Enzyme immunoassay test system “ds-ifa-hbeAg” at “ds-ifa-anti-hbe.” Ano ang pagsusuri ng ELISA

S.N. IGOLKINA, V.F. PUZYREV, L.G. ZININA, N.M. DENISOVA, A.N. BURKOV,

A.P. RITE, T.I. ULANOVA
LLC "Samahan ng Pananaliksik at Produksyon "Diagnostic Systems",

Nizhny Novgorod
ELISA IMMUNO TEST SYSTEMS "DS-ELISA-HBeAg" at "DS-ELISA-anti-HBe" PARA SA TIYAK NA DIAGNOSIS AT PAGHULA NG MGA RESULTA NG ACUTE AT CHRONIC HEPATITIS B
Ang Hepatitis B ay isang viral infectious disease na nailalarawan sa pamamagitan ng malubha

nagpapaalab na pinsala sa atay. humigit-kumulang 1% mga pagkamatay naobserbahan sa

talamak na panahon ng sakit, sa 4-10% ng mga kaso mayroong isang pagbabagong-anyo sa talamak

proseso na may posibleng pagbuo ng kasunod na cirrhosis ng atay at pangunahing

hepatocarcinomas.

Sa kabila ng trend patungo sa pagbaba ng saklaw ng talamak na hepatitis B, isang epidemiologically mapanganib na grupo ng mga pasyente na na-diagnose na may talamak na viral hepatitis sa unang pagkakataon, pati na rin ang isang grupo ng mga carrier ng causative agent ng sakit, ay patuloy na bumubuo. . Ang isang hindi kanais-nais na pagbabala ay nananatili dahil sa mataas na saklaw ng hepatitis B sa populasyon ng edad ng reproductive, pati na rin sa mga kabataan.

Samakatuwid, ang mga isyu ng paggamot, pag-iwas at pagsusuri ng hepatitis B ay partikular na nauugnay ngayon. Sa kasalukuyan, ang mga pamamaraan ng immunosorbent na may kaugnayan sa enzyme na pagsusuri ay malawakang ginagamit upang makita ang mga marker ng impeksyong ito. Ang pinakamahalagang serological marker ng HBV ay kinabibilangan ng e-antigen (HBeAg) at antibodies sa e-antigen (anti-HBe). Ang HBeAg ay nauugnay sa mataas na kontaminasyon ng dugo, na nagpapahiwatig ng aktibong pagtitiklop ng hepatitis B virus (HBV). Napagtibay na ang mataas na titer ng HBeAg ay tumutugma sa mataas na aktibidad ng DNA polymerase at palaging pinagsama sa pagtuklas ng kumpletong mga particle ng Dane. Kung ang serum na naglalaman ng HBeAg ay pumasok sa dugo malusog na tao ang panganib ng impeksyon ay maraming mga order ng magnitude na mas mataas kaysa pagkatapos ng seroconversion.

Sa talamak na hepatitis B, ang HBeAg ay nakita sa dugo sa mga unang yugto nakakahawang proseso na sa una mga klinikal na pagpapakita sakit, nahuhuli isang linggo pagkatapos ng paglitaw ng HBsAg. Ang talamak na hepatitis B (AHB) ay may paikot na kurso at nailalarawan sa pamamagitan ng panandaliang sirkulasyon ng HBeAg. Sa lalong madaling panahon, sa 2-3 na linggo ng icteric period, lumilitaw ang anti-HBe, na ginagawang posible upang mahulaan ang isang kanais-nais na kinalabasan ng sakit.

Ang anti-HBe ay umiikot sa dugo sa loob ng 2-5 taon, mas madalas sa loob ng ilang buwan.

Ang simula ng HBeAg-antiHBe seroconversion ay nagmamarka ng isang matalim na pagbaba sa aktibidad

nakakahawang proseso. Ang pagtuklas ng HBeAg sa dugo ng mga pasyente pagkatapos ng 2 buwan ng sakit ay nagpapahiwatig ng talamak ng proseso ng pathological. Sa kasong ito, ang anti-HBe ay maaaring mabuo ng maraming taon pagkatapos ng paglitaw ng mga antibodies sa HBcAg o maaaring hindi matukoy.

Ang hitsura ng anti-HBe ay maaaring may hindi kanais-nais na prognostic na halaga sa

talamak na panahon ng HBV na may malubhang anyo, na tumutugma sa isang mutation sa pre-core zone na may

pagbuo ng HBV "e-" strain.

Ang layunin ng gawaing ito ay bumuo ng lubos na sensitibo at tiyak

enzyme immunoassay test system para sa pagtuklas ng HBeAg at anti-HBe at pagtatasa ng kanilang mga pangunahing katangian.

Mga materyales at pamamaraan.

1. Enzyme immunosorbent test system "DS-ELISA-HBeAg". Aktibong simula pagsusulit

ay polyclonal goat antibodies sa recombinant HBeAg, na ginawa ng NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod, adsorbed papunta sa solid phase, at isang conjugate, na polyclonal goat antibodies sa recombinant HBeAg, na may label na may malunggay peroxidase, na ginawa ng NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod. Ang scheme ng pagsusuri ay isang yugto ng "sandwich". Ang kabuuang oras ng reaksyon ay 1.5 oras. Ang sample ng serum ay nasuri na hindi natunaw.

2. Enzyme immunosorbent test system "DS-ELISA-anti-HBe". Ang batayan ng pagsusulit ay

recombinant HBeAg (AHBV 102), na ginawa ng NPO Diagnostic Systems,

Nizhny Novgorod, sorbed sa solid phase at anti-IgG conjugate na may malunggay peroxidase, na ginawa ng Sorbent Service, Moscow. Ang reaksyon ay nagaganap sa dalawang yugto. Ang test serum ay idinagdag sa immobilized antigen sa isang 1/10 dilution at, pagkatapos ng pagpapapisa at pagtanggal ng mga hindi nakatali na bahagi, ang mga partikular na immunocomplex ay makikita gamit ang mouse monoclonal antibodies laban sa IgG ng tao na may label na malunggay peroxidase.

3. Upang suriin ang mga binuo na sistema ng pagsubok, 2178 mga sample ng serum ang ginamit

dugo. Sa mga ito, 480 ay mga sample ng serum mula sa malusog na mga donor. 1680 sample ang kumakatawan

ay mga sample ng serum ng dugo na naglalaman ng iba't ibang mga marker ng hepatitis B virus.

Labingwalong sample ang nakuha sa paglipas ng panahon mula sa mga pasyente na may klinikal na diagnosis ng talamak na viral hepatitis B. Noong nakaraan, ang lahat ng mga sample ay nasubok para sa pagkakaroon ng HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc gamit ang mga sistema ng pagsubok na ginawa ng NPO Diagnostic Systems, Nizhny Novgorod: "ELISA-HBsAg/m", "DS-ELISA-HBeAg", " DS-ELISA-anti-HBe", "ELISA-anti-HBc".

4. Ang isang paghahambing na pagtatasa ng mga binuo na sistema ng pagsubok ay isinagawa gamit ang

komersyal na gamot na "Monolisa HBe", na ginawa ng BIO-RAD, France;

Resulta at diskusyon. Ang NPO "Diagnostic Systems" ay bumuo ng 2 bagong diagnostic kit: "DS-ELISA-HBeAg" at "DS-ELISA-anti-HBe". Ang sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-HBeAg" ay idinisenyo upang makita ang e-antigen ng hepatitis B virus sa serum ng tao (plasma) gamit ang isang enzyme-linked immunosorbent assay at maaaring gamitin para sa mga partikular na diagnostic, pagtukoy sa aktibidad ng nakakahawang proseso, hinuhulaan ang kalubhaan at kinalabasan ng hepatitis B.

Ang sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-anti-HBe" ay idinisenyo upang makita ang mga antibodies ng IgG sa e-antigen ng hepatitis B virus sa serum ng dugo ng tao (plasma) at maaaring

ginagamit sa paghula sa kurso ng nakakahawang proseso at pagsubaybay sa therapy para sa hepatitis B.

Upang pag-aralan ang pagtitiyak ng mga bagong pagsubok, ang pamamahagi ay tinasa

optical density (OD) ng mga sample ng serum ng dugo na naglalaman at hindi naglalaman

HBeAg o anti-HBe. Ang mga sample ng serum ng dugo mula sa mga malulusog na donor at mga sample ng serum ng dugo na pinili para sa iba't ibang mga marker ng hepatitis B virus ay ginamit.

mga istasyon ng pagsasalin ng dugo. Ang mga resulta ng pag-aaral ay nagpakita ng isang makabuluhang paghihiwalay ng dalawang populasyon. Ang mga halaga ng OD ng mga sample ng serum na hindi naglalaman ng HBeAg ay mula 0.011 hanggang 0.111, at ang pangunahing peak ng mga sample ng serum na naglalaman ng HBeAg ay mula 2.186 hanggang 3.186 (Larawan 1a).

Fig.1a. Pamamahagi ng OD ng mga sample ng serum na naglalaman at hindi naglalaman ng HBeAg sa sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-HBeAg"
Ang rurok na tumutugma sa pangkat ng sera na may mababang OD (0.3-0.6) ay malamang na binubuo ng mga sample ng serum na nakolekta sa mga unang yugto ng nakakahawang proseso.

Nasa panahon na ng incubation, ang HBsAg at HBeAg ay natural na nakarehistro sa dugo ng mga pasyente, na nagpapatunay sa kanilang potensyal na epidemiological na panganib.

Optical density range ng mga sample ng serum na hindi naglalaman ng anti-HBe

ay nasa saklaw mula 0.002 hanggang 0.122, at ang pangunahing rurok ng OD ng mga sample ng serum na naglalaman ng anti-HBe ay nasa saklaw mula 2.431 hanggang 3.231 (Larawan 1b).

kanin. 1b. Pamamahagi ng OD ng mga sample ng serum na naglalaman at hindi naglalaman ng anti-HBe sa sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-anti-HBeAg"
Ang mga tampok ng pamamahagi ng OD ng mga anti-HBe na positibong sample ay pinag-aralan

mga serum na naglalaman ng ( n=78) at hindi naglalaman ng HBsAg ( n=56).

kanin. 2a. Mga sample ng serum na positibo sa HBe na naglalaman ng HBsAg sa sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-anti-HBe".

Fig.2b. Mga tampok ng pamamahagi ng OD ng mga anti-HBe-positive na sample ng serum na hindi naglalaman ng HBsAg sa sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-anti-HBe".
Ang optical density ng 87% ng mga anti-HBe-positibong serum na sample na hindi naglalaman ng HBsAg ay mula 0.41 hanggang 0.81 (Larawan 2b). Bukod dito, 14% lamang ng mga anti-HBe-positibong serum na sample na naglalaman ng HBsAg ay mayroong OD sa saklaw na ito (Larawan 2a). Ito ay kilala na sa yugto ng late convalescence, na may negatibong reaktibiti sa HBsAg, mayroong unti-unting pagbaba sa mga titer ng antibody sa HBeAg (Larawan 2b). Samakatuwid, posible na ang nangingibabaw na konsentrasyon ng mga anti-HBe-positibong sample ay tumutugma sa isang OD na mas mababa sa 0.8.

Ang data na nakuha ay nagpapahiwatig ng pagiging maaasahan ng paghihiwalay ng positibo at

negatibong mga sample ng serum ng dugo, anuman ang yugto ng sakit. Ang sensitivity at pagiging tiyak ng mga sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-HBeAg" at "DS-ELISA-antiHBe" ay pinag-aralan kumpara sa pagsubok na "Monolisa HBe" (BIORAD, France) (Talahanayan 1).

Talahanayan 1
Mga paghahambing na katangian ng sensitivity at specificity

mga sistema ng pagsubok DS-ELISA-HBeAg at DS-ELISA-antiHB

Index	Pagpapasiya ng HBeAg		Pagpapasiya ng antiHBe
Index	NPO "DS", DS-IFA-HBeAg	"BIO-RAD" "Monolisa HВe"	NPO "DS" DS-ELISA-antiHBe	"BIO-RAD"
Dami sinaliksik mga sample	67	67	32	32
Nabunyag positibo mga sample	47	47	16	16
Nabunyag negatibo mga sample	20	20	16	16

Ang data na ipinakita sa Talahanayan 1 ay nagpapakita ng 100% na kasunduan sa pagitan ng mga resulta.

Alam na ang pinagsamang indikasyon ng HBeAg at anti-HBe, lalo na ang kanilang quantitative assessment, ay may karagdagang prognostic significance. Ang mabilis na pagtaas ng anti-HBe titer ay nagpapakilala sa aktibong humoral na immune response at halos inaalis ang banta ng chronicity. Sinuri namin ang mga pagbabago sa nilalaman ng HBeAg/anti-HBe sa mga sample ng serum ng dugo mula sa mga pasyente na may klinikal na diagnosis ng "acute viral hepatitis B" (Talahanayan 2).

talahanayan 2
Dynamics ng HBeAg/anti-HBe seroconversion sa mga pasyenteng may HBV

Paksa may sakit	Araw ng koleksyon ng dugo*	HBeAg	anti-HBe O.F./O.C.		Anti-HBc	anti- HBc IgM
	1	1,4+	2,1+	+	+	+
	12	0,5-	1,0+	+	+	+
	21	0,3-	1,3+	+	+	+
	1	1,2+	1,2+	+	+	+
	5	0,4-	1,0+	+	+	+
	13	0,2-	2,5+	+	+	+
	1	1,2+	0,6-	+	+	+
	21	0,2-	4,6+	+	+	+
	30	0,2-	9,7+	+	+	+
	1	2,1+	0,5-	+	+	+
	8	0,6-	1,1+	+	+	+
	28	0,3-	2,8+	+	+	+
	1	0,7-	2,2+	+	+	+
	8	0,3-	2,2+	+	+	+
	15	0,3-	2,8+	+	+	+
	38	0,2-	3,0+	+	+	+
6	1	1,1+	4,4+	+	+	+
	14	0,5-	3,8+	+	+	+

* mula sa pagpasok sa ospital
Ang lahat ng mga sample ng serum ay nasubok para sa pagkakaroon ng mga serological marker

OGV: HBsAg, anti-HBc, anti-HBc IgM. Ang panahon ng pagmamasid ay mula 13 hanggang 38 araw. Sa mga pasyente No. 1, No. 2 at No. 6, nakita ang anti-HBe laban sa background ng pagbaba sa titer ng HBeAg. Sa mga pasyenteng No. 3 at No. 4, lumitaw ang anti-HBe pagkatapos mawala ang HBeAg sa serum ng dugo sa mga araw na 21 at 8, ayon sa pagkakabanggit. Ang pagsusuri ng HBeAg detection sa blood serum ng pasyente No. 5 sa pagpasok sa ospital ay nagpakita ng negatibong resulta. Kasabay nito, ang conversion sa anti-HBe ay nairehistro na sa unang araw ng pagsusuri.

Ang lahat ng mga paksa ay nagpakita ng isang pagkahilig sa pagtaas ng titer ng mga antibodies sa HBeAg sa

serum ng dugo, na ginagawang posible upang mahulaan ang paborableng dinamika ng klinikal

manifestations ng acute respiratory syndrome at mabilis na paggaling.

Ang pag-aaral ng mga bagong sistema ng pagsubok ay nagpakita ng kanilang mataas na diagnostic na pagiging maaasahan. Ang mga resulta ng paghahambing ng DS-ELISA-HBeAg at DS-ELISA-antiHBe ay nagpakita ng 100% na kasunduan sa Monolisa HBe test.

Kapag nag-aaral ng mga sample ng serum mula sa mga pasyente na may hepatitis B sa dinamika, mga pagsusuri

nakumpirma na mataas ang sensitivity at specificity.

Ang maikling oras ng pagpapapisa ng itlog ng mga sample ng pagsubok at ang conjugate (1 oras) ay ginagawang posible upang matukoy ang mga tamang taktika para sa pagsasagawa ng mga therapeutic measure sa pinakamaikling posibleng panahon. Ang mga nilikhang sistema ng pagsubok ay madaling gamitin at matipid (50 μl ng serum ay kinakailangan upang matukoy ang HBeAg at 10 μl ng serum upang matukoy ang anti-HBe). Ang mataas na kalidad na mga katangian ng mga pagsusuri ay nagpapahintulot sa kanila na matagumpay na magamit sa paghula sa kurso ng nakakahawang proseso at pagsubaybay sa therapy para sa hepatitis B.
PANITIKAN

1.Mayer K.P. Hepatitis at mga kahihinatnan ng hepatitis / K.P. Mayer. – M., GEOTAR, Medisina, 1999.- P.720

2.Onishchenko G.G. Pagkalat ng viral hepatitis bilang banta sa pambansang seguridad / G.G. Onishchenko, L.A. Dementieva // Journal of Microbiology. –2003.-Blg. 4.- P.93-99.

3.Sorinson S.N. Viral hepatitis/ S.N. Sorinson. - St. Petersburg, Teza, 1997.- 306 P.

4. Baumeister M. Hepatitis B Virus at Antigen Specific Epitopes at Limitasyon ng Commercial Anti-HВe Immunoassays / M. Baumeister // Journal of Medical Virology.- 2000.-N 60.- R. 256-263.

5.Kane M. Pandaigdigang programa para sa pagkontrol ng impeksyon sa hepatitis B / M. Kane // Bakuna. – 1995.-N131(Suppl. 1).- R.47-6. Sab ni ShunichiO. Ang Hepatitis B Virus Strains na may Mutations in the Core Promoter sa mga Pasyenteng may Fulminant Hepatitis / Shunichi Sato, Kazuyuki Suzuki // Annals of Internal Medicine. – 1995.- N122.- R.241-248.

7. Ou J.-N. Molecular biology ng hepatitis B virus at antigen./ J.-N.Ou // Journal of Gastroenterology and Hepatology. – 1997.- No. 12 (Suppl.1) – R. 178-187.

8.Tiollais P. Ang hepatitis B virus. / P. Tiollais, C. Pourcel, A. Dejean // Kalikasan. – 1985. – P.317, 489-495
Nai-publish: J. "Mga diagnostic ng klinikal na laboratoryo" - 2005.-No. 6-P.-34-37

Presyo sa kahilingan

Maaari kang magdagdag ng item sa iyong cart sa pamamagitan ng pagtukoy sa dami

Tagagawa: Mga diagnostic system

Bansang Russia

Yunit Meas.: itakda

Uri ng packaging: karton na kahon

Artikulo: L-1823

Paglalarawan

Enzyme immunoassay test system para sa pag-detect ng mga antibodies ng mga klase G, M at A sa Treponema pallidum (T. pallidum) sa serum ng dugo ng tao (plasma) at cerebrospinal fluid para sa layunin ng pag-diagnose ng syphilis, isang kumpletong hanay ng mga reagents para sa 96x2 determinations, na angkop para sa mga manu-manong pamamaraan at awtomatikong pagsusuri ng mga analyzer. Ang pamamaraan ay batay sa prinsipyo ng "bitag", na binubuo sa katotohanan na ang mga tiyak na antitreponemal antibodies ng lahat ng mga klase na naroroon sa sample ay nagbubuklod nang sabay-sabay sa mga recombinant na antigens - mga analogue ng immunodominant na protina ng T. pallidum, na naayos sa mga balon ng plato, at sa parehong mga antigen na may label na peroxidase malunggay, kapag magkasamang ini-incubate ang mga sample ng serum ng dugo ng tao (plasma) o cerebrospinal fluid at ang conjugate. Ang pagbabago sa kulay ng substrate-chromogenic mixture na naglalaman ng TMB kapag idinagdag ito sa mga balon ng plate ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga tiyak na antibodies sa Treponema pallidum sa mga sample ng pagsubok

Functional na layunin

Ang pagtuklas ng mga antibodies sa Treponema pallidum ay gumaganap ng isang mahalagang papel sa diagnosis ng syphilis, dahil ang T. pallidum ay hindi maaaring ihiwalay mula sa cell culture, at ang mga sample para sa direktang pagtukoy ng pathogen ay kadalasang hindi magagamit sa mga nakatagong yugto ng sakit. Sa serodiagnosis ng syphilis, ginagamit ang mga non-treponemal (RMP, RPR, VDRL) at treponemal (RPGA, RIF, ELISA). Ang mga pagsusuri sa immunoassay ng enzyme para sa pagtukoy ng kabuuang antibodies ay ginagamit para sa mass screening ng dugo ng donor at para sa pag-diagnose ng syphilis bilang bahagi ng isang kumplikadong mga serological test. Pagkatapos ng matagumpay na therapy, ang reaktibiti ng treponemal test sa karamihan ng mga kaso ay nananatili

Mga pagtutukoy

Itakda ang mga nilalaman:
1. Polystyrene 96-well collapsible plate - 2 pcs.,
2. Ang conjugate ay isang transparent na dilaw na likido,
3. Positibong kontrol - transparent na pulang likido,
4. Negatibong kontrol - transparent na berdeng likido,
5. Hugasan ang solusyon, tumutok, pH mula 6.9 hanggang 7.6,
6. Ang TMB ay isang transparent na walang kulay na likido,
7. Substrate solution - transparent na walang kulay na likido, pH ~4.2.
8. Ihinto ang reagent (0.2M),
9. Mga tagubilin para sa paggamit at sertipiko ng kalidad.
Mga kondisyon ng imbakan: sa temperatura na +2...8°C, hindi katanggap-tanggap ang pagyeyelo.
Ang shelf life ay 15 buwan mula sa petsa ng produksyon na nakasaad sa label ng kit.
Pagsunod sa mga kinakailangan ng TU 9398-182-05941003-2010.
Nakarehistro sa Roszdravnadzor.

Mga may-ari ng patent RU 2515051:

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at medisina. Isang enzyme-linked immunosorbent test system para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa human blood serum (plasma). Kasama sa sistema ng pagsubok ang isang immunosorbent batay sa human immunodeficiency virus type 1 antigens (HIV-1 at HIV-1 group O env), isang sample dilution solution (SRS) at detection reagents (conjugates, chromogen/substrate). Ang imbensyon ay nauugnay din sa isang paraan para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa human blood serum (plasma) sa pamamagitan ng pagsusuri sa blood serum ng pasyente gamit ang inilarawang enzyme. -linked immunosorbent test system. Ginagawang posible ng imbensyon na mabilis at madaling matukoy ang posibleng tiyempo ng impeksyon sa HIV. 2 n.p. mga file, 4 na talahanayan, 2 pr.

Ang INVENTION ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at medisina. At maaari itong gamitin upang matukoy ang posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa human serum (plasma).

Ang pagkalat ng impeksyon sa HIV ay nananatiling isang tunay na problema sa modernong mundo. Dahil ang napapanahon at mataas na kalidad na mga diagnostic ay tunay na paraan upang mabawasan ang lugar ng pagkalat ng impeksyon sa HIV, kung gayon ang pagbuo ng isang epektibong sistema ng pagsubok na maaaring matukoy ang posibleng tagal ng impeksyon ay isang mahalagang gawain ng modernong lipunan.

Ang isang pagsusuri ng estado ng sining ay nagpakita ng pagkakaroon ng isang bilang ng mga pamamaraan at pagsusulit na iminungkahi ng iba't ibang mga may-akda upang matukoy ang mga yugto ng impeksyon sa HIV gamit ang iba't ibang pamamaraan. Halimbawa, alam ang isang molecular genetic test, batay sa pagtukoy sa viral load ng peripheral blood gamit ang polymerase chain reaction (PCR) method (Kravchenko A.V., Serebrovskaya L.V., Golokhvostova E.L. et al. Timazid kasama ng chivid at invirase sa complex therapy ng mga pasyenteng may HIV infection - Epidemiology at mga nakakahawang sakit - 1998. - No. 5 - p. 51-52). Mayroong isang kilalang paraan para sa pagtatasa ng mga yugto ng impeksyon sa HIV (Clinical Immunology and Allergology, na-edit ni G. Lawlor Jr. - M.: Praktika, 2000. - P. 585-587), na binubuo sa pagtukoy ng antas ng serum β 2 -microglobulin. Ang isang paraan para sa pag-diagnose ng mga yugto ng impeksyon sa HIV ay inilarawan (V.V. Pokrovsky et al. "Clinical diagnosis at paggamot ng HIV infection." - M.: GOU VUNMC RF, 2001. - P. 11), na binubuo sa pagtukoy ng ganap na bilang ng CD4 + lymphocytes peripheral blood. Mayroon ding isang kilalang paraan para sa pag-diagnose ng mga yugto ng impeksyon sa HIV, batay sa katotohanan na kapag sinusuri ang serum ng dugo ng isang pasyente gamit ang isang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), ang optical density (OD) ng orihinal na sample ng serum ng dugo ay tinutukoy. , na sumasalamin sa antas ng mga antibodies na partikular sa HIV, at ang OD ng orihinal na sample ng serum na natupok sa loob ng 10 minuto na may 100 μl ng 3.5 M sodium isothiocyanate solution. Kapag bumaba ang OP ng 40% o mas kaunti, nasuri ang stage A - generalized lymphadenopathy; kapag bumaba ang OP sa hanay na 40-60% - stage B - bacillary angiomatosis, oropharyngeal candidiasis, atbp., at kapag bumaba ang OP ng 60 % o higit pa - yugto C - AIDS (RU 2251701).

Kaya, ang pagsusuri ng estado ng sining ay nagpakita na wala sa mga umiiral na mapagkukunan ang maaaring magsilbing pinakamalapit na analogue sa inaangkin na imbensyon, dahil ang lahat ng mga dokumentong ito ay nauugnay sa mga pamamaraan at pagsusuri na tumutukoy sa yugto ng impeksyon sa HIV, at wala sa mga ang inilarawan na mga mapagkukunan ay naglalaman ng mga teknikal na desisyon na naglalayong tukuyin ang malamang na pagitan ng oras ng impeksyon. Ang inaangkin na imbensyon ay nauugnay sa isang sistema ng pagsubok na tumutukoy sa posibleng tagal ng impeksyon sa HIV. Ang pagsusuri sa antas ng teknolohiya ay hindi nagpahayag ng mga katulad na solusyon na naglalayong lutasin ang problema.

Ang kasalukuyang imbensyon ay nag-aangkin ng isang hanay ng mga reagents na "DS-ELISA-HIV-AT-SROC" para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa serum ng dugo ng tao ( plasma). Ang pagsusuri ay inilaan para sa karagdagang pagsusuri sa mga sample na positibo sa HIV na may kumpirmadong positibong resulta sa immunoblot. Posibleng pag-aralan ang mga sample na may hindi tiyak o negatibong resulta ng pagsusuri sa immunoblot, kung saan nakumpirma ang pagkakaroon ng HIV RNA at/o HIV-1 p24 antigen.

Ang kasalukuyang imbensyon ay nag-aangkin din ng isang paraan para sa paggamit ng set na ito ng mga reagents na "DS-ELISA-HIV-AT-SROC" upang matukoy ang posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa serum (plasma) dugo ng tao.

Ang teknikal na resulta ng inaangkin na imbensyon ay ang pagpapasiya ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, ang kadalian ng pagsasagawa ng pagsusulit, na nagpapahintulot sa paggamit ng inaangkin na imbensyon. para sa epidemiological surveillance ng dynamics ng pagkalat ng HIV infection, ang dynamics identification ng seroconverters sa isang partikular na populasyon (sex, edad, social groups ng populasyon), pati na rin sa epidemiological investigation ng mga kaso at foci ng HIV infection.

Ang kakanyahan ng iminungkahing teknikal na solusyon ay ang pagpapasiya ng posibleng panahon ng impeksyon sa HIV-1 ay isinasagawa gamit ang isang sistema ng pagsubok, na kinabibilangan ng isang immunosorbent batay sa human immunodeficiency virus type 1 antigens (HIV-1 env at HIV-1 na grupo. O), isang dilution solution sample (SRS) at detection reagents (conjugates, chromogen/substrate). Ang mga sample ng pagsubok ay sinubok ng katutubong at diluted sa isang sample na solusyon sa pagbabanto. Batay sa mga resulta ng pagsubok, ang mga sample ay nahahati sa "maaga" at "huli". "Maagang" sample - ang posibleng panahon ng impeksyon ay hanggang 9 na buwan mula sa sandali ng impeksyon, "huli" na mga sample - ang posibleng panahon ng impeksyon ay 9 o higit pang buwan mula sa sandali ng impeksyon. Kung ang isang sample ay kabilang sa "maaga" o "huli" ay tinatasa sa pamamagitan ng porsyento ng pagbaba sa optical density (OD) ng natunaw na sample na may kaugnayan sa hindi natunaw na sample.

Ang mga halimbawang ito ay nagsisilbing ilarawan ang mga partikular na embodiment ng imbensyon at hindi nilayon na limitahan ang mga karapatan ng aplikante. Ang saklaw ng mga karapatan ng aplikante ay sumasaklaw sa lahat posibleng mga opsyon mga imbensyon, kabilang ang mga hindi nakalista sa seksyong ito.

Ang mga recombinant na antigen na naglalaman ng immunodominant env region ng HIV-1 at HIV-1 group O ay ginagamit bilang immunosorbents. Ang Conjugate-1 ay pinaghalong recombinant antigens na HIV-1 gp41 at HIV-1 group O gp41 na pinagsama sa biotin. Sa unang yugto, ang mga sample ng pagsubok, mga control sample at ang kanilang mga dilution na 1:101, pati na rin ang RRS, ay natupok ng conjugate-1. Ang mga partikular na antibodies na naroroon sa pagsubok at kinokontrol ang mga positibong sample ay nagbubuklod sa mga antigen na na-sorbed sa mga balon ng microplate at mga antigen na pinagsama sa biotin at bumubuo ng mga matatag na complex. Ang mga sobrang sample at conjugate-1 ay inaalis sa pamamagitan ng paghuhugas. Sa susunod na yugto, ang streptavidin na pinagsama sa malunggay peroxidase (conjugate-2) ay idinagdag sa mga balon. Ang conjugate-2 ay nagbubuklod sa antigen-antibody-antigen complex na nasa balon. Ang labis na conjugate-2 ay tinanggal sa pamamagitan ng paghuhugas at pagkatapos ay idinagdag ang chromogen/substrate sa mga balon. Sa mga balon na may nakatali na conjugate-2, isang asul na kulay ang bubuo, na nagiging dilaw kapag may idinagdag na stop solution. Ang mga resulta ay naitala gamit ang isang spectrophotometer.

Ang mga recombinant na antigen na naglalaman ng immunodominant env region ng HIV-1 at HIV-1 group O ay ginagamit bilang immunosorbent. Ginagamit ang isang conjugate - isang pinaghalong recombinant antigens na gp41 HIV-1 at gp41 HIV-1 group O, na pinagsama sa malunggay peroxidase. Sa panahon ng pagsusuri, ang mga sample, mga kontrol at ang kanilang mga dilution, pati na rin ang RRS ay incubated sa conjugate sa antigen-coated wells ng plate. Ang nagreresultang stable complex pagkatapos alisin ang labis na sample at conjugate ay ipinahayag sa pamamagitan ng pagdaragdag ng chromogen/substrate. Sa kasong ito, bubuo ang isang asul na kulay, na nagiging dilaw kapag idinagdag ang stop solution. Ang mga resulta ay naitala gamit ang isang spectrophotometer.

Kung ang mga pinag-aralan na sample ay nabibilang sa "maaga" o "huli" ay tinatasa sa pamamagitan ng % pagbaba sa OD kapag diluting ang sample, na kinakalkula gamit ang formula:

% drop O P = 100% − O P reconnaissance ng sample − O P s r. R R S O P BUONG SAMPLE × 100% ,

kung saan OPsr. RRS - average na halaga ng OP RRS (kinakalkula batay sa ilang mga halaga ng OP RRS).

Ang mga sample sa ilalim ng pag-aaral ay itinuturing na "maaga": kung ang pagbaba sa OD ay >40%.

Ang mga sample sa ilalim ng pag-aaral ay itinuturing na "huli": kung ang pagbaba sa OD ay ≤40%.

Ang isang halimbawa ng pagkalkula ng % drop sa OD kapag ang pagtunaw ng sample ay ibinibigay sa Talahanayan 1.

Maginhawang gamitin ang Excel upang itala at iproseso ang mga resulta. Ang paggamit ng application na ito ay magbibigay-daan sa iyo upang awtomatikong magsagawa ng mga kalkulasyon. Ang programa para sa pagproseso ng mga resulta ng pagsubok ay matatagpuan sa disk na kasama sa kit, o ito ay matatagpuan sa website ng kumpanya.

Kapag binubuo at sinusuri ang pagsubok, ginamit ang mga sample mula sa mga seroconversion panel (BBI, Inc., Zeptometrix, USA) at HIV-positive blood serum (plasma) na may itinatag na posibleng timing ng impeksyon. Ang posibilidad ng wastong pagtukoy sa tagal ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, na itinatag ng mga panel ng seroconversion, ay 100% (ang data ay ipinakita sa Talahanayan 2), batay sa mga sample ng serum mula sa Ang mga indibidwal na may kondisyong itinatag na panahon ng impeksyon (n=129) ay 94% (Talahanayan 3, 4; bahagyang ipinakita ang data).

talahanayan 2
Mga resulta ng pagsusuri ng mga sample ng serum/plasma na positibo sa HIV na itinatag ng mga panel ng seroconversion
Seroconversion panel	Mga araw mula noong unang pagkuha ng dugo	Resulta ng pagsusulit sa “DS-IFA-HIV-AT-SROC”
BBI PRB 914	31	"maaga"
BBI PRB 916	35	"maaga"
BBI PRB 925	49	"maaga"
BBI PRB 929	28	"maaga"
BBI PRB 930	10	"maaga"
BBI PRB 931	42	"maaga"
BBI PRB 934	11	"maaga"
BBI PRB 941	25	"maaga"
BBI PRB 942	14	"maaga"
BBI PRB 944	16	"maaga"
BBI PRB 947	20	"maaga"
BBI PRB 951	19	"maaga"
BBI PRB 952	21	"maaga"
BBI PRB 955	14	"maaga"
BBI PRB 965	21	"maaga"
BBI PRB 966	51	"maaga"
BBI PRB 968	35	"maaga"
BBI PRB 969	77	"maaga"
ZMC HIV 6243	33	"maaga"
ZMC HIV 6247	30	"maaga"
ZMC HIV 9014	31	"maaga"
ZMC HIV 9017	35	"maaga"
ZMC HIV 9018	33	"maaga"
ZMC HIV 9021	57	"maaga"
ZMC HIV 9022	29	"maaga"
ZMC HIV 9032	55	"maaga"
ZMC HIV 9077	104	"maaga"
ZMC HIV 9079	95	"maaga"
ZMC HIV 12008	42	"maaga"

Sinuri ng pagsusulit na "DS-ELISA-HIV-AT-TERM" ang posibilidad ng pag-aaral ng mga sample ng blood serum (plasma) na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-1 ng iba't ibang subtype, kabilang ang HIV-1 group O: reference panel QCS 42-28-327 - 03Р (GISC) (subtypes A, B, C) (maliban sa sample No. 24 na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-2), 1st international reference panel anti-HIV (NIBSC Code: 02/210) (subtypes A, B, C, E) (maliban sa sample No. 5, na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-2), mga sample ng blood serum (plasma) na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-1 group O (No. 1342, K00175, K00259; BioMex). Ang mga resulta ay nagpapahiwatig ng posibilidad ng pag-aaral ng mga sample ng blood serum (plasma) na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-1 na kabilang sa iba't ibang mga subtype, kabilang ang HIV-1 group O, sa pagsusulit na "DS-ELISA-HIV-AT-SROC".

Ang pagiging tiyak ng DS-ELISA-HIV-AT-SROC reagent kit ay natukoy sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga sample ng serum ng dugo ng donor (n=352), na nagpakita ng negatibong resulta sa ELISA. Ang pagtitiyak ay 100%. Bukod pa rito, 255 blood serum sample (negatibo sa ELISA) ang nasubok:

■ 167 blood serum sample mula sa mga buntis na kababaihan at mga pasyenteng may mga nakakahawang sakit;

■ 128 blood serum sample mula sa mga pasyenteng may iba't ibang sakit na hindi nakakahawa.

Ang pagtitiyak ay 100%.

Ang data na nakuha ay nagpapakita ng mataas na kahusayan ng binuo na sistema ng pagsubok na "DS-ELISA-HIV-AT-SROC" sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa suwero (plasma) dugo ng tao.

1. Isang enzyme-linked immunosorbent test system para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa serum ng dugo ng tao (plasma), na nailalarawan sa katotohanan na kasama nito isang immunosorbent batay sa mga virus antigens human immunodeficiency type 1 (env HIV-1 at HIV-1 group O), sample dilution solution (SDS) at detection reagents, na conjugates, chromogen/substrate.

2. Isang paraan para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), kabilang ang HIV-1 group O, sa human blood serum (plasma), batay sa iba't ibang nilalaman ng antibody depende sa timing ng impeksyon, kabilang ang paghihiwalay ng sample ng pagsubok sa dalawang bahagi at pagtunaw ng isa sa mga ito; pagsusuri ng parehong (katutubo at diluted) na bahagi ng sample ng blood serum ng pasyente gamit ang enzyme-linked immunosorbent test system na inilarawan sa talata 1; pagpapasiya ng optical density (OD) ng mga native at diluted sample at RRS; pagkalkula ng average na halaga ng OP RRS; pagkalkula ng porsyentong pagbaba sa OD ng isang diluted sample na may kaugnayan sa isang undiluted gamit ang formula
% drop O P = 100% − O P reconnaissance ng sample − O P s r. R R S O P BUONG SAMPLE × 100% ,
sa kasong ito, ang posibleng panahon ng impeksyon ay itinuturing na "maaga" kung ang pagbaba sa OD ay >40%, at bilang "huli" kung ang pagbaba sa OD ay ≤40%.

Mga katulad na patent:

Ang imbensyon ay nauugnay sa isang paraan ng kompyuter na gumagamit ng mga biochemical database sa pagbuo ng mga bagong compound ng protina. Ang disenyo ay isinasagawa ng operator gamit ang isang espesyal na nakasulat na programa ng PROTCOM batay sa paggamit ng isang database ng mga pentafragment ng protina.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at may kinalaman sa isang pamamaraan para sa pagtukoy ng mga O-glycosylated na protina sa mga cell homogenates na inihanda para sa proteomic at phosphoproteomic analysis.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at immunology. Isang monoclonal antibody at antigen-binding na mga bahagi nito ay ibinigay na partikular na nagbubuklod sa C-terminal o gitnang rehiyon ng macrophage migration inhibitory factor (MIF).

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng molecular biology at mga medikal na diagnostic. Ang isang paraan para sa pag-detect ng mga protina sa amyloid state ay iminungkahi, kung saan ang isang sample ng lysate ng isang yeast culture o mammalian tissue ay nakuha, isang ionic detergent ay idinagdag sa sample, ang mga protina sa amyloid form ay puro sa isang cellulose acetate membrane. at sila ay nakita gamit ang mga aptamer, ang kanilang mga conjugates o antibodies na tiyak sa amyloid na anyo ng mga protina .

Ang imbensyon ay nauugnay sa biotechnology, partikular sa enzyme-linked immunosorbent assays, at isang paraan para sa pagkuha ng incorporated control sample para sa enzyme-linked immunosorbent test system para sa pagtukoy ng mga impeksyon ng TORCH group.

Ang imbensyon ay nauugnay sa gamot, lalo na sa ginekolohiya, at maaaring gamitin para sa indibidwal na pagpili ng mga gamot na naglalaman ng probiotic strains ng lactobacilli para sa epektibong intravaginal therapy.

Ang pangkat ng mga imbensyon ay nauugnay sa komposisyon ng reagent ng sensor-analyzer na inangkop upang tumulong sa pagtukoy ng konsentrasyon ng isang analyte sa isang sample ng likido, sa mga pamamaraan para sa pagtukoy ng konsentrasyon ng isang analyte sa isang sample ng likido, at sa isang paraan ng paglalapat ng sensor ng analyzer komposisyon ng reagent sa isang substrate sa pamamagitan ng screen printing.

Ang pangkat ng mga imbensyon ay nauugnay sa beterinaryo na gamot at may kinalaman sa mga adjuvant na komposisyon na naglalaman ng kumbinasyon ng Quil A o ang purified fraction nito, cholesterol, dimethyldioctadecylammonium bromide (DDA), polyacrylic acid (CARBOPOL) at CpG at/o N-(2-deoxy-2-). L-leucylamino- β-D-glucopyranosyl)-N-octadecyldodecanamide acetate; isang paraan para sa paghahanda ng mga naturang adjuvant na komposisyon at ang paggamit ng mga naturang adjuvant na komposisyon sa immunogenic at mga komposisyon ng bakuna na may iba't ibang antigens.

Ang kasalukuyang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at medisina. Ang isang paraan ay iminungkahi para sa paglikha ng isang antibody at ang mga functional na fragment nito na nakadirekta laban sa isang tumor antigen na ipinahayag sa ibabaw ng isang tumor na lumalaban sa hindi bababa sa isang antitumor compound, batay sa paggamit para sa pagbabakuna ng isang durog na homogenate at/o suspensyon at/o cell lysate na nagmumula sa naturang mga tumor. Tinalakay din ang paggamit ng pamamaraan ayon sa imbensyon para sa paggawa ng mga monoclonal antibodies at ang kanilang mga functional fragment, monoclonal antibodies na nakuha sa pamamaraang ito, ang mga nucleic acid na naka-encode sa kanila, isang expression vector, isang host cell at isang paraan para sa paggawa ng mga antibodies gamit ang kanila, pati na rin ang mga hybridoma na may kakayahang itago ang mga antibodies na ito, ang paggamit ng mga antibodies at ang kanilang mga functional na fragment para sa paggawa ng mga gamot, komposisyon ng antitumor at paggamit nito bilang isang gamot. Ang imbensyon na ito ay maaaring makahanap ng karagdagang aplikasyon sa paggamot ng mga lumalaban na tumor. 16 n. at 26 na suweldo f-ly, 7 ill., 4 pr., 6 tab.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at medisina. Isang enzyme-linked immunosorbent test system para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1, kabilang ang HIV-1 group O, sa serum ng dugo ng tao. Ang sistema ng pagsubok ay may kasamang immunosorbent batay sa human immunodeficiency virus type 1 antigens, isang solusyon para sa pagtunaw ng mga sample at detection reagents. Ang imbensyon ay nauugnay din sa isang paraan para sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1, kabilang ang HIV-1 group O, sa serum ng dugo ng tao sa pamamagitan ng pagsusuri sa blood serum ng pasyente gamit ang inilarawang enzyme-linked immunosorbent test system. Ginagawang posible ng imbensyon na mabilis at madaling matukoy ang posibleng tiyempo ng impeksyon sa HIV. 2 n.p. mga file, 4 na talahanayan, 2 pr.

Mga keyword

MAAGANG HIV INFECTION / LONG-TERM HIV INFECTION / DIFFERENTIATION NG MAAGANG HIV INFECTION / MALAYO NG HIV INFECTION / HIV-1 Abstract ng isang siyentipikong artikulo sa pangunahing gamot, may-akda ng gawaing pang-agham - Yulia Evgenievna Zagryadskaya, Dmitry Aleksandrovich Neshumaev, Yulia Aleksandrovna Kokotyukha, Elena Maratovna Meirmanova, Igor Alekseevich Olkhovsky

Ang epidemiological na sitwasyon tungkol sa impeksyon sa HIV sa Russian Federation ay nananatiling lubhang tense, na nangangailangan ng paghahanap para sa bago, mas epektibo at cost-effective na solusyon na naglalayong labanan ang epidemya. Ang pagsasama ng mga pag-aaral sa laboratoryo gamit ang isang sistema ng pagsubok upang matukoy ang tagal ng impeksyon sa HIV sa nakagawiang pagsasanay ng epidemiological surveillance ay magiging posible upang matukoy ang dalas ng mga maagang kaso ng impeksyon sa mga bagong natukoy na indibidwal na positibo sa HIV. Ang pagsusuri sa pamantayang ito sa antas ng populasyon ay makakatulong upang masuri ang pagiging epektibo ng mga hakbang sa pag-iwas at anti-epidemya na isinasagawa sa isang partikular na teritoryo. Ang pagtaas ng objectivity sa pagtukoy sa oras na lumipas mula noong impeksyon ng HIV-1 gamit ang DS-ELISA-HIV-AT-SROC test system ay nagbibigay ng pagkakataong gamitin ang mga resultang nakuha sa epidemiological investigation para sa layunin ng mas tumpak at kumpletong pagtuklas mga contact person. Ang pagtukoy sa posibleng tagal ng impeksyon ay maaari ding kailanganin kapag nagpapasya sa reseta ng antiretroviral therapy, bilang karagdagang pag-aaral kapag sinusubaybayan ang paglaban sa gamot sa HIV. Ang layunin ng gawaing ito ay upang matukoy ang pagiging epektibo ng bagong sistema ng pagsubok na DS-ELISA-HIV-AT-SROC para sa pagtatatag ng posibleng timing ng impeksyon sa HIV-1. Sinuri ang mga sample ng blood serum (plasma) ng mga indibidwal na nahawaan ng HIV na may epidemiologically established period of infection (n = 281) at mga sample ng commercial seroconversion panels. Ang mga resulta ng pag-aaral ay nagpakita na ang posibilidad ng wastong pagtukoy sa tagal ng impeksyon sa HIV-1 para sa mga sample mula sa mga indibidwal na may pinaka-malamang na petsa ng itinatag na impeksiyon ay 95%, para sa mga sample mula sa mga komersyal na seroconversion panel na 100%. Ang data na nakuha ay nagpakita ng mataas na kahusayan ng DS-ELISA-HIV-AT-SROC na sistema ng pagsubok sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1, na, kasama ang bilis at pagiging simple ng pamamaraan, ay nagbibigay-daan sa amin na magrekomenda ito para gamitin sa laboratory practice.

Mga katulad na paksa ng gawaing pang-agham sa pangunahing gamot, ang may-akda ng gawaing pang-agham ay si Yulia Evgenievna Zagryadskaya, Dmitry Aleksandrovich Neshumaev, Yulia Aleksandrovna Kokotyukha, Elena Maratovna Meirmanova, Igor Alekseevich Olkhovsky

Mga katangian ng diagnostic ng isang napaka-sensitibong sistema ng pagsusuri sa immunoenzyme para sa pag-detect ng impeksyon sa HIV
2014 / Trokhimchuk T. Yu., Serdyuk V. G., Ganova L. A., Gorlov Yu. I., Mikhalap Yu. I., Spivak N. Ya.
Mga modernong molecular genetic na pamamaraan ng pananaliksik sa epidemiological surveillance ng HIV infection
2014 / Zaitseva Natalya Nikolaevna, Efimov Evgeny Igorevich, Nosov Nikolay Nikolaevich, Parfenova Olga Vladimirovna, Peksheva Olga Yuryevna
Ang mga modernong molecular genetic na pamamaraan ng pananaliksik sa pagkilala sa HIV-1 na mga paghihiwalay mula sa mga nahawaang pasyente sa mga institusyong penitentiary
2015 / Zaitseva Natalya Nikolaevna, Peksheva Olga Yurievna, Parfenova Olga Vladimirovna, Butina Tatyana Yurievna, Kuznetsova Irina Vasilievna
Diagnosis ng impeksyon sa HIV sa mga bata sa mga unang buwan ng buhay na ipinanganak ng mga ina na nahawaan ng HIV
2012 / Bogoslovskaya Elena Vladimirovna, Shipulin G. A.
Pagtatasa sa kaligtasan ng naibigay na dugo kapag nagpapatupad ng mga hakbang upang maiwasan ang nosocomial transmission ng HIV infection sa panahon ng pagsasalin ng dugo
2017 / Sandyreva T.P., Podymova A.S., Kukarkina V.A., Popkova N.G., Nozhkina N.V.
Ang impeksyon sa HIV ay isang hamon sa sangkatauhan. Mayroon bang anumang mga pagkakataon upang malampasan ang sakit?
2012 / Uryvaev L.V., Bobkova M.R., Lapovok I.A.
Mga tampok ng pagpapakita ng impeksyon sa HIV sa oral cavity
2017 / Polyanskaya Larisa Nikolaevna
Human immunodeficiency virus at mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik sa mga mahihinang populasyon sa Kazakhstan
2015 / Trumova Zh.Z., Akyshbaeva Kulbarshin Sabyrovna, Dzhumabaeva S.M.
Mga tampok ng maagang neurosyphilis sa mga pasyenteng nahawaan ng HIV
2018 / Shprakh Vladimir Viktorovich, Kostina Ulyana Sergeevna
Natural na kurso ng impeksyon sa HIV sa mga bata, na isinasaalang-alang ang ruta ng impeksyon
2014 / Denisenko Valentin Borisovich, Simovanyan E.N.

Pagtatasa ng bagong "DS-EIA-HIV-AB-TERM" assay upang matukoy ang posibleng oras ng impeksyon sa human immunodeficiency virus-1 (HIV-1)

Ang epidemiological na sitwasyon para sa impeksyon sa HIV sa Russia ay nananatiling lubhang mahigpit, na nangangailangan ng paghahanap para sa bago, mas mahusay at cost-effective na solusyon na naglalayong labanan ang epidemya. Ang pagsasama ng mga pag-aaral sa laboratoryo sa paggamit ng isang sistema ng pagsubok para sa pagtukoy ng liblib ng impeksyon sa HIV sa mga nakagawiang gawi sa pagsubaybay ay magbibigay-daan upang matukoy ang dalas ng paglitaw ng mga maagang kaso ng impeksyon sa mga bagong diagnosed na HIV-positive na tao. Ang pagsusuri ng pamantayang ito sa antas ng populasyon ay makakatulong upang masuri ang pagiging epektibo ng pag-iwas, mga aktibidad sa pagkontrol na isinasagawa sa isang partikular na lugar. Ang pagtaas ng objectivity sa pagtukoy ng oras na lumipas mula sa sandali ng impeksyon ng HIV-1 sa paggamit ng sistema ng pagsubok na DSEIA-HIV-Ab-TERM ay nagbibigay ng pagkakataon na gamitin ang mga nakuhang resulta sa epidemiological investigation para sa layunin ng mas tumpak at kumpletong pagkakakilanlan ng mga contact person. Ang pagpapasiya ng posibleng panahon ng impeksyon ay maaari ding kailanganin sa paglutas ng tanong sa pagrereseta ng antiretroviral therapy bilang isang komplementaryong pag-aaral sa pagsubaybay sa HIV drug resistance. Ang layunin ng gawaing ito ay upang matukoy ang pagiging epektibo ng bagong sistema ng pagsubok na DS-EIAHIV-Ab-TERM para sa pagpapasiya ng malamang na tiyempo ng impeksyon sa HIV-1. May mga pinag-aralan na serum sample (plasma) ng dugo ng mga taong nahawaan ng HIV na may epidemiologically established time of infection (n = 281) at mga sample ng commercial seroconversion panels. Ang mga resulta ng isinagawang pag-aaral ay nagpakita na ang posibilidad ng isang tamang pagtuklas ng malayuan ng HIV-1 na impeksyon para sa mga sample mula sa mga indibidwal na may pinaka-malamang na oras ng itinatag na katotohanan ng impeksiyon ay 95%, para sa mga sample ng komersyal na seroconversion panel 100%. Ipinakita ng data ang mataas na bisa ng sistema ng pagsubok na DS-"EIAHIV-Ab-TERM" sa pagtukoy ng pinaka-malamang na tiyempo ng impeksyon na may human immunodeficiency virus type 1, na kasama ang bilis at pagiging simple ng pamamaraan ay nagbibigay-daan upang magrekomenda. ito para magamit sa pagsasanay sa laboratoryo.

Ang teksto ng gawaing pang-agham sa paksang "Pagsusuri ng bagong sistema ng pagsubok ds-ifa-vich-at-srok para sa pagtukoy ng malamang na timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1)"

UDC 616.98:578.828.6]-092:612.017.1.064]-078

Zagryadskaya Yu.E.1, Neshumaev D.A.2, Kokotyukha Yu.A.2, Meirmanova E.M.2, Olkhovsky I.A.3, Puzyrev V.F.1, Burkov AN.1, Ulanova T.I.1

pagsusuri ng bagong sistema ng pagsubok na ds-ifa-vich-at-srok upang matukoy ang posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1)

1OOO NPO Diagnostic Systems, 603093, Nizhny Novgorod; 2Krasnoyarsk Regional Center for Prevention and Control of AIDS, 660049, Krasnoyarsk; 3FGBU "Hematological Research Center ng Ministry of Health ng Russia" (Sangay ng Krasnoyarsk), Krasnoyarsk

Ang layunin ng gawaing ito ay upang matukoy ang pagiging epektibo ng bagong sistema ng pagsubok na DS-ELISA-HIV-AT-SROC para sa pagtatatag ng posibleng timing ng impeksyon sa HIV-1.

Ang mga sample ng blood serum (plasma) ng mga indibidwal na nahawaan ng HIV na may epidemiologically established period of infection (n = 281) at mga sample ng commercial seroconversion panels ay pinag-aralan. Ang mga resulta ng pag-aaral ay nagpakita na ang posibilidad ng wastong pagtukoy sa tagal ng impeksyon sa HIV-1 para sa mga sample mula sa mga indibidwal na may pinakamalamang na panahon ng itinatag na impeksiyon ay 95%, para sa mga sample mula sa mga komersyal na seroconversion panel - 100%. Ang data na nakuha ay nagpakita ng mataas na kahusayan ng DS-ELISA-HIV-AT-SROC na sistema ng pagsubok sa pagtukoy ng posibleng timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1, na, kasama ang bilis at pagiging simple ng pamamaraan, ay nagbibigay-daan sa amin na magrekomenda ito para gamitin sa laboratory practice.

Mga pangunahing salita: maagang impeksyon sa HIV; pangmatagalang impeksyon sa HIV; pagkita ng kaibhan ng maagang impeksyon sa HIV; tagal ng impeksyon sa HIV; HIV-1.

Para sa pagsipi: Epidemiology at mga nakakahawang sakit. 2015; 20 (3): 23-27. Zagryadskaya Yu.E.1, Neshumaev D. A2, Kokotyukha Yu.A.2, Meyrmanova E.M.2, Olkhovskiy I.A.3, Puzyrev V.F.1, Burkov A.N.1, Ulanova T.I."\ PAGTATAYA NG BAGONG "DS-EIA- HIV- AB-TERM" ASSAY UPANG MATIYAK ANG PROBABLE TIME NG IMPECTION MAY HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS -1 (HIV-1)

JNPO "Diagnostic Systems", 22, Yablonevaya Str. , Nizhniy Novgorod, Russian Federation, 603093

2Krasnoyarsk Regional Center of AIDS Prevention, 45, Karla Marksa Str., Krasnoyarsk, Russian Federation, 660049

3Hematological Scientific Center (Sangay ng Krasnoyarsk), 50, Akademgorodok, Krasnoyarsk, Russian Federation, 660036

Ang epidemiological na sitwasyon para sa impeksyon sa HIV sa Russia ay nananatiling lubhang mahigpit, -na nangangailangan ng paghahanap para sa bago, mas mahusay at cost-effective na solusyon na naglalayong labanan ang epidemya. Ang pagsasama ng mga pag-aaral sa laboratoryo sa paggamit ng isang sistema ng pagsubok para sa pagtukoy ng liblib

ng impeksyon sa HIV sa mga nakagawiang gawi sa pagsubaybay ay magpapahintulot na matukoy ang dalas ng paglitaw ng mga maagang kaso ng impeksyon sa mga bagong diagnosed na HIV-positive na tao. Ang pagsusuri ng pamantayang ito sa antas ng populasyon ay makakatulong upang masuri ang pagiging epektibo ng pag-iwas, mga aktibidad sa pagkontrol na isinasagawa sa isang partikular na lugar. Ang pagtaas ng objectivity sa pagpapasiya ng oras na lumipas mula sa sandali ng impeksyon ng HIV-1 sa paggamit ng sistema ng pagsubok na DS-EIA-HIV-Ab-TERMnagbibigay ng pagkakataong gamitin ang mga nakuhang resulta sa epidemiological investigation para sa layunin ng mas tumpak at kumpletong pagkakakilanlan ng mga contact person. Ang pagpapasiya ng posibleng panahon ng impeksyon ay maaari ding kailanganin sa paglutas ng tanong sa pagrereseta ng antiretroviral therapy bilang isang komplementaryong pag-aaral sa pagsubaybay sa HIV drug resistance. Ang layunin ng gawaing ito ay upang matukoy ang pagiging epektibo ng bagong sistema ng pagsubok na DS-EIA-HIV-Ab-TERM para sa pagpapasiya ng tiyempo na malamang ng impeksyon sa HIV-1. May mga pinag-aralan na serum sample (plasma) ng dugo ng mga taong nahawaan ng HIV na may epidemiologically established time of infection (n = 281) at mga sample ng commercial seroconversion panels. Ang mga resulta ng isinagawang pag-aaral ay nagpakita na ang posibilidad ng isang tamang pagtuklas ng remoteness ng HIV-1 na impeksyon para sa mga sample mula sa mga indibidwal na may pinaka-malamang na oras ng itinatag na katotohanan ng impeksiyon ay 95%, para sa mga sample ng komersyal na seroconversion panel - 100%. Ipinakita ng data ang mataas na bisa ng sistema ng pagsubok na DS-"EIA-HIV-Ab-TERM" sa pagtukoy ng pinakamalamang na timing ng impeksyon sa human immunodeficiency virus type 1, na kasama ang bilis at pagiging simple ng pamamaraan ay nagbibigay-daan. upang irekomenda ito para magamit sa pagsasanay sa laboratoryo.

Mga pangunahing salita: maagang impeksyon sa HIV; pangmatagalang impeksyon sa HIV; pagkita ng kaibhan ng maagang impeksyon sa HIV; malayuan ng impeksyon sa HIV; HIV-1.

Sipi: Epidemiologiya at Infektsionnye Bolezni. 2015; 20(3): 23-27. (Sa Russia.)

Para sa sulat: Yulia Evgenievna Zagryadskaya, e-mail: [email protected]

Nananatili ang pagkalat ng impeksyon ng human immunodeficiency virus (HIV). aktwal na problema sa modernong mundo. Ang epidemiological surveillance system, kabilang ang mga diagnostic sa laboratoryo, paggamot at mga hakbang sa pag-iwas na may malawak na saklaw ng populasyon, ay ang pangunahing paraan ng paglaban sa impeksyon sa HIV.

Ang karaniwang algorithm para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV, na pinagtibay sa Russian Federation, at mga magagamit na teknolohiya sa laboratoryo ay hindi nagpapahintulot sa amin na matukoy ang posibleng panahon ng impeksyon sa HIV. Gayunpaman, ang pagtukoy sa mga tunay na kaso ng maagang impeksyon sa HIV ay maaaring maging isang kapaki-pakinabang na panukala upang umakma sa mga pangunahing epidemiological parameter tulad ng insidente o pagkalat. Ang tagapagpahiwatig na ito ay magbibigay-daan sa amin upang masuri ang bilis ng pag-unlad ng epidemya nang mas tumpak at mabilis kumpara sa mga pangkalahatang tinatanggap na tagapagpahiwatig. Ang data na nakuha ay maaaring isaalang-alang bilang isang pamantayan para sa pagtukoy ng pagiging epektibo ng mga hakbang sa pag-iwas at anti-epidemya na isinasagawa sa isang partikular na teritoryo. Upang masuri ang dynamics ng nakakahawang proseso, kinakailangang malaman hindi ang kabuuang bilang ng mga nahawaang pasyente (o mga tagapagpahiwatig ng paglaganap ng impeksyon at ang paglaganap ng populasyon), ngunit sa halip ang bilang ng mga bagong nahawaang indibidwal sa isang tiyak panahon. Mula sa gawain nina J. Eaton at T. Hallett, alam na ang dinamika ng mga insidente ay hindi nauugnay sa paglaganap ng impeksyon sa HIV sa populasyon.

Bilang karagdagan, ang layunin ng impormasyon tungkol sa posibleng tagal ng impeksyon ay tiyak na makakapagbigay ng makabuluhang tulong sa epidemiological na pagsisiyasat ng mga ruta ng impeksyon at napapanahong pagkakakilanlan ng maximum na bilang ng mga contact person. Ipinakita na kalahati ng lahat ng kaso ng impeksyon sa HIV ay nangyayari mula sa mga taong maagang yugto impeksyon, na sumusuporta sa diskarte maagang paggamit antiretroviral therapy.

Kasabay nito, ang molecular genetic monitoring sa epidemiological surveillance system, na dinagdagan ng pananaliksik sa tagal ng impeksyon, ay maaaring magpapahintulot sa atin na lumipat mula sa antas ng phylogenetic analysis ng mga subtype at lumalaban na strain ng HIV hanggang sa antas ng phylodynamic studies.

Sa nakalipas na ilang taon, ang mga serbisyo sa laboratoryo sa ibang bansa ay nagawang masuri ang saklaw ng mga bagong kaso ng impeksyon (incidence). Ang mga pagsusuri ay binuo at patuloy na pinagbubuti upang makilala ang pagkakaiba ng maagang impeksyon sa HIV. Ang mga koleksyon ng mga biological sample ay naitatag upang suriin ang mga naturang pagsubok, at ang mga koleksyon na ito ay patuloy na pinalawak.

Kaugnay ng nasa itaas, ang pagbuo at paggamit ng domestic test equipment sa gawain ng AIDS centers

Ang mga sistema na nagpapahintulot sa pagkakaiba-iba ng maagang impeksyon sa HIV ay magkakaroon ng mga positibong epekto sa ekonomiya at praktikal. Ang paggamit ng binuo na pagsubok sa klinikal na kasanayan ay maaaring maging kapaki-pakinabang na mapagkukunan impormasyon at isang layunin na pamantayan para sa pagtatasa ng pagiging epektibo ng pagpapatupad ng mga programang pangkalusugan ng estado at rehiyon sa bahagi ng pag-iwas, pagsusuri at paggamot ng impeksyon sa HIV.

Ang layunin ng pag-aaral ay suriin ang pagiging epektibo ng binuong sistema ng pagsubok na DS-ELISA-HIV-AT-SROC para sa pagtatatag ng posibleng timing ng impeksyon sa HIV-1.

Mga materyales at pamamaraan

Ang gawain ay isinasagawa sa NPO Diagnostic Systems LLC (Nizhny Novgorod). Ang mga sample ng blood serum (plasma) mula sa mga indibidwal na nahawaan ng HIV na may epidemiologically established period of infection (n = 281; group M, subtype A) ay ibinigay ng Krasnoyarsk Regional Center for the Prevention and Control of AIDS (Krasnoyarsk). Ang posibleng tagal ng impeksyon ay natutukoy sa pamamagitan ng pagsusuri sa mga sample ng blood serum (plasma) mula sa mga pasyente na sumasailalim sa paulit-ulit na pagsusuri na may maikling pagitan ng oras (2-4 na linggo), ayon sa dinamika ng mga marker ng laboratoryo ng impeksyon sa HIV, na isinasaalang-alang ang kasaysayan ng epidemiological. at sa mga pasyenteng nahawaan ng HIV na sumasailalim sa klinikal na eksaminasyon.nagkabilang ng higit sa tatlong taon.

Kaayon, pinag-aralan ang mga sample ng 33 commercial seroconversion panel na ginawa ng Zeptometrix Corp. at SeraCare Life Sciences (USA) (grupo M, subtype B). Bilang karagdagan, ang posibilidad ng pag-aaral ng mga sample ng blood serum (plasma) na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-1 ng iba't ibang mga subtype, kabilang ang HIV-1 group O, ay nasuri sa pamamagitan ng mga sample ng pagsubok ng mga sumusunod na commercial panel: "Reference panel ng human blood sera na naglalaman at hindi naglalaman ng mga antibodies sa HIV type 1 (subtypes A, B, C) at type 2" (Avicenna Medical Center, Russia) (maliban sa sample No. 24 na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-2); 1st international anti-HIV reference panel (NIBSC Code: 02/210) (subtypes A, B, C, E) (maliban sa sample No. 5 na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-2); Anti-HIV Mixed Subtype Panel (MSP-HIV-001) (maliban sa mga sample No. 19, 20 na naglalaman ng antibodies sa HIV-2) at mga sample ng blood serum (plasma) na naglalaman ng antibodies sa HIV-1 group O (No. 1342, K00175 , K00259; BioMex).

Ang aktibong prinsipyo ng binuo na sistema ng pagsubok ay: recombinant antigens na katulad ng mga istrukturang protina HIV-1 gp160 (env) at gp41 (env) ng HIV-1 group O na ginawa ng NPO Diagnostic Systems LLC, na na-adsorbed sa mga piraso ng polystyrene collapsible tablet Ang mga conjugates ay mga recombinant na antigen na HIV-1 gp41 at HIV-1 na pangkat O, na may label na biotin, at streptavidin, na may label na malunggay peroxidase. Sa panahon ng pagbuo ng pagsubok, ang mga antigen ng HIV-1 ay pinili na mayroong

na may pinakamalaking diagnostic significance: gp160, na kinabibilangan ng immunodominant region ng gp41, at gp41 ng HIV-1 group O. Ang analysis scheme sa DS-ELISA-HIV-AT-SROC test system ay isang two-stage na "sandwich" bersyon ng isang enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) na may unti-unting pagpapakilala ng mga conjugates. Ang isang sistema para sa visual na pagtatasa ng pagpapakilala ng lahat ng mga bahagi at mga sample ay binuo. Ang oras ng reaksyon ay tumatagal ng mas mababa sa dalawang oras. Ang mga resulta ay naitala gamit ang isang spectrophotometer.

Ang agwat ng kumpiyansa ay tinasa para sa tamang pagpapasiya ng panahon ng impeksyon gamit ang sistema ng pagsubok sa posibilidad ng kumpiyansa na 95% gamit ang programang R. Herbert Confidence Interval Calculator.

resulta at diskusyon

Ang diskarte na ipinatupad sa sistema ng pagsubok ay batay sa pagbabago ng dami at husay na komposisyon ng mga antibodies sa sample depende sa tagal ng impeksyon. Kapag nag-aaral ng mga sample ng blood serum (plasma) gamit ang ELISA, ang optical density (OD) ng mga native at diluted na sample ay tinutukoy, na sumasalamin sa antas ng HIV-specific antibodies. Batay sa pagbabago sa OD ng sample sa dilution na may kaugnayan sa OD ng katutubong sample, alinman sa maagang impeksyon o pangmatagalang impeksyon sa HIV ay naitatag.

Ang mga isinagawang pag-aaral ay nagpakita ng mataas na kahusayan ng binuong sistema ng pagsubok na DS-ELISA-HIV-AT-SROC. Ang pagkakaroon ng sensitivity ng mga pagsubok sa ikatlong henerasyon para sa pag-detect ng mga antibodies sa HIV-1, wastong natukoy ng DS-ELISA-HIV-AT-SROC ang tagal ng impeksyon sa HIV-1 para sa lahat ng mga sample ng mga komersyal na seroconversion panel (Tables 1, 2).

Ang posibilidad ng wastong pagtukoy sa tagal ng impeksyon sa HIV-1 para sa mga sample na may epidemiologically itinatag na mga panahon ng impeksyon ay 95% (tingnan ang Talahanayan 2).

Mahalagang tandaan na ang immune response sa HIV ng isang random na indibidwal na pinili mula sa isang populasyon ay maaaring, sa ilang mga kaso, maging hyper- o hyper-

Talahanayan 1

Mga resulta ng pagsubok sa mga panel ng seroconversion sa DS-ELISA-HIV-AT-SROC

Seroconversion - Mga araw mula sa ika-1 Bilang ng mga positibong sample sa panel / kabuuang bilang ng mga sample sa panel Ang resulta ng pagsubok sa

blood sampling panel test para sa pagtukoy ng mga antibodies sa HIV-1/2, CE0483 DS-ELISA-HIV-AT-SROC DS-ELISA-HIV-AT-SROC

VV1 RYAV 914 31 5/5 5/5 Maagang impeksyon sa HIV-1

BB1 RYAV 916 35 2/6 2/6 Ganun din

BB1 RYAV 925 49 2/6 2/6"

BB1 RYAV 929 28 3/7 3/7"

BB1 RYAV 930 10 2/4 2/4"

BB1 RYAV 931 42 4/9 4/9"

BB1 RYAV 933 27 2/3 2/3 "

BB1 RYAV 934 11 3/3 3/3 "

BB1 RYAV 940 29 6/8 6/8"

BB1 RYAV 941 25 3/6 3/6"

BB1 RYAV 942 14 0/4 0/4"

BB1 RYAV 944 16 2/6 2/6"

BB1 RYAV 947 20 3/4 3/4"

BB1 RYAV 951 19 1/6 1/6"

BB1 RYAV 952 21 3/6 3/6"

BB1 RYAV 955 14 2/5 2/5"

BB1 RYAV 965 21 3/6 3/6 "

BB1 RYAV 966 51 3/10 3/10 "

BB1 RYAV 968 35 4/10 4/10 "

BB1 RYAV 969 77 3/10 3/10 "

ZMS NGU 6243 33 2/10 2/10 "

ZMS NGU 6247 30 1/10 1/10 "

ZMC NSU 9014 31 5/7 5/7"

ZMC NGU 9017 35 3/6 3/6 "

ZMC NSU 9018 33 2/11 2/11 "

ZMC NSU 9021 57 2/17 2/17 "

ZMC NSU 9022 29 1/9 1/9"

ZMC HIV 9030 54 1/16 1/16 "

ZMC HIV 9031 157 3/19 3/19 "

ZMC HIV 9032 55 7/14 7/14 "

ZMC HIV 9077 104 15/29 15/29 "

ZMC NSU 9079 95 15/25 15/25 "

ZMC HIV 12008 42 4/13 4/13 "

Ang kabuuang bilang ng mga positibong sample...

reaktibo. Ang distribusyon ng pangkalahatang populasyon ng mga katangian ng immune sa isang populasyon ay palaging naglalaman ng mga variant na hindi akma sa pagitan na itinuturing na normal. Para sa kadahilanang ito, ang pagtatatag ng posibleng oras ng impeksyon batay sa dinamika ng mga marker ng laboratoryo ng impeksyon sa HIV ay maaaring sa ilang mga kaso ay hindi tumpak. Ipinakita na para sa mga sample na may pinakamalamang na panahon ng naitatag na impeksyon hanggang sa 3 buwan, ang kawastuhan ng pagtukoy sa panahon ng impeksyon ay ganap na pare-pareho.

talahanayan 2

Katumpakan ng pagtukoy sa posibleng panahon ng impeksyon sa HIV-1 gamit ang DS-ELISA-HIV-AT-SROC

Numero Numero ay tama Katumpakan ng pagpapasiya ng DS-ELISA test

Mga Sample Isang pangkat ng mga sample na tinutukoy tungkol sa posibleng oras ng impeksyon

sa grupo ng mga sample sa HIV-1 group (sa 95% confidence level), %*

May epidemiological hanggang 3 buwan 81 81 100.00 (95.50-100.00)

nakatatag na - 3-6 na buwan 47 42 89.36 (77.41-95.37)

sa paglipas ng panahon

Impeksyon sa HIV-1 6-9 na buwan 22 17 77.27 (56.56-89.88)

hanggang 9 na buwan 150 140 93.33 (88.16-96.34)

9 na buwan o higit pa (Hindi alam ang antas ng CD4+) 79 76 96.20 (89.42-98.70)

9 na buwan o higit pa ( mababang antas CD4+ 52 51 98.08 (89.88-99.66)

(< 200 кл/мл)

9 na buwan at higit pa 131 127 96.95 (92.41-98.81)

Kabuuang resulta... 281 267 95,02 (91,81-97,01)

Seroconversion - Hanggang 157 araw 117 117 100 (96.82-100.00)

nal panel

Tandaan. * - kinakailangang isaalang-alang ang probabilistikong katangian ng panahon ng impeksyon na itinatag sa panahon ng pagsubok sa laboratoryo.

data na nakuha para sa mga sample na may tiyak na itinatag na panahon ng impeksyon sa HIV (ibig sabihin, para sa mga sample mula sa mga panel ng seroconversion), at 100%. Kapag sinusuri ang mga sample mula sa pangkat na "hanggang 9 na buwan", ang kasunduan sa pagitan ng mga resulta ng pagsubok at ang mga resulta ng paunang itinatag na mga petsa ng impeksyon ay 93.33%, para sa pangkat na "impeksiyon sa loob ng 9 na buwan" - 96.95%. Ang isa sa mga pangunahing dahilan para sa pagkuha ng mga maling resulta para sa grupong "impeksyon bago ang 9 na buwan" ay indibidwal na katangian immune response (mabilis na tugon). Para sa grupo ng mga taong nahawaan ng higit sa 9 na buwan, ang mga dahilan ay maaaring pareho ang mga katangian ng immune response (mabagal na pagtugon) at seroreversion (dahil sa paggamot o malalim na immunodeficiency sa mga huling yugto ng impeksyon sa HIV).

Kapag sinusuri ang mga komersyal na panel na "Reference panel ng human blood sera na naglalaman at hindi naglalaman ng mga antibodies sa HIV type 1 (subtypes A, B, C) at type 2", NIBSC Code: 02/210, MSP-HIV-001 at mga sample No. 1342 , K00175, K00259 na ibinigay ng BioMex, ang posibilidad ng pag-aaral ng mga sample ng plasma ng dugo na naglalaman ng mga antibodies sa HIV-1 ng iba't ibang mga subtype at HIV-1 group O sa DS-ELISA-HIV-AT-SROC ay nakumpirma.

Konklusyon

Ang data na nakuha ay nagpapahiwatig na ang binuo enzyme immunoassay test system ay ginagawang posible na makilala nang may mataas na posibilidad ang maagang seroconversion na panahon ng impeksyon sa HIV at ang susunod na panahon pagkatapos ng impeksiyon. Ang pagkakaroon ng pananaliksik sa tagal ng impeksyon ay nagbubukas ng posibilidad ng paggamit ng impormasyong nakuha hindi lamang sa antas ng populasyon, kundi pati na rin sa indibidwal na antas. Ang mataas na kahusayan ng DS-ELISA-HIV-AT-SROC test system, kasama ang bilis at pagiging simple ng pamamaraan, ay nagbibigay-daan sa muling pag-

inirerekomenda ito para gamitin sa epidemiological at clinical practice.

3. Bobkova M.R., Lapovok I.A. Mga pamamaraan sa laboratoryo differential diagnosis talamak, maaga at kasalukuyang impeksyon sa HIV (lektura). Mga diagnostic ng klinikal na laboratoryo. 2007; 12:25-32.

4. Neshumaev D.A., Ruzaeva L.A., Shevchenko N.M., Kokotyukha Yu.A., Boyko E.P., Elchininova N.A. at iba pa. Karanasan sa paggamit ng pagsusulit upang matukoy ang tagal ng impeksyon sa diagnostic algorithm ng HIV infection. Impeksyon at kaligtasan sa sakit. 2012; 2 (1-2): 420.

6. Neshumaev D.A., Tatyanina E.A., Malysheva M.A., Shevchenko N.M., Kokotyukha Yu.A., Meirmanova E.M. at iba pa.Karanasan ng magkasanib na paggamit ng phylogenetic analysis at pagpapasiya ng tagal ng impeksyon sa pagsisiyasat ng nosocomial infection na may HIV infection. Sa aklat: Mga Materyales ng VIII All-Russian na siyentipiko at praktikal na kumperensya na may internasyonal na pakikilahok na "Molecular diagnostics -2014". M.; 2014; tomo 1: 64-5.

7. Mga rekomendasyong pamamaraan MR 3.1.5.0075/1-13 “Epidemiology. Pag-iwas sa mga nakakahawang sakit. Mga impeksyon sa HIV. Pagsubaybay sa pagkalat ng mga strain ng HIV na lumalaban sa mga antiretroviral na gamot," inaprubahan. Rospotrebnadzor 08/20/2013 M.; 2013.

8. Lapovok I.A., Kazennova E.V., Kandrushin E.V., Bazhenov A.I., Godkov M.A., Olshansky A.Ya. atbp. Paghahambing na pagsusuri mga pamamaraan sa laboratoryo differential diagnosis ng maagang impeksyon sa HIV. Mga tanong ng virology. 2008; 5:46-9.

11. Murphy G., Parry J.V. Pagsusuri para sa pagtuklas ng mga kamakailang impeksyon na may uri 1 ng human immunodeficiency virus. Eurosurveillance. 2008; 13 (36-4): 4-10.

Natanggap noong 03/04/15

1. Methodological Guidelines ng Ministry of Health and Social development ng Russian Federation "Epidemiological Investigation of HIV Incidents and Implementation of Anti-epidemic Measures" No. 6963-РХ na may petsang 09/20/2007. Moscow; 2007. (sa Russian)

2. Mga Patnubay sa Pamamaraan ng Ministri ng Kalusugan at Pag-unlad ng Panlipunan ng Russian Federation "Mga Patnubay sa Pamamaraan sa Pagsusuri sa HIV" No. 5950-РХ na may petsang 08/06/2007. Moscow; 2007. (sa Russian)

3. Bobkova M.R., Lapovok I.A. Mga pamamaraan sa laboratoryo ng magkakaibang mga diagnostic ng talamak, kamakailan at kasalukuyang HIV (lektura). Klin-icheskaya laboratornaya diagnostika. 2007; 12:25-32. (sa Russian)

4. Neshumaev D.A., Ruzaeva L.A., Shevchenko N.M., Kokotyukha Y.A., Boyko E.P., El "chininova N.A. et al. Karanasan sa paggamit ng assay para sa pagtukoy ng termino ng impeksyon sa HIV diagnostic algorithm. Infektsiya i immuniet. 2012; 2 (2012; 2) 2): 490. (sa Russian)

5. Eaton J.W., Hallett T.B. Bakit hindi hinuhulaan ng proporsyon ng paghahatid sa maagang yugto ng impeksyon sa HIV ang pangmatagalang epekto ng paggamot sa insidente ng HIV. Proc. Natl. Acad. Sci. 2014; 111 (45): 16202-7.

6. Neshumaev D.A., Tat"yanina E.A., Malysheva M.A., Shevchenko N.M., Kokotyukha Y.A., Meyrmanova E.M. et al. Karanasan ng sabay-sabay na paggamit ng phylogenetic analysis at pagpapasiya ng termino ng impeksyon sa panloob na klinikal na pagsisiyasat ng mga impeksyon sa HIV. Sa: Magpatuloy VIII Russian Research/Practical Conference na may International Participation "Molecular Diagnostics - 2014: . Moscow; 2014; vol. 1:64-5. (sa Russian)

7. Mga patnubay sa pamamaraan MR 3.1.5.0075/1-13 "Epidemiology. Pag-iwas sa mga sakit sa impeksyon. Mga impeksyon sa HIV. Pagkontrol sa

pamamahagi ng mga strain ng HIV, lumalaban sa mga ahente ng antiretroviral", na inaprubahan ng Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare, 08/20/2013. Moscow; 2013. (sa Russian)

8. Lapovok I.A., Kazennova E.V., Kandrushin E.V., Bazhenov A.I., Godkov M.A., Ol'shanskiy A.Y. et al. Comparative analysis ng mga pamamaraan ng laboratoryo ng differential diagnostics ng kamakailang impeksyon sa HIV. Voprosy virusoloii. 2008; 46-95. (sa 46-95. Russian)

9. Hattori J., Shiino T., Gatanaga H., Yoshida S., Watanabe D., Minami R. et al. Mga uso sa naililipat na drug-resistant HIV-1 at mga demograpikong katangian ng mga bagong diagnosed na pasyente: Pagsubaybay sa buong bansa mula 2003 hanggang 2008 sa Japan. Antiviral Res. 2010; 88 (1): 72-9.

10. Kailan at paano gamitin ang mga pagsusuri para sa kamakailang impeksyon upang matantya ang saklaw ng HIV sa antas ng populasyon. UNAIDS/WHO Working Group on Global HIV/AIDS and STI Surveillance. WHO, 2011. Available sa: http://www.who.int/hiv/pub/surveillance/sti_surveillance/en/

11. Murphy G., Parry J.V Assay para sa pagtuklas ng mga kamakailang impeksyon na may uri ng human immunodeficiency virus 1. Eurosurveillance. 2008; 13 (36-4): 4-10.

12. Kassanjee R., Pilcher C., Keating S., Facente S., McKinney E., Price M. et al. Independyente sa mga pagsusuri sa insidente ng HIV ng kandidato sa mga specimen ng pagtatasa sa imbakan ng CEPHIA. AIDS. 2014; 28 (16): 2439-49.

13. Duong Y.T., Qiu M., De A.K., Jackson K., Dobbs T., Kim A.A. et al. Ang pagtuklas ng kamakailang impeksyon sa HIV-1 gamit ang isang bagong paglilimita-antigen avidity assay: potensyal para sa mga pagtatantya ng insidente ng HIV-1 at pag-aaral ng avidity maturation. PLoS One. 2012; 7(3):e33328.

14. Curtis K.A., Hanson D.L., Kennedy M.S., Owen S.M. Pagsusuri ng multiplex assay para sa pagtatantya ng saklaw ng HIV-1. PLoS One. 2013; 8(5):e64201.

15. Consortium para sa Pagsusuri at Pagganap ng HIV Incidence Assays (CEPHIA). Magagamit sa: http://www.incidence-estimation.org/cephiaqueries/cephiaDB/overview

Neshumaev Dmitry Aleksandrovich, Ph.D. honey. Mga Agham, Doktor ng Clinical Laboratory Diagnostics, Laboratory ng Bacteriological at Molecular Genetic Research, Regional AIDS Center; Kokotyukha Yulia Aleksandrovna, clinical laboratory diagnostics doctor sa laboratoryo ng enzyme immunoassay research ng Regional AIDS Center; Meirmanova Elena Maratovna, doktor ng clinical laboratory diagnostics, laboratoryo ng enzyme immunoassays, Regional AIDS Center; Olkhovsky Igor Alekseevich, Ph.D. honey. Sci., Direktor ng sangay ng Krasnoyarsk ng Federal State Budgetary Institution "Hematological Research Center ng Ministry of Health ng Russia"; Puzyrev Vladimir Fedorovich, Ph.D. biol. agham, simula dept. paggawa ng mga recombinant na antigen at conjugates ng NPO Diagnostic Systems LLC; Burkov Anatoly Nikolaevich, Doktor ng Medisina. Sciences, Prof., General Director ng NPO Diagnostic Systems LLC; Ulanova Tatyana Ivanovna, Doktor ng Biology. Sciences, Direktor para sa Pananaliksik, LLC "NPO "Diagnostic Systems"

Upang magsagawa ng komprehensibong pagtatasa ng kondisyon ng katawan, ginagamit ang ELISA diagnostic method. Ang pagsusuri sa dugo ng enzyme immunoassay ay inilaan para sa pag-diagnose ng mga nakakahawa, hematological, pangunahin at pangalawang immunodeficiencies.

Ano ang pagsusuri ng ELISA

Maraming mga pasyente ang interesado sa pamamaraan ng ELISA: kung ano ito, kung bakit isinasagawa ang pag-aaral. Ang mga enzyme immunoassay ay nagsimulang gamitin kamakailan. Sa una, ginamit ito upang pag-aralan ang mga istrukturang antigenic, at ito ay isinasagawa lamang para sa mga layuning pang-agham. Pagkatapos ang mga siyentipiko ay dumating sa konklusyon na sa tulong ng mga enzyme ay posible na makilala ang mga tiyak na antibodies na lumitaw bilang tugon sa isang patuloy na sakit.

Sa una, ang pamamaraan na ito ay ginamit lamang ng makitid na profile mga institusyong medikal, pangunahin sa mga istasyon ng pagsasalin ng dugo. Ang pamamaraang ELISA ay partikular na kahalagahan para sa pagtuklas ng impeksyon sa HIV.

Ngayon ang pamamaraang ito ay may malawak na hanay ng mga aplikasyon. Ginagamit ito ng mga modernong laboratoryo upang masuri:

mga bukol;
hormonal disorder;
mga impeksyon;
talamak o nakaraang mga nakakahawang proseso;
helminths.

Kung ang isang nakakahawang proseso ay nangyayari sa katawan, kung gayon ang ganitong uri ng diagnosis ay itinuturing na pinakamainam para sa pagtukoy ng uri ng sakit.

Ang kakanyahan ng pamamaraan at mga uri nito

Pamamaraan ng ELISA - ano ito, ano ang kakanyahan ng ganitong uri ng pananaliksik? Ito at maraming iba pang mga katanungan ay interesado sa mga pasyente. Ang batayan ng pamamaraang diagnostic na ito ay itinuturing na ang pagbubuklod ng mga immune cell ng katawan sa mga antigen ng mga nakakahawang ahente. Ang nagresultang kumplikado ay tinutukoy gamit ang isang espesyal na enzyme.

Upang maunawaan ang prinsipyo ng pamamaraan ng ELISA, kailangan mong malaman kung paano nangyayari ang reaksyon ng antigen-antibody. Ang antigen ay isang molekula ng protina na banyaga sa katawan na tumagos kasama ng impeksiyon. Ang mga particle ng dugo ng ibang tao na hindi tumutugma sa grupo ay itinuturing ding mga antigen. Sa katawan sila nagpupukaw immune reaksyon naglalayong protektahan laban sa mga banyagang sangkap. Samakatuwid, ang katawan ng tao ay gumagawa ng mga antibodies - mga immunoglobulin na maaaring ilakip sa mga antigen, na bumubuo ng isang immune complex. Ang ganitong mga compound ay mas madaling makilala at sirain ng mga immune cell.

Ang reaksyon sa pagkakaroon ng naturang mga immune complex ay isinasagawa sa mga kondisyon ng laboratoryo, gamit ang mga handa na compound upang matukoy kung may mga katulad sa dugo.

Ang kakanyahan ng pamamaraan ng ELISA ay medyo simple, gayunpaman, dahil sa ang katunayan na ang isang pagsusuri sa dugo ay isinasagawa upang makita ang maraming mga impeksyon at sakit, mayroong ilang mga uri nito. Nag-iiba ang bawat isa sa scheme at saklaw ng pagpapatupad nito. Maaaring direkta o hindi direktang ELISA. Ang direktang paraan ay nagpapahiwatig na ang mga immobilized antibodies ay ginagamit na tumutugon sa mga antigens. Ang pangunahing bentahe ng pamamaraang ito ay ang lahat ng mga proseso ay maaaring awtomatiko, na nangangahulugan na ang mga diagnostic ay tumatagal ng kaunting oras.

Ang hindi direktang paraan ay nagpapahiwatig na ang pangalawang antibodies ay ginagamit. At sa solid phase ang antigen ay hindi kumikilos. Ang pagsusuri ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang mga antibodies sa iba't ibang antigens. Nakakatulong ito upang makamit ang isang mas tumpak na resulta, ngunit ang pamamaraan ay kumplikado.

Mga benepisyo ng pag-aaral

Ang pamamaraan ng ELISA ay may maraming mga pakinabang sa iba pang mga pamamaraan ng diagnostic. Ang mga pangunahing ay kinabibilangan ng mga sumusunod:

mataas na sensitivity;
katatagan ng imbakan ng mga sangkap;
bilis ng mga diagnostic;
maaaring gamitin ang isang maliit na halaga ng materyal sa pagsubok;
posible na i-automate ang lahat ng mga proseso;
ang impeksyon ay maaaring matukoy sa pinakamaagang yugto.

Ang diagnostic na pamamaraan na ito ay pangkalahatan at samakatuwid ay angkop para sa mass examination. Sa tulong ng pagsusuri, posibleng masubaybayan ang dynamics ng nakakahawang proseso.

Mga indikasyon para sa pagsusuri at pagkolekta ng materyal

Ang isang pag-aaral gamit ang ELISA method ay maaaring magreseta kung maraming sakit ang pinaghihinalaang:

Ang venous blood ay sinusuri para sa pagkakaroon ng mga antibodies. Bago ang pagsusuri, ang mga elemento na maaaring makapagpalubha sa pag-aaral ay ihiwalay dito. Ang iba pang mga biological fluid ay maaari ding kolektahin.

Upang makuha ang pinakatumpak na impormasyon, ang sampling ng dugo ay isinasagawa sa isang walang laman na tiyan. Kung ang pamamaraan ay inireseta upang matukoy ang isang nakatagong impeksiyon, pagkatapos ay ilang linggo bago ang pagsubok dapat mong ihinto ang pagkuha ng antibacterial at mga gamot na antiviral. Depende sa kagamitan ng laboratoryo kung saan nakolekta ang materyal, ang resulta ay maaaring makuha sa loob ng 24 na oras. SA sa kaso ng emergency ang oras na ito ay nabawasan sa ilang oras.

Pagsubok para sa syphilis

Ang paggamit ng paraan ng ELISA ay nakakatulong na matukoy ang pagkakaroon ng maraming impeksyon sa katawan, lalo na ang syphilis. Upang maisagawa ang pag-aaral, ang dugo ay kinuha mula sa isang ugat sa isang walang laman na tiyan. Pagkatapos ay isinasagawa ang isang pag-aaral na tumutulong na matukoy hindi lamang ang pagkakaroon ng sakit sa katawan, kundi pati na rin ang eksaktong oras ng pagsisimula nito, dahil sa panahon ng sakit ang ilang mga antibodies ay pinalitan ng iba sa isang mahigpit na tinukoy na pagkakasunud-sunod.

Sa talamak na yugto, na nagpapahiwatig ng matagal na kurso ng sakit, o sa panahon ng paglala ng isang talamak na impeksiyon, ang mga uri ng M immunoglobulin ay matutukoy sa dugo. higit sa 4 na linggo. Ang mga immunoglobulin ng pangkat G ay nagpapahiwatig ng taas ng sakit o nakaraang therapy.

Ang intensity ng nakakahawang proseso ay tinasa ng antas ng kulay ng mga butas, dahil ang saturation nito ay nakasalalay sa bilang ng mga immune complex na nabuo.

Pagsusuri para sa impeksyon sa HIV

Ginagamit din ang pamamaraan ng ELISA para sa pagsusuri; sa kasong ito, mayroon itong ilang mga tampok na nauugnay sa kurso at pag-unlad ng sakit. Ang pamamaraan ng pananaliksik na ito ay itinuturing na pinaka-katanggap-tanggap para sa pagpapasiya, ngunit dapat itong isagawa nang hindi mas maaga kaysa sa isang buwan pagkatapos ng pagkakalantad sa mga kadahilanan ng panganib. Ito ay dahil sa pagkakaroon ng incubation period na tumatagal mula 45 araw hanggang 6 na buwan. Kaya naman kailangang ulitin ang pagsusuri pagkatapos ng anim na buwan.

ascariasis;
giardiasis;
toxoplasmosis, atbp.

Sa kabila ng lahat ng mga pakinabang, mayroon ding mga disadvantages ng pamamaraang ELISA. Ang pangunahing kawalan ay kapag nagsasagawa ng isang pag-aaral, ang doktor ay dapat magkaroon ng isang palagay tungkol sa sakit nang maaga.

Kung hindi posible na aksidenteng mahanap ang pathogen at matukoy ang mga katangian ng immunoenzyme nito. Ang pagsusuri ay nagpapahiwatig lamang ng pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ng pasyente. Bilang karagdagan, ito ay isang medyo mahal na pagsusuri.

Transcript ng pagsusuri

Ang resulta ng isang mataas na kalidad na ELISA ay ang pagkakaroon ng mga antibodies o ang kanilang kawalan sa dugo. Kung ang isang quantitative analysis ay isinasagawa, ang antibody concentration ay maaaring ipahayag alinman bilang isang digital na halaga o sa isang tiyak na bilang ng mga + sign.

Bilang karagdagan, ang mga tagapagpahiwatig tulad ng:

Ang tagapagpahiwatig ng IgM ay nagpapahiwatig ng paglitaw ng isang talamak na nakakahawang proseso sa katawan. Ang kumpletong kawalan nito ay maaaring magpahiwatig ng kawalan ng causative agent ng sakit o ang paglipat nito sa talamak na yugto.

Ang pagbabasa ng IgA na may negatibong resulta ng pagsusuri sa IgM ay nagpapahiwatig ng talamak o nakatagong impeksiyon. Ang sabay-sabay na presensya ng IgM at IgA ay nagpapahiwatig na ang sakit ay nasa talamak na yugto. Ang pagkakaroon ng IgG ay nagpapahiwatig ng paglipat ng sakit sa talamak na yugto o kumpletong pagbawi at pag-unlad ng kaligtasan sa sakit.

Ngayon ay may mga espesyal na pagsusulit sa ELISA na maaari mong gawin sa iyong sarili.