Reagents para sa pagtukoy ng pangkat ng dugo. Pamamaraan para sa pagtukoy ng mga tagapagpahiwatig. Dahil sa mga biological na katangian ng suwero

Ang pagpapasiya ng pangkat ng dugo gamit ang karaniwang sera ay kadalasang ginagamit (kumpara sa ibang mga pamamaraan). Ang pamamaraan na ito ay batay sa mga agglutinin at agglutinogens na nakapaloob sa dugo sa iba't ibang kumbinasyon.

Ang kumbinasyon ng parehong agglutinogen at agglutinin ay sinamahan ng isang agglutination reaksyon (isang homogenous na lugar ay nahahati sa maraming maliliit na batik na binubuo ng mga pulang selula ng dugo na magkakadikit).

Ang kakanyahan ng pamamaraan

Kapag nagbibigay Medikal na pangangalaga Hindi laging posible na mabilis na ihinto ang pagdurugo; ang pagsasalin ng dugo ay nangangailangan ng pagpapasiya ng uri ng dugo at Rh factor.

Mayroong 2 erythrocyte antigens (agglutinogens A at B) at 2 antibodies (a at b). Ang iba't ibang kumbinasyon ng mga antigen at antibodies ay bumubuo ng 4 na pangkat ng dugo.

Ang pamamaraang ito ay may mga pakinabang dahil pinapayagan ka nitong bawasan ang maraming sukat sa isa.

Pamamaraan para sa pagtukoy ng mga tagapagpahiwatig

Ang pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang karaniwang sera ay isinasagawa gamit ang mga reagents na naglalaman ng mga agglutinin iba't ibang grupo, na tumutugon sa mga agglutinogen na matatagpuan sa ibabaw ng mga erythrocytes.

Upang matukoy ang pangkat ng dugo, sapat na gumamit ng karaniwang sera lamang II at III pangkat. Gayunpaman, upang ibukod posibleng mga pagkakamali para sa layunin ng karagdagang kontrol, ang natitira (mga pangkat I at IV) ay ginagamit din.

Paggawa ng serum

Ang mga karaniwang serum para sa pagtukoy ng pangkat ng dugo ay nakuha mula sa dugo ng donor. Para sa layuning ito, ginagamit ang isang espesyal na sistema: ang plasma ay nakahiwalay kasama ang mga antibodies na nakapaloob dito, pagkatapos ay natunaw ito ng isotonic na solusyon ng sodium chloride.

Ilagay ang 1 ml ng 0.9% NaCl solution sa isang test tube, magdagdag ng plasma (1 ml), iling ang komposisyon. Kumuha ng 1 ml ng nagresultang timpla at ilipat ito sa isa pang test tube na may isotonic solution.

Ang pagmamanipula ay paulit-ulit hanggang ang halo ay diluted sa isang ratio na 1:256. Ang iba pang mga pagbabanto ay hindi ginagamit upang maiwasan ang mga pagkakamali.

Para sa isang pag-aaral na gumagamit ng karaniwang sera, 3 ang kinakailangan (2 serye para sa bawat grupo), magkakaiba ang kulay:

ako (0) - malinaw na likido, ang bote ay nilagyan ng puting label;
II (A) - asul na likido, bote na may 2 guhitan ng kulay asul;
III (B) - maputlang kulay-rosas na likido, bote na may 3 kulay-rosas na guhitan;
Ang IV (AB) ay isang dilaw na likido, mayroong 4 na dilaw na guhit sa label ng bote.

Ang mga label ay nagpapahiwatig:

titer;
pinakamahusay bago ang petsa;
Petsa ng isyu;
serial number.
impormasyon ng tagagawa.

Pagsasagawa ng pananaliksik

Ang temperatura ng silid ay dapat nasa loob ng +15...+ 25°C, kinakailangan ang mahusay na pag-iilaw.

Gumagamit sila ng isang espesyal na tablet na may markang lugar. Ang bawat serum ay inilapat dito (2 sample ang kinuha, 1 sa kanila ay kontrol, 2 ay para sa diagnostics).

Pagkatapos ay isang patak ng dugo ang inilalagay sa tabi ng bawat patak ng suwero, na hinahalo sa bawat indibidwal na tumutugon na solusyon. Pagkatapos ng ilang minuto (5-6), ang data na nakuha ay nasuri:

kung ang isang agglutination reaksyon ay nangyayari, ang serum test ay itinuturing na positibo;
sa kawalan ng agglutination, negatibo ang pagsubok.

Mga resulta ng pananaliksik

Kailan positibong resulta magkakadikit ang mga pulang selula ng dugo (nabubuo ang mga pulang clots sa nagre-react na solusyon).

Kung ang kulay ng solusyon ay hindi nagbago, ang reaksyon ay itinuturing na negatibo. May mga pattern na nakasalalay sa mga kumbinasyon ng mga negatibo at positibong reaksyon na nagaganap sa mga solusyon:

I(0), kung walang sample na may positibong reaksyon;
II (A), kung sa sample II (A) ang kondisyon ay hindi nagbago, at sa iba pang 2 sample ay may positibong reaksyon;
III(B), kung sa sample lamang III(B) lumabas na negatibo ang reaksyon;
IV(AB), kung ang reaksyon ay positibo sa bawat isa sa 3 sample.

Ang hitsura ng iba pang mga kumbinasyon ay nauugnay sa mga error na nagmumula sa panahon ng pag-aaral.

Ang paggamit ng mga lumang reagents o ang hindi wastong pagsasagawa ng pagsubok ay maaaring magresulta sa hindi magandang reaksyon. Sa ganitong mga kaso, upang linawin, kinakailangan na gumawa ng mga pagsubok gamit ang iba pang mga pamamaraan.

Sa pakikipag-ugnayan sa

AB0 mga pangkat ng dugo

Ang mga pangkat ng dugo ng sistemang AB0 ay natuklasan noong 1900 ni K. Landsteiner, na, sa pamamagitan ng paghahalo ng mga pulang selula ng dugo ng ilang mga indibidwal sa serum ng dugo ng ibang mga indibidwal, natuklasan na sa ilang mga kumbinasyon ang dugo ay namumuo, na bumubuo ng mga natuklap (agglutination reaction) , ngunit sa iba ay hindi. Batay sa mga pag-aaral na ito, hinati ni Landsteiner ang dugo ng lahat ng tao sa tatlong grupo: A, B at C. Noong 1907, natuklasan ang isa pang pangkat ng dugo.

Napag-alaman na ang reaksyon ng agglutination ay nangyayari kapag ang mga antigen ng isang pangkat ng dugo (tinatawag silang agglutinogens), na matatagpuan sa pula. mga selula ng dugo- mga pulang selula ng dugo na may mga antibodies ng ibang grupo (tinatawag silang agglutinin) na matatagpuan sa plasma - ang likidong bahagi ng dugo. Ang paghahati ng dugo ayon sa sistema ng AB0 sa apat na grupo ay batay sa katotohanan na ang dugo ay maaaring o hindi naglalaman ng mga antigens (agglutinogens) A at B, pati na rin ang mga antibodies (agglutinins) α (alpha o anti-A) at β (beta o anti-B) .

Unang pangkat ng dugo - 0 (I)

Pangkat I - ay hindi naglalaman ng mga agglutinogens (antigens), ngunit naglalaman ng mga agglutinins (antibodies) α at β. Ito ay itinalagang 0 (I). Dahil ang grupong ito ay hindi naglalaman ng mga dayuhang particle (antigens), maaari itong maisalin sa lahat ng tao. Ang isang taong may ganitong uri ng dugo ay isang unibersal na donor.

Pangalawang pangkat ng dugo A β (II)

Ang pangkat II ay naglalaman ng agglutinogen (antigen) A at agglutinin β (antibodies sa agglutinogen B). Samakatuwid, maaari lamang itong maisalin sa mga pangkat na hindi naglalaman ng antigen B - ito ang mga pangkat I at II.

Ikatlong pangkat ng dugo Bα (III)

Ang pangkat III ay naglalaman ng agglutinogen (antigen) B at agglutinin α (antibodies sa agglutinogen A). Samakatuwid, maaari lamang itong maisalin sa mga pangkat na hindi naglalaman ng antigen A - ito ang mga pangkat I at III.

Ikaapat na pangkat ng dugo AB0 (IV)

Ang pangkat ng dugo IV ay naglalaman ng mga agglutinogens (antigens) A at B, ngunit naglalaman ng mga agglutinin (antibodies). Samakatuwid, maaari lamang itong maisalin sa mga may pareho, pang-apat na pangkat ng dugo. Ngunit, dahil walang mga antibodies sa dugo ng gayong mga tao na maaaring magkadikit sa mga antibodies na ipinakilala mula sa labas, maaari silang maisalin ng dugo ng anumang grupo. Ang mga taong may pangkat ng dugo IV ay mga pangkalahatang tatanggap.

Mga pangkat ng dugo ayon sa sistema ng ABO

Paraan para sa pagtukoy ng mga pangkat ng dugo

Ang pangkat ng dugo ayon sa sistema ng ABO ay tinutukoy gamit ang reaksyon ng aglutinasyon. Sa kasalukuyan, mayroong tatlong paraan upang matukoy ang mga pangkat ng dugo gamit ang ABO system:

Ayon sa karaniwang isohemagglutinating sera;

Sa pamamagitan ng paggamit monoclonal antibodies(coliclones anti-A at anti-B).

Pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang karaniwang isohemagglutinating sera

Ang kakanyahan ng pamamaraan ay upang makita sa nasubok na dugo mga antigen ng grupo A at B gamit ang mga karaniwang serum. Para sa mga layuning ito, ginagamit ang agglutination reaction. Ang pagsubok ay dapat gawin sa isang silid na may mahusay na pag-iilaw sa temperatura na 15-25 ° C.

Upang maisagawa ang pagsubok kailangan mo: - Standard isohemagglutinating sera ng mga pangkat O (I), A (II), B (III) at AB (IV) ng dalawang magkaibang serye. Ang mga serum para sa pagtukoy ng mga grupo ng dugo ay inihanda mula sa donor na dugo sa mga espesyal na laboratoryo. Ang mga serum ay nakaimbak sa refrigerator sa temperatura na 4 - 8° C. Ang petsa ng pag-expire ng serum ay ipinahiwatig sa label. Ang label ay nagpapahiwatig din ng titer (ang maximum na pagbabanto ng serum kung saan maaaring mangyari ang isang agglutination reaction), na hindi dapat mas mababa sa 1: 32 (para sa serum B (III) - hindi mas mababa sa 1:16 / 32). Ang whey ay dapat na transparent, nang walang mga palatandaan ng nabubulok. Para sa kaginhawahan, ang mga karaniwang serum ay tinted sa isang tiyak na kulay: O (I) - walang kulay (kulay abo), A (II) - asul, B (III) - pula, AB (IV) - maliwanag na dilaw. Kasama ng mga kulay na ito ang lahat ng mga label sa mga produkto ng dugo na may kaugnayan sa grupo (dugo, pulang selula ng dugo, plasma, atbp.).

Mga puting porselana o enamel plate o iba pang mga plato na may nababasang ibabaw, na minarkahan ayon sa mga uri ng dugo.

Isotonic sodium chloride solution.

Mga karayom, pipette, glass rods (slide).

Teknik ng reaksyon.

1. Sa ilalim ng naaangkop na mga pagtatalaga ng pangkat ng dugo, ang suwero ng mga pangkat I, II, III ay inilapat sa isang plato (plate) sa dami ng 0.1 ml (isang malaking patak na may diameter na mga 1 cm). Upang maiwasan ang mga pagkakamali, dalawang serye ng sera ang inilalapat, dahil ang isa sa mga serye ay maaaring may mababang aktibidad at hindi nagbibigay ng malinaw na aglutinasyon. Kaya, 6 na patak ang nakuha, na bumubuo ng dalawang hanay ng tatlong patak sa sumusunod na pagkakasunud-sunod mula kaliwa hanggang kanan: 0 (I), A (II), B (III).

2. Ang dugo para sa pananaliksik ay kinukuha mula sa isang daliri o mula sa isang ugat. Gamit ang dry glass rod, 6 na patak ng test blood, humigit-kumulang sa laki ng pinhead na 0.01 ml (maliit na patak), ay sunud-sunod na inililipat sa plato sa 6 na puntos, bawat isa sa tabi ng isang patak ng karaniwang serum. Bukod dito, ang dami ng serum ay dapat na 10 beses na mas malaki kaysa sa dami ng dugong sinusuri. Pagkatapos ay maingat silang pinaghalo gamit ang mga glass rod na may bilugan na mga gilid.

Posible rin ang isang mas simpleng pamamaraan: ang isang malaking patak ng dugo ay inilapat sa isang plato, pagkatapos ay kinuha mula doon kasama ang sulok ng isang glass slide at ang bawat patak ng suwero ay inilipat, maingat na ihalo ito sa huli. Sa kasong ito, ang dugo ay kinukuha sa bawat oras na may malinis na sulok ng salamin, na tinitiyak na ang mga patak ay hindi naghahalo.

3. Pagkatapos paghaluin ang mga patak, kalugin ang plato sa pana-panahon. Magsisimula ang aglutinasyon sa loob ng unang 10-30 segundo. Ngunit ang pagmamasid ay dapat isagawa nang hindi bababa sa 5 minuto, dahil posible ang pagsasama-sama sa ibang pagkakataon, halimbawa sa mga pulang selula ng dugo ng pangkat A 2 (II).

4. Magdagdag ng isang patak ng isotonic sodium chloride solution sa mga patak kung saan naganap ang reaksyon, pagkatapos nito ay tinasa ang mga resulta ng reaksyon.

Ang reaksyon ng aglutinasyon ay maaaring positibo o negatibo

Kung positibo ang reaksyon, sa loob ng unang 10-30 segundo, ang maliliit na pulang butil (agglutinates), na binubuo ng mga nakadikit na pulang selula ng dugo, na nakikita ng mata, ay makikita sa pinaghalong. Ang maliliit na butil ay unti-unting nagsasama sa mas malalaking butil o kahit na hindi regular na hugis na mga natuklap. Sa isang negatibong reaksyon, ang patak ay nananatiling pare-parehong kulay pula.

Ang mga resulta ng mga reaksyon ng dalawang serye sa mga patak na may serum ng parehong grupo ay dapat na nag-tutugma.

Ang pag-aari ng dugo na sinusuri sa kaukulang grupo ay tinutukoy ng pagkakaroon o kawalan ng agglutination kapag tumutugon sa kaukulang sera.

Kung ang lahat ng sera ay nagbigay ng isang positibong reaksyon, kung gayon ang pagsusuri ng dugo ay naglalaman ng parehong mga agglutinogens - A at B. Ngunit sa mga ganitong kaso, upang ibukod ang isang hindi tiyak na reaksyon ng aglutinasyon, ang isang karagdagang control test ng pagsubok na dugo ay dapat isagawa gamit ang karaniwang serum. ng pangkat AB (IV).

Pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang monoclonal antibodies

Upang matukoy ang mga pangkat ng dugo gamit ang pamamaraang ito, ginagamit ang mga monoclonal antibodies, na nakuha gamit ang hybridoma biotechnology.

Ang Hybridoma ay isang cell hybrid na nabuo sa pamamagitan ng pagsasanib ng isang bone marrow cell (myeloma) na may immune lymphocyte na nag-synthesize ng mga tiyak na monoclonal antibodies. Ang hybridoma ay may kakayahang lumaki nang walang limitasyon, ay katangian ng isang tumor cell, at may likas na kakayahan ng isang lymphocyte na mag-synthesize ng mga antibodies.

Ang mga karaniwang reagents ay binuo: monoclonal antibodies (mAbs): anti-A at anti-B coliclones, na ginagamit para sa pagtukoy ng erythrocyte agglutinogens. Ang mga zoliclone ay lyophilized powder ng pula (anti-A) at asul (anti-B) na kulay, na diluted na may isotonic sodium chloride solution kaagad bago ang sample.

Pamamaraan.

Ang mga anti-A at anti-B na zoliclone ay inilalapat sa isang puting tableta, isang malaking patak (0.1 ml) sa ilalim ng naaangkop na mga inskripsiyon: anti-A o anti-B. Ang isang maliit na patak ng dugo ng pagsubok ay dapat ilapat sa tabi ng mga patak ng mga antibodies. Pagkatapos ng paghahalo ng mga sangkap, obserbahan ang reaksyon ng agglutination sa loob ng 2-3 minuto. Ang pagsusuri sa mga resulta ay napakasimple.

Ang pagtukoy sa pagpapangkat ng dugo ay maaaring sinamahan ng mga pagkakamali na humahantong sa maling interpretasyon ng mga resulta. Tatlong pangunahing grupo ng mga error ang maaaring makilala: mga error na nauugnay sa mababang kalidad na reagents; mga pagkakamali sa teknikal; mga error na nauugnay sa mga tampok Scheme para sa pagtatasa ng mga resulta ng pagtukoy ng mga pangkat ng dugo gamit ang mga monoclonal antibodies (coliclones anti-A at anti-B) ng dugong sinusuri. Ang unang dalawa ay maaaring iwasan sa pamamagitan ng mahigpit na pagmamasid sa inilarawan sa itaas na mga kinakailangan para sa suwero, mga kondisyon ng reaksyon, atbp. Ang ikatlong grupo ay nauugnay sa hindi pangkaraniwang bagay ng panagglutination (Thomsen phenomenon), ang kakanyahan nito ay ang serum sa temperatura ng silid ay pinagsama-sama sa lahat ng mga pulang selula ng dugo, kahit na may kanilang sariling (autoagglutination), at mga erythrocytes sa parehong oras ay nagbibigay ng aglutinasyon sa lahat ng sera, kahit na may serum ng pangkat AB. Ang isang katulad na kababalaghan ay inilarawan sa isang bilang ng mga sakit: mga sakit sa dugo, splenomegaly, cirrhosis sa atay, Nakakahawang sakit atbp. Ang panagglutination at autoagglutination sa malulusog na tao ay inilarawan din.

Ang kababalaghan ng panagglutination at autoagglutination ay sinusunod lamang sa temperatura ng silid. Kung ang pagpapasiya ng pagiging kasapi ng grupo ay isinasagawa sa temperatura na 37 ° C, nawawala ang mga ito.

Dapat na mahigpit na tandaan na sa lahat ng mga kaso ng hindi malinaw o kaduda-dudang mga resulta, ang mga pangkat ng dugo ay dapat muling pagtukoy gamit ang karaniwang sera mula sa iba pang mga serye, gayundin sa isang cross-sectional na paraan.

Sa loob ng maraming siglo, sinubukan ng mga siyentipiko na alamin ang tungkol sa katawan ng tao hangga't maaari at matutong magpagaling ng may sakit sa anumang sakit. Isa sa mahalagang mga parameter ay ang pagpapasiya ng pangkat ng dugo sa pamamagitan ng mga bagyo. Tinutukoy lamang ng medisina ang apat na pangkat ng dugo sa mga tao, anuman ang kasarian o lahi. Ang mga katangian ng immunological, na bumubuo sa pangunahing pagkakaiba sa pangkat ng mga erythrocyte antigens, ay minana.

Ano ang zoliclon

Pagpapasiya ng pangkat ng dugo gamit ang iba't ibang mga reagents ng laboratoryo karaniwang pamamaraan pananaliksik. Napakahalaga ng impormasyon ng uri ng dugo, lalo na sa mga kaso kung saan kailangan ng isang tao emergency na tulong. dati interbensyon sa kirurhiko Ang uri ng mga indibidwal na katangian ng antigenic ng isang tao ay dapat matukoy. Ang parehong pamamaraan ay ipinag-uutos para sa mga tauhan ng militar (ang impormasyon ay ipinahiwatig sa form), para sa mga kababaihan bago ang panganganak, atbp.

Coliclones kung ihahambing bagong paraan pananaliksik. Ang pagsusuri na ito ay maaaring isagawa sa anumang yugto ng paggamot sa inpatient ng mga pasyente.

Upang magsagawa ng isang pagsubok sa laboratoryo ay hindi nangangailangan ng maraming oras, sapat na upang magkaroon ng lahat ng kinakailangan mga kemikal na sangkap(colliclones) at simpleng kagamitan.

Ang mga Coliclone ay mahalagang isa sa mga uri ng immunoglobulins (uri M). Ito ay mga monoclonal antibodies na ginawa gamit ang genetic engineering. Ang mga Coliclone ay nakuha sa pamamagitan ng paglalantad ng mga daga ng laboratoryo na walang mikrobyo sa suwero. Isang akumulasyon ng likido ang nabubuo sa lukab ng tiyan rodent na naglalaman ng mga antibodies na ito.

Paghahanda para sa pamamaraan

Ang pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang mga bagyo ay nangangailangan paunang paghahanda at mga aksyon ayon sa itinatag na algorithm. Ang kapaligiran sa silid kung saan isinasagawa ang pagsusuri ay tinukoy nang hiwalay. Ang temperatura ng hangin ay dapat na hindi bababa sa 15 at hindi mas mataas kaysa sa 25 degrees, kung hindi, ang resulta ng pag-aaral ay hindi maituturing na maaasahan. Ang silid ay dapat na walang alikabok, hayop, insekto at iba pang mga kadahilanan na maaaring pisikal na makaapekto sa proseso ng pananaliksik. Hawak din pagsusuri sa laboratoryo nangangailangan ng magandang ilaw sa silid.

Kapag gumagamit ng zoliclones, mahalagang panatilihing mahigpit na selyado ang mga vial at huwag hayaang matuyo ang mga reagents, kung hindi man ang kakayahan ng mga antibodies na mga aktibong aksyon kapansin-pansing bumababa. Bago ang pamamaraan, ang lahat ng kinakailangang kagamitan ay inihanda. Upang maisagawa ang pagsusuri, kakailanganin mo ng isang tubo para sa isang biological sample, isang plato para sa paglalagay ng mga reagents, sterile pipette at stick para sa pakikipag-ugnayan sa mga biological sample.

Kung ang laboratory technician ay nagsasagawa ng hindi lamang pagsubok sa laboratoryo, ngunit din sa pag-sample ng dugo, kinakailangan upang maghanda ng mga disposable syringe o vacuum tubes, isang tourniquet, medikal na alak, mga bola ng bulak at sterile wipes. Ang mga tool para sa pag-label ng mga bioimage ng pasyente ay dapat ding nasa kamay.

Pagsasagawa ng pagsusuri

Sa modernong mga diagnostic ng laboratoryo, tatlong uri ng karaniwang mga cyclone ang ginagamit upang matukoy ang pangkat ng dugo at Rh factor. Ang Anti-A reagent ay may kulay na pula, at ang bote, takip o label ng bote ay may kulay din." Ang uri ng "Anti-B" ay may kulay na asul, at ang uri na "Anti-AB" ay hindi minarkahan ng may kulay na marker. Ang mga tagagawa ng reagent ay gumagawa ng mga pakete ng 5 o 10 ml na zoliclones. Ang paggamit ng mga sira o mababang kalidad na reagents ay hindi pinahihintulutan.

Kung may nakikitang mga depekto sa packaging o lumilitaw ang mga natuklap sa likido, huwag gamitin ang zolicone.

Upang matukoy ito, ang mga zoliclone ay inilalapat sa isang espesyal na inihanda na plato, na idinisenyo bilang isang mesa. iba't ibang uri(A, B at AB). Dapat pirmahan ang bawat isa sa kanila. Ang reagent ay inilalapat sa isang espesyal na minarkahang lugar. Ang bawat uri ng zoliclone ay dapat ilapat sa isang hiwalay na sterile pipette.
Ang 1 patak ng dugo ng pasyente ay inilalagay sa tabi ng mga reagents.
Gamit ang isang sterile stick, ang mga reagents ay hinahalo sa biological sample.
Pagkatapos lamang ng ilang segundo, mapapansin mo ang mga pagbabago at ang reaksyon ng aglutinasyon na nagaganap. Ayon sa mga patakaran, ang pagmamasid ay dapat isagawa sa loob ng 3 minuto. Pagkatapos nito, maaaring makagawa ng konklusyon tungkol sa mga resulta ng pag-aaral.

Paano maunawaan ang resulta

Ang kawalan ng anumang reaksyon ng pagdirikit sa lahat ng mga sample ay nangangahulugan na walang agglutinogen ng uri na sinusuri sa mga pulang selula ng dugo ng pasyente. Ang sample ng dugo ay inuri bilang pangkat I (uri 0).
Kung ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ay tumugon sa mga reagents tulad ng "Anti-a" at "Anti-AB", kung gayon ang pasyente ay may blood type II (type A).
Ang kapansin-pansing agglutination ng test blood sample na may coliclones type na "Anti-AB" at "Anti-B" ay nangangahulugan na ang pasyente ay may blood group III (type B).
Kung ang dugo ng pasyente ay tumugon sa lahat ng mga kemikal na reagents, kung gayon ang sample ng pagsubok ay kabilang sa pangkat IV (uri AB). Kapag tinutukoy ang uri ng dugo gamit ang zoliclones, walang karagdagang pagsusuri ang kinakailangan, dahil ang mga reagents ay hindi naglalaman ng mga additives na maaaring makapukaw ng isang kusang reaksyon.

Ang pagtukoy ng pangkat ng dugo at Rh factor ay isinasagawa sa mga pasilidad ng laboratoryo sa mga institusyong medikal. Ito ay isang medyo simpleng pag-aaral na nagbibigay ng napakakapaki-pakinabang at mahahalagang impormasyon. mahalagang impormasyon tungkol sa isang tao.

Ang mga materyales ay nai-publish para sa mga layuning pang-impormasyon lamang at hindi isang reseta para sa paggamot! Inirerekomenda namin na kumunsulta ka sa isang hematologist sa iyong institusyong medikal!

Ang uri ng dugo at Rh factor ay mga espesyal na protina na tumutukoy sa indibidwal na katangian nito, tulad ng kulay ng mga mata o buhok ng isang tao. Group at Rhesus mayroon pinakamahalaga sa gamot sa paggamot ng pagkawala ng dugo, mga sakit sa dugo, at nakakaapekto rin sa pagbuo ng katawan, ang paggana ng mga organo at maging sikolohikal na katangian tao.

Ang konsepto ng pangkat ng dugo

Kahit na ang mga sinaunang doktor ay sinubukang palitan ang pagkawala ng dugo sa pamamagitan ng pagsasalin ng dugo mula sa tao patungo sa tao at maging sa mga hayop. Bilang isang patakaran, ang lahat ng mga pagtatangka na ito ay may malungkot na kinalabasan. At sa simula lamang ng ikadalawampu siglo, natuklasan ng Austrian scientist na si Karl Landsteiner ang mga pagkakaiba sa mga pangkat ng dugo sa mga tao, na mga espesyal na protina sa mga pulang selula ng dugo - agglutinogens, iyon ay. nagdudulot ng reaksyon agglutination - pagdikit ng mga pulang selula ng dugo. Ito ang naging sanhi ng pagkamatay ng mga pasyente pagkatapos ng pagsasalin ng dugo.

Dalawang pangunahing uri ng agglutinogens ang naitatag, na kung saan ay karaniwang pinangalanang A at B. Ang pagdirikit ng mga pulang selula ng dugo, iyon ay, ang hindi pagkakatugma ng dugo, ay nangyayari kapag ang agglutinogen ay pinagsama sa protina ng parehong pangalan - agglutinin, na nilalaman sa dugo. plasma, ayon sa pagkakabanggit, a at b. Nangangahulugan ito na sa dugo ng tao ay hindi maaaring magkaroon ng mga protina ng parehong pangalan na nagiging sanhi ng pagdikit ng mga pulang selula ng dugo, iyon ay, kung mayroong agglutinogen A, kung gayon hindi maaaring mayroong agglutinin a sa loob nito.

Natuklasan din na ang dugo ay maaaring maglaman ng parehong agglutinogens - A at B, ngunit pagkatapos ay hindi ito naglalaman ng anumang uri ng agglutinin, at vice versa. Ang lahat ng ito ay ang mga palatandaan na tumutukoy sa uri ng dugo. Samakatuwid, kapag ang mga protina ng parehong pangalan sa mga pulang selula ng dugo at plasma ay pinagsama, ang isang salungatan sa pangkat ng dugo ay bubuo.

Mga uri ng mga pangkat ng dugo

Batay sa pagtuklas na ito, 4 na pangunahing uri ng mga pangkat ng dugo ang natukoy sa mga tao:

1st, na hindi naglalaman ng mga agglutinogens, ngunit naglalaman ng parehong agglutinins a at b, ito ang pinakakaraniwang uri ng dugo, na taglay ng 45% ng populasyon ng mundo;
Ika-2, na naglalaman ng agglutinogen A at agglutinin b, ay nakita sa 35% ng mga tao;
Ika-3, na naglalaman ng agglutinogen B at agglutinin a, 13% ng mga tao ang mayroon nito;
Ika-4, na naglalaman ng parehong agglutinogens A at B, at hindi naglalaman ng mga agglutinin, ang uri ng dugo na ito ay ang pinakabihirang, ito ay tinutukoy lamang sa 7% ng populasyon.

Sa Russia ang pagtatalaga ay tinatanggap grupong kaakibat dugo ayon sa sistema ng AB0, iyon ay, ayon sa nilalaman ng mga agglutinogens sa loob nito. Alinsunod dito, ganito ang hitsura ng talahanayan ng pangkat ng dugo:

Ang pagpapangkat ng dugo ay minana. Maaari bang magbago ang uri ng iyong dugo? Ang sagot sa tanong na ito ay malinaw: hindi ito maaaring. Bagama't ang kasaysayan ng medisina ay alam lamang ng isang kaso na nauugnay sa mutation ng gene. Ang gene na tumutukoy sa uri ng dugo ay matatagpuan sa ika-9 na pares ng human chromosome set.

Mahalaga! Ang paghatol tungkol sa kung aling uri ng dugo ang nababagay sa lahat ay nawala ang kaugnayan nito ngayon, tulad ng konsepto unibersal na donor, ibig sabihin, ang may-ari ng 1st (zero) blood group. Maraming mga subtype ng mga grupo ng dugo ang natuklasan, at ang dugo lamang ng parehong uri ang naisalin.

Rh factor: negatibo at positibo

Sa kabila ng pagtuklas ni Landsteiner ng mga pangkat ng dugo, patuloy na nagaganap ang mga reaksyon ng pagsasalin sa panahon ng mga pagsasalin. Ipinagpatuloy ng siyentipiko ang kanyang pananaliksik, at kasama ang kanyang mga kasamahan na sina Wiener at Levine, nakatuklas siya ng isa pang partikular na protina-antigen ng mga erythrocytes - ang Rh factor. Una itong nakilala sa rhesus monkey, kung saan nakuha ang pangalan nito. Ito ay lumabas na ang Rh ay naroroon sa dugo ng karamihan sa mga tao: 85% ng populasyon ay may antigen na ito, at 15% ay wala nito, iyon ay, mayroon silang negatibong Rh factor.

Ang kakaiba ng Rh antigen ay kapag ito ay pumasok sa dugo ng mga taong wala nito, ito ay nagtataguyod ng paggawa ng mga anti-Rh antibodies. Sa paulit-ulit na pakikipag-ugnay sa Rh factor, ang mga antibodies na ito ay nagbibigay ng matinding hemolytic reaction, na tinatawag na Rh conflict.

Mahalaga! Kapag negatibo ang Rh factor, hindi lang ito nangangahulugan ng kawalan ng Rh antigen sa mga pulang selula ng dugo. Ang mga anti-Rhesus antibodies ay maaaring naroroon sa dugo, na maaaring mabuo sa panahon ng pakikipag-ugnay sa Rh positibong dugo. Samakatuwid, ang pagsusuri para sa pagkakaroon ng Rh antibodies ay sapilitan.

Pagpapasiya ng pangkat ng dugo at Rh factor

Ang uri ng dugo at Rh factor ay napapailalim sa mandatoryong pagpapasiya sa mga sumusunod na kaso:

para sa pagsasalin ng dugo;
para sa paglipat ng utak ng buto;
bago ang anumang operasyon;
sa panahon ng pagbubuntis;
para sa mga sakit sa dugo;
sa mga bagong silang na may hemolytic jaundice (Rhesus incompatibility sa ina).

Gayunpaman, sa isip, ang bawat tao, parehong may sapat na gulang at bata, ay dapat magkaroon ng impormasyon tungkol sa grupo at Rh affiliation. Mga kaso ng matinding pinsala o matinding sakit kapag ang dugo ay maaaring agarang kailanganin.

Pagpapasiya ng pangkat ng dugo

Ang pagpapasiya ng pangkat ng dugo ay isinasagawa gamit ang mga espesyal na nakuha na monoclonal antibodies ayon sa sistema ng AB0, iyon ay, serum agglutinins, na nagiging sanhi ng pagdirikit ng mga pulang selula ng dugo sa pakikipag-ugnay sa mga agglutinogens ng parehong pangalan.

Ang algorithm para sa pagtukoy ng pangkat ng dugo ay ang mga sumusunod:

Maghanda ng coliclones (monoclonal antibodies) anti-A - pink ampoules, at anti-B - blue ampoules. Maghanda ng 2 malinis na pipette, glass rod para sa paghahalo at glass slide, isang disposable 5 ml syringe para sa pagguhit ng dugo, at isang test tube.
Ang dugo ay kinuha mula sa isang ugat.
Ang isang malaking patak ng zoliclones (0.1 ml) ay inilalapat sa isang glass slide o isang espesyal na may markang plato; ang maliliit na patak ng dugo na sinusuri (0.01 ml) ay inihahalo sa magkahiwalay na mga glass rod.
Obserbahan ang resulta sa loob ng 3-5 minuto. Ang isang patak na may halo-halong dugo ay maaaring maging homogenous - isang minus na reaksyon (-), o nahuhulog ang mga natuklap - isang plus na reaksyon o agglutination (+). Ang mga resulta ay dapat masuri ng isang doktor. Ang mga opsyon para sa pagsusuri sa pagpapasiya ng pangkat ng dugo ay ipinakita sa talahanayan:

Pagpapasiya ng Rh factor

Ang pagpapasiya ng Rh factor ay isinasagawa nang katulad sa pagpapasiya ng pangkat ng dugo, iyon ay, gamit ang isang monoclonal serum antibody sa Rh antigen. Ang isang malaking patak ng reagent (zoliclone) at isang maliit na patak ng bagong iginuhit na dugo ay inilalapat sa isang espesyal na malinis na puting ceramic na ibabaw sa parehong sukat (10:1). Ang dugo ay maingat na halo-halong may glass rod at ang reagent.

Ang pagtukoy sa Rh factor na may zoliclones ay tumatagal ng mas kaunting oras, dahil ang reaksyon ay nangyayari sa loob ng 10-15 segundo. Gayunpaman, ito ay kinakailangan upang mapanatili ang isang maximum na panahon ng 3 minuto. Tulad ng sa kaso ng pagtukoy ng pangkat ng dugo, ang test tube na may dugo ay ipinadala sa laboratoryo.

Sa medikal na kasanayan ngayon, ang isang maginhawa at mabilis na paraan ng pagpapahayag para sa pagtukoy ng kaakibat ng grupo at Rh factor ay malawakang ginagamit gamit ang mga tuyong coliclone, na diluted na may sterile na tubig para sa iniksyon kaagad bago ang pag-aaral. Ang pamamaraan ay tinatawag na "Erythrotest-group card", ito ay napaka-maginhawa kapwa sa mga klinika, sa matinding mga kondisyon, at sa mga kondisyon ng field.

Ang katangian at kalusugan ng isang tao ayon sa uri ng dugo

Ang dugo ng tao bilang isang tiyak na genetic na katangian ay hindi pa ganap na pinag-aralan. Sa mga nagdaang taon, natuklasan ng mga siyentipiko ang mga variant ng mga subgroup ng dugo, ay bumubuo ng mga bagong teknolohiya para sa pagtukoy ng pagiging tugma, at iba pa.

Ang dugo ay kredito din sa kakayahang maimpluwensyahan ang kalusugan at katangian ng may-ari nito. At kahit na ang isyung ito ay nananatiling kontrobersyal, maraming taon ng mga obserbasyon ang nabanggit Interesanteng kaalaman. Halimbawa, naniniwala ang mga mananaliksik sa Japan na posibleng matukoy ang karakter ng isang tao sa pamamagitan ng kanilang uri ng dugo:

ang mga may-ari ng 1st blood group ay malakas ang loob, malakas, palakaibigan at emosyonal na mga tao;
ang mga may-ari ng ika-2 pangkat ay nakikilala sa pamamagitan ng pasensya, pagiging maingat, tiyaga, at pagsusumikap;
ang mga kinatawan ng ika-3 pangkat ay mga malikhaing indibidwal, ngunit sa parehong oras sila ay masyadong impressionable, dominante at pabagu-bago;
ang mga taong may pangkat ng dugo 4 ay higit na nabubuhay sa pamamagitan ng mga damdamin, ay nailalarawan sa pamamagitan ng pag-aalinlangan, at kung minsan ay hindi makatarungang malupit.

Tulad ng para sa kalusugan depende sa uri ng dugo, pinaniniwalaan na ito ang pinakamalakas sa karamihan ng populasyon, iyon ay, sa pangkat 1. Ang mga taong may pangkat 2 ay madaling kapitan ng sakit sa puso at mga sakit sa oncological, para sa mga may-ari ng ika-3 pangkat ay karaniwan mahinang kaligtasan sa sakit, mababang pagtutol sa mga impeksyon at stress, at ang mga kinatawan ng ika-4 na grupo ay madaling kapitan ng sakit sa cardiovascular, magkasanib na sakit, at kanser.

Ang pangkat ng dugo ayon sa sistema ng ABO ay tinutukoy gamit ang reaksyon ng aglutinasyon. Sa kasalukuyan, tatlong paraan ang ginagamit upang matukoy ang mga pangkat ng dugo gamit ang ABO system:

ayon sa karaniwang isohemagglutinating sera,

gamit ang standard isohemagglutinating sera at standard erythrocytes (crossover method),

gamit ang monoclonal antibodies (coliclones anti-A at anti-B).

Sa kasong ito, mayroong mga sumusunod na karaniwang tinatanggap na taktika kapag tinutukoy ang uri ng dugo.

Sa isang regular na pagsusuri, tinutukoy ng doktor ng ospital ang pangkat ng dugo gamit ang karaniwang isohemagglutinating sera o paggamit ng coliclones, at pagkatapos ay ipapadala ang dugo sa isang serological laboratory upang suriin ang grupo gamit ang cross-sectional na paraan.

Ang uri ng dugo ay itinuturing na tinutukoy lamang kapag kinumpirma ng laboratoryo ang data na nakuha ng doktor ng ospital. Kung magkaiba ang mga resulta ng mga pag-aaral, ang parehong mga pag-aaral ay kinakailangan. Kung kinakailangan upang matukoy ang pangkat ng dugo sa isang emergency na batayan (sa kaso ng pagdurugo, isang kagyat na pagsasalin ng dugo ay kinakailangan), ang doktor ng ospital ang nagpapasiya sa grupo mismo (ang muling pagsusuri ay ginawa sa laboratoryo, ngunit pagkatapos ng katotohanan). Sa ganitong mga kaso, ang mga reaksyon na may isohemagglutinating sera (o coliclones) ay ginagamit din, ngunit kung maaari, ipinapayong gamitin ang paraan ng crossover.

Pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang karaniwang isohemagglutinating sera.

Ang pamamaraang ito ay kasalukuyang pinakakaraniwan sa klinikal at laboratoryo na kasanayan.

Ang kakanyahan ng pamamaraan ay upang makita ang mga antigen ng grupo A at B sa pagsusuri ng dugo gamit ang karaniwang isohemagglutinating sera. Para sa mga layuning ito, ginagamit ang agglutination reaction. Ang reaksyon ay isinasagawa sa isang silid na may mahusay na pag-iilaw sa temperatura na 15-25 ° C.

Mga kinakailangang kagamitan

Standard isohemagglutinating sera ng mga pangkat O (I), A (II), B (III) at AB (IV) ng dalawang magkaibang serye. Ang Sera para sa pagtukoy ng mga grupo ng dugo ay inihanda sa mga espesyal na serological laboratories mula sa donor blood. Ang mga serum ay nakaimbak sa temperatura na 4-8 "C (sa refrigerator).

Ang petsa ng pag-expire ng serum ay ipinahiwatig sa label. Ang serum titer (ipinahiwatig din sa label) ay hindi dapat mas mababa sa 1: 32 (para sa serum B (III) - hindi mas mababa sa 1: 16/32). Ang serum titer ay tumutukoy sa pinakamataas na pagbabanto kung saan maaaring mangyari ang isang agglutination reaction. Ang whey ay dapat na transparent, nang walang mga palatandaan ng nabubulok. Para sa kaginhawahan, ang karaniwang hemagglutinating sera ng iba't ibang grupo ay tinted sa isang tiyak na kulay: O (I) - walang kulay (kulay abo), A (II) - asul, B (III) - pula, AB (IV) - maliwanag na dilaw.

Mga puting porselana o enamel plate o anumang iba pang mga plato na may basang ibabaw, na may markang 0(1), A(Y), VTSP), AB(IV).

Isotonic sodium chloride solution.

Mga karayom, pipette, glass rods (slide).

Teknik ng reaksyon

Sa ilalim ng naaangkop na mga pagtatalaga ng pangkat ng dugo, ang karaniwang isohemagglutinating sera ng mga pangkat I, II, III ay inilalapat sa isang plato (plate) sa dami ng 0.1 ml (isang malaking patak na halos 1 cm ang lapad).

Upang maiwasan ang mga pagkakamali, dalawang serye ng sera mula sa bawat pangkat ang inilalapat, dahil ang isa sa mga serye ay maaaring may mababang aktibidad at hindi nagbibigay ng malinaw na agglutination. Isang kabuuang 6 na patak ang nakuha, na bumubuo ng dalawang hanay ng tatlong patak sa sumusunod na pagkakasunud-sunod mula kaliwa hanggang kanan: O (I), A (II), B (III).

Ang dugo para sa pananaliksik ay kinuha mula sa isang daliri o mula sa isang ugat. Anim na patak ng test blood, humigit-kumulang sa laki ng isang 0.01 ml na pinhead (maliit na patak), ay sunud-sunod na inililipat gamit ang isang tuyong basong baras sa plato sa 6 na puntos, bawat isa ay katabi ng isang patak ng karaniwang serum (ang dami ng nasuri na dugo ay dapat ay humigit-kumulang 10 beses na mas mababa kaysa sa dami ng karaniwang serum, kung saan ito ay halo-halong), pagkatapos ay maingat na pinaghalo ang mga ito gamit ang mga glass rod na may bilugan na mga gilid.

Ang isang mas simpleng pamamaraan ay posible: ang isang malaking patak ng dugo ay inilapat sa isang plato, mula sa kung saan ito ay kinuha gamit ang sulok ng isang glass slide at inilipat sa bawat patak ng suwero, malumanay na paghahalo sa huling. Sa kasong ito, sa bawat oras na ang dugo ay kinuha mula sa isang bagong sulok ng salamin, siguraduhin na ang mga patak ay hindi sumanib.

Pagkatapos ng paghahalo, kalugin ang plato sa pana-panahon. Nagsisimula ang aglutinasyon sa loob ng unang 10-30 segundo, ngunit ang pagmamasid ay dapat isagawa nang hanggang 5 minuto dahil sa posibilidad ng pagsasama-sama sa ibang pagkakataon, halimbawa sa mga pulang selula ng dugo ng pangkat A2(H).

Magdagdag ng isang patak ng isotonic sodium chloride solution sa mga patak kung saan naganap ang agglutination, pagkatapos ay tinasa ang resulta ng reaksyon.

Interpretasyon ng mga resulta

Ang reaksyon ng aglutinasyon ay maaaring positibo o negatibo.

Kung positibo ang reaksyon, kadalasan sa loob ng unang 10-30 segundo, lumilitaw sa pinaghalong maliliit na pulang butil (agglutinates) na binubuo ng mga nakadikit na pulang selula ng dugo, na nakikita ng mata. Ang mga maliliit na butil ay unti-unting nagsasama sa mas malalaking butil, at kung minsan ay nagiging mga natuklap na hindi regular ang hugis.

Sa kasong ito, ang suwero ay nagiging bahagyang o ganap na kupas. Sa isang negatibong reaksyon, ang patak ay nananatiling pare-parehong kulay pula at walang mga butil (agglutinates) na matatagpuan dito.

Ang pag-aari ng dugo na sinusuri sa kaukulang grupo ay tinutukoy ng pagkakaroon o kawalan ng agglutination kapag tumutugon sa kaukulang sera.

Dapat pansinin na kung ang sera ng lahat ng tatlong grupo ay nagbigay ng positibong reaksyon, ito ay nagpapahiwatig na ang nasubok na dugo ay naglalaman ng parehong agglutinogens - A at B at kabilang sa pangkat AB (IV).

Gayunpaman, sa ganitong mga kaso, upang ibukod ang isang hindi tiyak na reaksyon ng agglutination, kinakailangan na magsagawa ng karagdagang pag-aaral ng kontrol sa pagsusuri ng dugo na may karaniwang isohemagglutinating serum ng pangkat AB(IV), na hindi naglalaman ng mga agglutinin.

Tanging ang kawalan ng agglutination sa drop na ito sa pagkakaroon ng agglutination sa mga patak na naglalaman ng karaniwang sera ng mga grupo 0 (1), A (I) at V (III) ay nagpapahintulot sa amin na isaalang-alang ang reaksyon na tiyak at uriin ang dugo sa ilalim ng pag-aaral bilang pangkat AB0 (IV).

Dapat pansinin na kung mayroong mahinang subtype ng A2 antigen sa pagsusuri ng dugo, ang reaksyon ng agglutination na may hemagglutinating sera ng mga grupo 0(1) at B(III) ay magsisimula mamaya (sa 3-4 minuto).

Upang tumpak na matukoy ang subtype ng antigen A, kinakailangan na magsagawa ng karagdagang reaksyon sa tinatawag na anti-A reagent na ginawa mula sa mga buto ng halaman ng Dolichos bitforis, na naglalaman lamang ng mga anti-A antibodies (na isinagawa sa isang serological laboratoryo. ).