating serum? Mga pamamaraan ng pahayag, praktikal na aplikasyon.

Complement fixation reaction (RCC): Prinsipyo ng CFR; kung ano ang nabuo kapag ang immune serum ay nakikipag-ugnayan sa isang tiyak na antigen; ano ang mangyayari upang makadagdag kung ito ay naroroon sa pakikipag-ugnayang ito? Ano ang kapalaran ng complement kung walang tiyak na pagkakaugnay sa pagitan ng antigen at antibodies? Kung ang resulta ng RSK ay hemolysis, ibig sabihin ba nito ay positibo o negatibong resulta? diskarte sa setting ng RSC. Bakit dapat i-inactivate ang test serum? Hemolytic serum: ano ang nilalaman nito, paano ito nakuha, ano ang titer at paano ito natutukoy? Complement: kemikal na kalikasan, kaugnayan sa mataas na temperatura, saan ito nakapaloob? Paano masisira ang complement? Ano ang praktikal na ginagamit bilang pandagdag?

Isang gawain. May nakitang mantsa ng dugo sa damit ng isang lalaking inakusahan ng pagpatay. Anong reaksyon ang maaaring gamitin upang matukoy kung ito ay dugo ng tao; ano ang magiging antigen sa reaksyong ito, at ano ang magiging antibodies; anong diagnostic na gamot ang dapat nasa laboratoryo para sa reaksyong ito, paano ito inihahanda?

Isang gawain. Paano matukoy, gamit ang reaksyon ng pag-ulan, kung ang isang sample ng karne ng baka o karne ng kabayo ay inihatid para sa pagsusuri; anong mga diagnostic na paghahanda ang kailangan?

Reaksyon ng pag-ulan sa agar gel, mga pamamaraan ng pagbabalangkas, praktikal na aplikasyon.

Serological na pagsusuri (mga pagsubok)- mga pamamaraan ng pananaliksik sa laboratoryo batay sa pagtuklas ng mga antibodies o antigens sa biological na materyal ng pasyente. Kadalasan, ang dugo ay ginagamit para sa pagsusuri, mas madalas - ihi, laway, purulent discharge, o mga sample ng tissue na kinuha sa panahon ng biopsy.

Lugar ng aplikasyon

  • Pagpapasiya ng pangkat ng dugo.
  • Pagkilala sa mga tiyak na protina ng tumor - mga marker ng tumor (halimbawa, sa mga kaso ng pinaghihinalaang kanser ng mga ovary, prostate, pantog, tiyan, atbp.).
  • Diagnosis ng mga impeksyon sa viral, bacterial, fungal, protozoal (HIV, syphilis, toxoplasmosis, chlamydia, rubella, herpes, helminthiases, tick-borne encephalitis, atbp.).
  • Pagpapasiya ng mga hormone, enzymes at gamot na nakapaloob sa pinag-aralan na biomaterial sa mga menor de edad na konsentrasyon (mas mababa sa 10−10 g/l).

Ang kakanyahan ng paraan ng mga serological na pagsubok

Ang mga pagsusuri sa serological ay naiiba sa pamamaraan, ngunit ang lahat ng ito ay resulta ng pakikipag-ugnayan ng mga antigens (mga dayuhang compound) na may kaukulang mga antibodies. Ang pag-aaral ay binubuo ng dalawang magkakasunod na yugto. Ang unang yugto ay nailalarawan sa pamamagitan ng pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga antigen at antibodies sa pagbuo ng mga immune complex (positibong reaksyon). Sa pangalawang yugto, lumilitaw ang mga panlabas na palatandaan na nagpapatunay sa pagkakaroon ng parehong mga kumplikadong ito (depende sa uri ng reaksyon, maaaring ito ay pag-ulap ng solusyon sa pagsubok, pagbabago sa kulay nito, pag-flake, atbp.). Ang kawalan ng nakikitang pisikal na phenomena ay itinuturing na negatibong resulta ng pagsubok.

Paghahanda para sa serological na pag-aaral

Depende sa uri ng pananaliksik. Dapat sabihin sa iyo ng isang medikal na espesyalista ang tungkol sa mga tampok ng pagpasa sa isang partikular na pagsusuri kapag nagsa-sign up para sa pamamaraan.

Maaari kang kumuha ng kinakailangang serological test sa Spectra clinic. Nag-order kami ng mga pagsusuri sa pinakamahusay na mga laboratoryo ng metropolitan na tumatakbo ayon sa mga pamantayan sa Europa, na ginagarantiyahan ang mabilis at maaasahang mga resulta. Tutulungan ng aming mga doktor na maunawaan ang konklusyon at magbigay ng mga rekomendasyon para sa karagdagang pagsusuri.

Nagbibigay ang site ng impormasyon ng sanggunian para sa mga layuning pang-impormasyon lamang. Ang diagnosis at paggamot ng mga sakit ay dapat isagawa sa ilalim ng pangangasiwa ng isang espesyalista. Ang lahat ng mga gamot ay may mga kontraindiksyon. Kinakailangan ang payo ng eksperto!

Serological pagsusuri ng dugo ay isang paraan ng pagsubok sa laboratoryo ng ilang antigens o antibodies ( mga tiyak na protina) sa serum ng pasyente batay sa immune response ng katawan. Ang pamamaraang ito ay ginagamit kapag mga diagnostic mga nakakahawang sakit upang makita ang pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ng pasyente sa isang tiyak na uri ng virus o bakterya, pati na rin upang matukoy ang uri ng dugo.

Materyal na pinag-aaralan

Una sa lahat, para sa serological analysis, ang biological na materyal na nakolekta mula sa pasyente ay ginagamit:
  • suwero ng dugo
  • laway
  • bagay ng dumi
Sa ilang mga kaso, ang materyal na nakahiwalay sa ilang mga bagay sa kapaligiran ay sinusuri:
  • ang lupa

Paraan ng pagsusuri o pag-sample ng dugo

Ang pagsusuri na ito ay hindi nangangailangan ng espesyal na paghahanda ng pasyente. Ang sampling ng dugo ay isinasagawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan at isinasagawa sa mga silid ng paggamot ng mga institusyong medikal, ayon sa pangkalahatang tinatanggap na mga pamamaraan ng hematological. Para sa serological testing, ang blood sampling ay isinasagawa sa pamamagitan ng dalawang paraan: ang venous blood ay kinukuha mula sa cubital vein ng pasyente, at ang capillary blood ay kinuha mula sa ring finger. Ang dugo ay inilalagay sa sterile sealed test tubes.

Mga tampok ng transportasyon ng dugo at imbakan ng serum

Kaagad pagkatapos ng sampling ng dugo, dinadala ito sa isang espesyal na laboratoryo, kung saan ang serum ay inihanda sa parehong araw. Ang imbakan ng serum ay pinapayagan nang hindi hihigit sa 4-6 na araw sa isang refrigerator sa temperatura na 2-4 degrees. Kung kinakailangan ang mas mahabang imbakan, ang serum ay nagyelo. Upang maiwasan ang paglabag sa kalidad ng suwero, pinapayagan itong i-freeze nang isang beses at, nang naaayon, lasaw ito. Sa pangmatagalang imbakan, ang mga antibodies ay nawawala ang kanilang mga katangian at nagiging bahagyang hindi aktibo, ang pinaka-sensitibo sa pagyeyelo ay ang mga immunoglobulin ng klase. M. Matapos matunaw ang suwero, kinakailangan na lubusan itong ihalo hanggang sa isang homogenous na masa, na tumutulong upang maibalik ang konsentrasyon ng mga antibodies na nilalaman sa serum na ito.


Ano ang ginagamit ng serology?

Ang mga pamamaraan ng diagnostic ng serological laboratoryo ay ginagamit upang makita ang mga sakit tulad ng echinococcosis, trichinosis, toxocariasis, opisthorchiasis, cysticercosis, toxoplasmosis, amoebiasis, giardiasis, upang matukoy ang pagiging epektibo ng kurso ng paggamot at, sa wakas, upang makita ang pag-ulit ng sakit pagkatapos na ganap na gumaling ang pasyente.

Mga pangunahing pamamaraan ng serological diagnostic

Immunofluorescence reaction (RIF)

Ang reaksyong ito ay isang hindi direktang bersyon ng isang serological na pag-aaral, iyon ay, ito ay isinasagawa sa dalawang yugto. Sa unang yugto, ang kinakailangang antibody ay nakita sa nagpapalipat-lipat na antigen-antibody complex gamit ang antiglobulin, na katulad ng istraktura sa mga immune serum na protina. Ang pagkakakilanlan ng nais na antibody ay posible rin kapag nag-aaral ng isang pre-prepared antigenic na paghahanda sa ilalim ng isang fluorescent microscope, nang walang paggamit ng mga antiglobulin.

Ang immunofluorescent reaction ay isang napakatagal na proseso na nangangailangan ng maraming oras at responsibilidad mula sa isang espesyalista. Ang reaksyon ay nagsisimula sa paghahanda ng mga solusyon, pagkatapos ang sera at ang kanilang mga control sample ay sasailalim sa titration ( isang proseso na nagbibigay-daan sa pagtukoy ng nilalaman ng isang partikular na substansiya sa pamamagitan ng unti-unting paghahalo ng solusyon sa pagsubok na may kontroladong dami ng reagent). Ang mga dating inihanda na dilution at ang kanilang mga control sample ay maingat na inilapat sa mga slide na may antigen. Pagkatapos ang mga paghahanda ay sumasailalim sa pagpapapisa ng itlog, na sinusundan ng kanilang paghuhugas at pagpapatuyo sa hangin. Ang isang manipis na layer ng antiserum ay inilalapat sa mga slide na naglalaman ng antigen, pagkatapos kung saan ang mga paghahanda ay muling incubated at ang buong nakaraang kadena ng mga aksyon ay paulit-ulit, na nagtatapos sa pagpapatayo ng paghahanda. Bilang resulta, ang paghahanda sa isang glass slide ay ginagamot sa gliserol at sinusuri sa ilalim ng isang fluorescent microscope.

Ang mga resulta ng reaksyon ay sinusuri sa isang apat na puntos na sukat, na kung saan ay nailalarawan sa tindi ng ibabaw ng dilaw-berdeng glow ng mga antigen cells:
+ napakahinang glow ng cell, kapansin-pansin lamang sa paligid nito
++ mahinang glow ng cell periphery, ngunit may malinaw na nakikitang berdeng tint
+++/++++ maliwanag na berdeng glow ng paligid ng cell
Ang reaction titer ay itinuturing na isang serum dilution kung saan hindi bababa sa 50% ng mga antigen cells ang nagpapakita ng malinaw na glow sa ibabaw, iyon ay, ang resulta ng reaksyon. +++ o ++++ . Ang halaga ng saklaw ng reaksyon ay mula 1/80 hanggang 1/100.

Ang intensity ng reaksyon ay depende sa bilang ng mga precipitated erythrocytes sa ilalim ng nabuo na mga balon:
isang negatibong reaksyon, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng pag-aalis ng mga erythrocytes sa ilalim ng mga balon sa anyo ng isang maliit na singsing na may makinis na mga gilid o "mga pindutan"
+ mababang intensity, ang reaksyon na ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng maliliit na solong deposito sa ilalim ng butas. Ang mga non-agglutinated erythrocytes ay bumubuo ng isang "maliit na singsing" sa gitna ng balon
++ katamtamang intensity, ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbuo ng isang "malawak na siksik na singsing" ng mga di-agglutinated erythrocytes sa ilalim ng balon
+++ matinding reaksyon, ang mga agglutinated erythrocytes ay bumubuo ng tinatawag na "mga payong", sa gitna nito, ang mga singsing na nabuo ng mga naayos na hindi pinagsama-samang mga erythrocyte ay malinaw na nakikita
++++ isang matinding matinding reaksyon kung saan ang lahat ng erythrocytes ay pinagsama-sama at, na bumubuo ng "mga payong", linya sa ilalim ng mga butas.
Ang titer ng reaksyong ito ay itinuturing na huling pagbabanto ng serum, kung saan ang halatang agglutination ng mga erythrocytes ay napansin ng hindi bababa sa. +++ , iyon ay, na may matinding o matinding matinding reaksyon.

Ang pagiging maaasahan at kalidad ng mga serological diagnostic na pamamaraan ay nakasalalay sa organisasyon ng panloob at panlabas na kontrol sa laboratoryo, na binubuo ng ilang mga independiyenteng pamamaraan na idinisenyo upang masuri ang kalidad ng mga resulta ng pagsusuri.