Reagenser for bestemmelse av blodgruppe. Metodikk for å bestemme indikatorer. Biologisk bestemt serum

Bestemmelse av blodgruppen med standard sera brukes ofte (sammenlignet med andre metoder). Denne teknikken er basert på agglutininer og agglutinogener som finnes i blodet i ulike kombinasjoner.

Kombinasjonen av agglutinogen og agglutinin med samme navn er ledsaget av en agglutinasjonsreaksjon (en homogen flekk brytes opp i flere små flekker bestående av erytrocytter klistret sammen).

Essensen av metoden

Ved gjengivelse medisinsk behandling det er ikke alltid mulig å raskt stoppe blødningen, transfusjon krever bestemmelse av blodtype, Rh faktor.

Det er 2 erytrocyttantigener (agglutinogener A og B) og 2 antistoffer (a og b). Ulike kombinasjoner av antigener og antistoffer danner 4 blodgrupper.

Denne metoden har fordeler, fordi den lar deg redusere mange målinger til én.

Metodikk for å bestemme indikatorer

Bestemmelse av blodgrupper i henhold til standard sera utføres ved bruk av reagenser som inneholder agglutininer ulike grupper som reagerer med agglutinogener på overflaten av røde blodlegemer.

For å bestemme blodgruppen er det nok å bruke standard sera kun II og III grupper. Imidlertid å utelukke mulige feil for tilleggskontroll brukes også resten (gruppe I og IV).

Serum produksjon

Standard sera for blodtypebestemmelse er hentet fra donert blod. For dette formålet brukes et spesielt system: plasma isoleres sammen med antistoffene i det, deretter fortynnes det med en isotonisk natriumkloridløsning.

Plasser 1 ml 0,9% NaCl-løsning i et reagensrør, tilsett plasma (1 ml), rist sammensetningen. Ta 1 ml av den resulterende blandingen, overfør den til et annet rør med isotonisk løsning.

Manipulasjonen gjentas inntil en fortynning av blandingen er oppnådd i forholdet 1:256. Andre fortynninger brukes ikke for å unngå feil.

For en studie med standard sera kreves 3 (2 serier for hver gruppe), med forskjellig farge:

jeg(0) - klar væske, flasken leveres med en hvit etikett;
II (A) - blå væske, flaske med 2 striper av blå farge;
III (B) - blekrosa væske, flaske med 3 rosa striper;
IV (AB) - gul væske, 4 gule striper på flaskeetiketten.

Etikettene indikerer:

titer;
best før dato;
Utgivelsesdato;
serienummer.
produsentens informasjon.

Utføre forskning

Temperaturen i rommet skal være innenfor + 15 ... + 25 ° C, god belysning er nødvendig.

Bruk en spesiell nettbrett med områder med merker. Hvert serum påføres det (2 prøver tas, 1 av dem er kontroll, 2 er for diagnostikk).

Deretter, ved siden av hver dråpe serum, plasseres en dråpe blod, blandet med hver individuelt reagerende løsning. Etter noen minutter (5-6) analyseres de oppnådde dataene:

hvis en agglutinasjonsreaksjon oppstår, anses serumtesten som positiv;
i fravær av agglutinasjon er testen negativ.

Forskningsresultater

Når positivt resultat erytrocytter holder seg sammen (røde blodpropper dannes i den reagerende løsningen).

Hvis fargen på løsningen ikke har endret seg, anses reaksjonen som negativ. Det er mønstre som avhenger av kombinasjoner av negative og positive reaksjoner som oppstår i løsninger:

I(0) hvis det ikke er noen positiv reaksjon i noen prøve;
II (A), hvis i prøve II (A) tilstanden ikke har endret seg, og i de andre 2 var det en positiv reaksjon;
III(B), med mindre reaksjonen i prøve III(B) var negativ;
IV(AB) hvis reaksjonen var positiv i hver av de 3 prøvene.

Utseendet til andre kombinasjoner er assosiert med feil som oppstår under studien.

Bruk av gamle reagenser eller feil analyse kan føre til en svak reaksjon. I slike tilfeller, for å avklare, er det nødvendig å gjøre tester med andre metoder.

I kontakt med

Blodgrupper i AB0-systemet

Blodgruppene i AB0-systemet ble oppdaget i 1900 av K. Landsteiner, som ved å blande erytrocyttene til noen individer med blodserumet til andre individer, fant ut at med noen kombinasjoner koagulerer blodet og danner flak (agglutinasjonsreaksjon), mens andre ikke. Basert på disse studiene delte Landsteiner blodet til alle mennesker inn i tre grupper: A, B og C. I 1907 ble en annen blodtype oppdaget.

Det ble funnet at agglutinasjonsreaksjonen oppstår når antigener fra en blodgruppe (de kalles agglutinogener) som er i rødt blodceller- erytrocytter med antistoffer fra en annen gruppe (de ble kalt agglutininer) lokalisert i plasma - den flytende delen av blodet. Inndelingen av blod i henhold til AB0-systemet i fire grupper er basert på at blodet kan inneholde antigener (agglutinogener) A og B, samt antistoffer (agglutininer) α (alfa eller anti-A) og β. (beta eller anti-B) .

Første blodgruppe - 0 (I)

Gruppe I - inneholder ikke agglutinogener (antigener), men inneholder agglutininer (antistoffer) α og β. Det er merket 0 (I). Siden denne gruppen ikke inneholder fremmede partikler (antigener), kan den overføres til alle mennesker. En person med denne blodtypen er en universell donor.

Andre blodtype A β (II)

Gruppe II inneholder agglutinogen (antigen) A og agglutinin β (antistoffer mot agglutinogen B). Derfor kan det bare transfunderes til de gruppene som ikke inneholder antigen B - disse er gruppe I og II.

Tredje blodtype Вα (III)

Gruppe III inneholder agglutinogen (antigen) B og agglutinin α (antistoffer mot agglutinogen A). Derfor kan det bare transfunderes til de gruppene som ikke inneholder antigen A - disse er gruppe I og III.

Fjerde blodtype AB0 (IV)

IV blodgruppe inneholder agglutinogener (antigener) A og B, men inneholder agglutininer (antistoffer). Derfor kan det bare gis blodoverføring til de som har samme fjerde blodtype. Men siden det ikke er noen antistoffer i blodet til slike mennesker som kan holde seg sammen med antistoffer introdusert fra utsiden, kan de transfuseres med blod fra en hvilken som helst gruppe. Personer med den fjerde blodgruppen er universelle mottakere.

Blodgrupper etter ABO-systemet

Metode for å bestemme blodgrupper

Blodgruppen i henhold til ABO-systemet bestemmes ved hjelp av agglutinasjonsreaksjonen. For tiden er det tre måter å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet:

I henhold til standard isohemagglutinerende sera;

Ved bruk av monoklonale antistoffer(zolikloner anti-A og anti-B).

Bestemmelse av blodgrupper ved standard isohemagglutinerende sera

Essensen av metoden er å oppdage i testblodet gruppe antigener A og B ved bruk av standard sera. For disse formål brukes agglutinasjonsreaksjonen. Testen bør gjøres i et rom med god belysning ved en temperatur på 15-25 ° C.

For å utføre testen trenger du: - Standard isohemagglutinerende sera av gruppe O (I), A (II), B (III) og AB (IV) i to forskjellige serier. Serum for å bestemme blodgrupper er laget av donert blod i spesielle laboratorier. Serum oppbevares i kjøleskap ved en temperatur på 4 - 8 ° C. Utløpsdatoen til serumet er angitt på etiketten. Etiketten angir også titeren (maksimal fortynning av serum der en agglutinasjonsreaksjon kan oppstå), som må være minst 1:32 (for serum B (III) - minst 1:16 / 32). Mysen skal være gjennomsiktig, uten tegn til forråtnelse. For enkelhets skyld er standard serum tonet i en bestemt farge: O (I) - fargeløs (grå), A (II) - blå, B (III) - rød, AB (IV) - lys gul. Disse fargene følger med alle etiketter på blodprodukter som har en gruppetilhørighet (blod, erytrocyttmasse, plasma, etc.).

Hvite porselens- eller emaljeplater eller andre fuktbare tallerkener, merket etter blodtype.

Isotonisk natriumkloridløsning.

Nåler, pipetter, glassstenger (glassglass).

Reaksjonsteknikk.

1. Under passende betegnelser for blodgruppen påføres serumet av I, II, III-gruppene på platen (platen) i et volum på 0,1 ml (en stor dråpe med en diameter på ca. 1 cm). For å unngå feil, påfør to serier med sera, siden en av seriene kan ha lav aktivitet og ikke gi en tydelig agglutinasjon. Dermed oppnås 6 dråper som danner to rader med tre dråper i følgende rekkefølge fra venstre til høyre: 0 (I), A (II), B (III).

2. Blod for forskning tas fra en finger eller fra en blodåre. Med en tørr glassstang overføres 6 dråper testblod omtrent på størrelse med et knappenålshode 0,01 ml (liten dråpe) sekvensielt til platen ved 6 punkter, hver ved siden av en dråpe standardserum. Dessuten bør mengden serum være 10 ganger høyere enn mengden blod som studeres. Deretter blandes de forsiktig med glassstaver med avrundede kanter.

En enklere teknikk er også mulig: en stor dråpe blod påføres platen, deretter tas den derfra med hjørnet av et glassglass og hver dråpe serum overføres, og blandes forsiktig med den siste. Samtidig, hver gang blodet tas med et rent hjørne av glasset, pass på at dråpene ikke blandes.

3. Etter å ha blandet dråpene, ristes platen med jevne mellomrom. Agglutinasjon begynner i løpet av de første 10-30 sekundene. Men observasjon bør utføres i minst 5 minutter, siden senere agglutinering er mulig, for eksempel med erytrocytter av gruppe A 2 (II).

4. I de dråpene der reaksjonen har skjedd, tilsett én dråpe isotonisk natriumkloridløsning, hvoretter reaksjonsresultatene vurderes.

Agglutinasjonsreaksjonen kan være positiv eller negativ.

Med en positiv reaksjon, i løpet av de første 10-30 sekundene, observeres små røde korn (agglutinater) som er synlige for det blotte øye, bestående av limte røde blodlegemer, i blandingen. Små korn smelter gradvis sammen til større korn eller til og med til uregelmessig formede flak. Ved en negativ reaksjon forblir dråpen jevn farget rød.

Resultatene av reaksjonene fra to serier i dråper med serum fra samme gruppe må samsvare.

Tilhørigheten av det studerte blodet til den tilsvarende gruppen bestemmes av tilstedeværelsen eller fraværet av agglutinasjon i reaksjonen med de tilsvarende sera.

Hvis alle sera ga en positiv reaksjon, inneholder testblodet både agglutinogener - A og B. Men i slike tilfeller, for å utelukke en uspesifikk agglutinasjonsreaksjon, en ekstra kontrollstudie av testblodet med standardserum av gruppe AB (IV) bør utføres.

Bestemmelse av blodgrupper med monoklonale antistoffer

For å bestemme blodgrupper på denne måten brukes monoklinale antistoffer, som oppnås ved bruk av hybridombioteknologi.

Et hybridom er en cellulær hybrid dannet ved fusjon av en benmargscelle (myelom) med en immunlymfocytt som syntetiserer spesifikke monoklonale antistoffer. Hybridomet har evnen til ubegrenset vekst, er karakteristisk for en tumorcelle og evnen til å syntetisere antistoffer som er iboende i en lymfocytt.

Standardreagenser-monoklonale antistoffer (MCA) er utviklet: anti-A- og anti-B-kolikloner som brukes til å bestemme erytrocyttagglutinogener. Zolikloner er rødt (anti-A) og blått (anti-B) lyofilisert pulver, som fortynnes med isotonisk natriumkloridløsning rett før testen.

Teknikk.

Anti-A- og anti-B-solikloner påføres en hvit tablett med én stor dråpe (0,1 ml) hver under passende etiketter: anti-A eller anti-B. Ved siden av dråpene med antistoffer bør en liten dråpe av testblodet påføres. Etter blanding av komponentene observeres agglutinasjonsreaksjonen i 2-3 minutter. Evaluering av resultatene er veldig enkel.

Bestemmelse av blodgruppering kan være ledsaget av feil som fører til feil tolkning av resultatene. Tre hovedgrupper av feil kan skilles: feil knyttet til lav kvalitet på reagenser; tekniske feil; feil knyttet til funksjoner Skjema for å evaluere resultatene av å bestemme blodgrupper ved bruk av monoklonale antistoffer (anti-A og anti-B zolikloner) av blodet som testes. De to første kan unngås ved å strengt følge kravene til serum, reaksjonsbetingelser osv. sine egne (autoagglutinering), og samtidig gir erytrocytter agglutinasjon med alle sera, også med gruppe AB-serum. Et lignende fenomen er beskrevet i en rekke sykdommer: blodsykdommer, splenomegali, levercirrhose, Smittsomme sykdommer Panagglutinasjon og autoagglutinasjon er også beskrevet hos friske mennesker.

Fenomenet panagglutinasjon og autoagglutinasjon observeres kun ved romtemperatur. Hvis bestemmelsen av gruppemedlemskap utføres ved en temperatur på 37 ° C, forsvinner de.

Det må huskes strengt at i alle tilfeller av uklare eller tvilsomme resultater, bør blodgruppene ombestemmes ved bruk av standard sera fra andre serier, så vel som på kryss og tvers.

I århundrer har forskere forsøkt å finne ut om Menneskekroppen så mye som mulig og lær å helbrede syke av enhver sykdom. En av viktige parametere er bestemmelse av blodgruppen ved kolikoner. Medisin skiller bare fire blodtyper hos mennesker, uavhengig av kjønn eller rase. Immunologiske egenskaper, som utgjør hovedforskjellen i gruppen av erytrocyttantigener, er arvet.

Hva er en tsoliklon

Bestemmelse av blodgruppen ved hjelp av ulike laboratoriereagenser standard metode undersøkelser. Informasjon om blodgruppen er ekstremt viktig, spesielt i tilfeller der en person trenger nødhjelp. Før Kirurgisk inngrep typen individuelle antigene egenskaper til en person bestemmes nødvendigvis. Den samme prosedyren er obligatorisk for militært personell (informasjon er angitt på skjemaet), for kvinner før fødsel, etc.

Tsoliklonami relativt sett ny metode undersøkelser. Denne analysen kan utføres på ethvert stadium av døgnbehandling av pasienter.

Det tar ikke mye tid å gjennomføre en laboratorieundersøkelse, det er nok å ha alt nødvendig kjemiske substanser(tsolikloner) og enkelt utstyr.

Tsoliklony er faktisk en av typene immunglobuliner (type M). Dette er monoklonale antistoffer som ble dannet ved hjelp av genteknologi. Tsoliklony oppnådd ved eksponering av serum til sterile laboratoriemus. Væske bygges opp i bukhulen gnager som inneholder disse antistoffene.

Forberedelse til prosedyren

Bestemmelse av blodgrupper ved hjelp av kolikoner krever førtrening og handlinger i henhold til den etablerte algoritmen. Situasjonen i rommet der analysen utføres spesifiseres separat. Lufttemperaturen bør ikke være lavere enn 15 og ikke høyere enn 25 grader, ellers kan ikke resultatet av studien anses som pålitelig. Rommet skal være fritt for støv, dyr, insekter og andre faktorer som fysisk kan påvirke forskningsprosessen. Holder også laboratorieanalyse krever god belysning.

Ved bruk av kolikloner er det viktig å holde hetteglassene tett forseglet og ikke la reagensene tørke ut, ellers kan antistoffenes evne til å handling synker merkbart. Før prosedyren er alt nødvendig utstyr forberedt. For analyse trenger du et biologisk prøverør, en reagenspåføringsplate, sterile pipetter og pinner for interaksjon med biologiske prøver.

Hvis laboratorieassistenten gjennomfører ikke bare laboratorieforskning, men også blodprøvetaking, er det nødvendig å klargjøre engangssprøyter eller vakuumreagensrør, tourniquet, medisinsk alkohol, Bomullsdotter og sterile våtservietter. Det bør også være verktøy for merking av pasientbiobilder.

Analyse

I moderne laboratoriediagnostikk brukes tre typer standard kolikloner for å bestemme blodgruppen og Rh-faktoren. Anti-A-reagensen er farget rød, og det samme er hetteglasset, hetten eller hetteglasset. Type "Anti-B" er farget blå, og "Anti-AB" er ikke merket med en farget markør. Reagensprodusenter produserer pakker med 5 eller 10 ml kolikoner. Ikke bruk skadede eller dårlige reagenser.

I nærvær av synlige emballasjedefekter eller utseende av flak i væsken, bruk ikke tsoliklon.

For bestemmelse påføres tsolikloner på en spesiallaget plate, som er utformet som et bord. forskjellige typer(A, B og AB). Hver av dem må være signert. Reagenset påføres et spesielt merket område. Hver type koliklon må påføres med en separat steril pipette.
Ved siden av reagensene legges 1 dråpe av pasientens blod.
Ved hjelp av en steril pinne blandes reagensene med den biologiske prøven.
Allerede etter noen sekunder kan du merke endringene og den pågående agglutinasjonsreaksjonen. I henhold til reglene skal observasjon utføres i 3 minutter. Etter det kan du trekke en konklusjon om resultatene av studien.

Hvordan forstå resultatet

Fraværet av noen agglutinasjonsreaksjon i alle prøver betyr at pasientens erytrocyttceller ikke inneholder den typen agglutinogen som er undersøkt. Blodprøven er tilordnet gruppe I (type 0).
Hvis pasientens erytrocyttceller har reagert med reagenser som "Anti-a" og "Anti-AB", så har pasienten II blodgruppe (type A).
Merkbar agglutinasjon av testblodprøven med kolikoner av typene "Anti-AB" og "Anti-B" betyr at pasienten har en III-blodgruppe (type B).
Hvis pasientens blod har reagert med alle kjemiske reagenser, tilhører testprøven gruppe IV (type AB). Ved bestemmelse av blodgruppen ved bruk av kolikoner er det ikke nødvendig med ytterligere verifisering, siden reagensene ikke inneholder tilsetningsstoffer som kan provosere en spontan reaksjon.

Bestemmelse av blodgruppe og Rh-faktor utføres i laboratorieanlegg i medisinske institusjoner. Dette er en ganske enkel studie som gir en svært nyttig og viktig viktig informasjon om et menneske.

Materialene er publisert for vurdering og er ikke reseptbelagte behandlinger! Vi anbefaler at du kontakter en hematolog ved ditt helseinstitusjon!

Blodtype og Rh-faktor er spesielle proteiner som bestemmer dens individuelle karakter, akkurat som fargen på en persons øyne eller hår. Gruppe og Rh har veldig viktig i medisin i behandling av blodtap, blodsykdommer, og påvirker også dannelsen av kroppen, funksjonen til organer, og til og med psykologiske trekk person.

Konseptet med blodgruppe

Selv eldgamle leger prøvde å kompensere for blodtap ved å overføre blod fra en person til en person og til og med fra dyr. Som regel hadde alle disse forsøkene et trist utfall. Og først på begynnelsen av det tjuende århundre oppdaget den østerrikske forskeren Karl Landsteiner forskjeller i blodtyper hos mennesker, som var spesielle proteiner i røde blodceller - agglutinogener, det vil si, forårsaker en reaksjon agglutinasjon - agglutinasjon av røde blodlegemer. Hun var årsaken til at pasienter døde etter blodoverføring.

Det er 2 hovedtyper av agglutinogener, som ble betinget navngitt A og B. Liming av erytrocytter, det vil si blodinkompatibilitet, oppstår hvis agglutinogenet kombineres med proteinet med samme navn - agglutinin, som finnes i blodplasmaet, henholdsvis en og b. Dette betyr at det i menneskeblod ikke kan være proteiner med samme navn som forårsaker agglutinasjon av erytrocytter, det vil si at hvis det er agglutinogen A, kan det ikke inneholde agglutinin a.

Det ble også funnet at både agglutinogener, A og B, kan være tilstede i blodet, men da inneholder det ingen type agglutininer, og omvendt. Alle disse er tegnene som bestemmer blodtypen. Derfor, når proteinene med samme navn i erytrocytter og plasma kombineres, utvikles det en konflikt om blodtypen.

Typer blodgrupper

Basert på denne oppdagelsen har 4 hovedtyper av blodgrupper blitt identifisert hos mennesker:

Den 1., som ikke inneholder agglutinogener, men inneholder både agglutininer a og b, er den vanligste blodtypen, som er besatt av 45 % av verdens befolkning;
2., som inneholder agglutinogen A og agglutinin b, bestemmes hos 35 % av mennesker;
3., hvor det er agglutinogen B og agglutinin a, 13% av folk har det;
Fjerde, som inneholder både agglutinogener A og B, og ikke inneholder agglutininer, denne blodtypen er den sjeldneste, den bestemmes bare i 7% av befolkningen.

I Russland er betegnelsen vedtatt gruppetilhørighet blod i henhold til AB0-systemet, det vil si i henhold til innholdet av agglutinogener i det. Følgelig ser blodgruppetabellen slik ut:

Blodtypen er arvelig. Kan blodtypen endres - svaret på dette spørsmålet er utvetydig: det kan det ikke. Selv om historien til medisin vet det eneste tilfellet forbundet med genmutasjoner. Genet som bestemmer blodgruppen er lokalisert i det 9. paret av det menneskelige kromosomsettet.

Viktig! Bedømmelsen av hvilken blodtype som passer for alle har mistet sin relevans i dag, akkurat som konseptet universell giver, det vil si eieren av 1. (null) blodgruppe. Mange underarter av blodgrupper er oppdaget, og bare én gruppe blod blir transfundert.

Rh-faktor: negativ og positiv

Til tross for at Landsteiner oppdaget blodgrupper, fortsatte transfusjonsreaksjoner å oppstå under transfusjon. Forskeren fortsatte sin forskning, og sammen med kollegene Wiener og Levine klarte han å oppdage et annet spesifikt erytrocyttantigenprotein - Rh-faktoren. Den ble først identifisert i rhesusapen, som den fikk navnet sitt fra. Det viste seg at Rh også er tilstede i blodet til de fleste: 85% av befolkningen har dette antigenet, og 15% har det ikke, det vil si at de har en negativ Rh-faktor.

Det særegne med Rh-antigenet er at når det kommer inn i blodet til mennesker som ikke har det, bidrar det til produksjonen av anti-Rh-antistoffer. Ved gjentatt kontakt med Rh-faktoren gir disse antistoffene en alvorlig hemolytisk reaksjon, som kalles Rh-konflikten.

Viktig! Når Rh-faktoren er negativ, betyr dette ikke bare fraværet av Rh-antigenet i de røde blodcellene. Anti-Rhesus-antistoffer kan være tilstede i blodet, som kan dannes ved kontakt med Rh positivt blod. Derfor er en analyse for tilstedeværelsen av Rh-antistoffer obligatorisk.

Bestemmelse av blodgruppe og Rh-faktor

Blodtype og Rh-faktor er underlagt obligatorisk bestemmelse i følgende tilfeller:

for blodoverføring;
for benmargstransplantasjon;
før enhver operasjon;
under graviditet;
med blodsykdommer;
hos nyfødte med hemolytisk gulsott (Rhesus-inkompatibilitet med moren).

Men ideelt sett bør enhver person, både en voksen og et barn, ha informasjon om gruppe- og Rh-tilhørighet. Alvorlig skade eller akutt sykdom når det er akutt behov for blod.

Bestemmelse av blodgruppen

Bestemmelsen av blodgruppen utføres med spesielt oppnådde monoklonale antistoffer i henhold til AB0-systemet, det vil si serumagglutininer, som gir erytrocyttagglutinasjon ved kontakt med agglutinogener med samme navn.

Algoritmen for å bestemme blodgruppen er som følger:

Forbered kolikloner (monoklonale antistoffer) anti-A - rosa ampuller og anti-B - blå ampuller. Forbered 2 rene pipetter, blandepinner og glassglass, en 5 ml engangssprøyte for blodprøvetaking, et reagensrør.
Utfør blodprøver fra en vene.
En stor dråpe kolikloner (0,1 ml) påføres et objektglass eller en spesialmerket plate, små dråper av testblodet (0,01 ml) blandes med separate glassstaver.
Observer resultatet i 3-5 minutter. En dråpe blandet blod kan være homogen - reaksjon minus (-), eller flak faller ut - reaksjon pluss eller agglutinasjon (+). Evaluering av resultatene må utføres av lege. Alternativer for studiet av å bestemme blodgruppen er presentert i tabellen:

Definisjon av Rh-faktoren

Bestemmelsen av Rh-faktoren utføres på samme måte som bestemmelsen av blodgruppen, det vil si ved å bruke et monoklonalt serumantistoff mot Rh-antigenet. En stor dråpe av reagenset (zoliklon) og en liten dråpe nytatt blod påføres en spesiell ren hvit keramisk overflate i samme proporsjoner (10:1). Blodet blandes forsiktig med en glassstav med reagenset.

Bestemmelse av Rh-faktoren med kolikloner tar kortere tid, fordi reaksjonen skjer innen 10-15 sekunder. Det er imidlertid nødvendig å tåle den maksimale tidsbegrensningen på 3 minutter. Akkurat som ved bestemmelse av blodgruppe, sendes et reagensglass med blod til laboratoriet.

I medisinsk praksis i dag er en praktisk og rask ekspressmetode for å bestemme gruppetilhørighet og Rh-faktor mye brukt ved bruk av tørre solikloner, som fortynnes med sterilt vann for injeksjon rett før studien. Metoden kalles "Erythrotest-Groupcard", den er veldig praktisk både i klinikker og under ekstreme og feltforhold.

Naturen og helsen til en person etter blodtype

Menneskeblod som dets spesifikke genetiske egenskap har ennå ikke blitt fullstendig studert. De siste årene har forskere oppdaget varianter av blodundergrupper, nye teknologier utvikles for å bestemme kompatibilitet, og så videre.

Blod er også kreditert med evnen til å påvirke helsen og karakteren til eieren. Og selv om dette problemet fortsatt er kontroversielt, har langsiktige observasjoner likevel lagt merke til Interessante fakta. For eksempel tror japanske forskere at det er mulig å bestemme karakteren til en person etter blodtype:

eiere av den første blodgruppen er viljesterke, sterke, omgjengelige og emosjonelle mennesker;
eiere av den andre gruppen kjennetegnes av tålmodighet, samvittighet, utholdenhet, flid;
representanter for den tredje gruppen er kreative individer, men samtidig er de for påvirkelige, dominerende og lunefulle;
personer med 4. blodgruppe lever mer med følelser, er ubesluttsomme, noen ganger urimelig harde.

Når det gjelder helse, avhengig av blodtype, antas det at den er den sterkeste i flertallet av befolkningen, det vil si i 1. gruppe. Personer med 2. gruppe er utsatt for hjertesykdom og onkologiske sykdommer, for eierne av den tredje gruppen er karakteristisk svak immunitet, lav motstand mot infeksjoner og stress, og representanter for den fjerde gruppen er utsatt for kardiovaskulær patologi, leddsykdommer og kreft.

Blodgruppen i henhold til ABO-systemet bestemmes ved hjelp av agglutinasjonsreaksjonen. For tiden brukes tre metoder for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet:

i henhold til standard isohemagglutinerende sera,

i henhold til standard isohemagglutinerende sera og standard erytrocytter (kryssmetode),

ved bruk av monoklonale antistoffer (anti-A og anti-B zolikloner).

I dette tilfellet er det følgende generelt aksepterte taktikk for å bestemme blodgruppen.

I en planlagt studie bestemmer en sykehuslege blodgruppen ved hjelp av standard isohemagglutinerende sera eller ved hjelp av kolikloner, hvoretter han sender blodet til et serologisk laboratorium for å sjekke gruppen med en kryssmetode.

Blodgruppen anses bare som sikker når laboratoriet bekrefter dataene som er innhentet av sykehuslegen. Dersom resultatene av studiene avviker fra hverandre, er begge studiene nødvendige. I slike tilfeller brukes også reaksjoner med isohemagglutinerende sera (eller kolikloner), men hvis mulig er det tilrådelig å bruke en kryssmetode.

Bestemmelse av blodgrupper i henhold til standard isohemagglutinerende sera.

Denne metoden er for tiden den vanligste i klinisk og laboratoriepraksis.

Essensen av metoden er å påvise gruppeantigener A og B i testblodet ved bruk av standard isohemagglutinerende sera. For disse formål brukes agglutinasjonsreaksjonen. Reaksjonen utføres i et rom med god belysning ved en temperatur på 15-25°C.

Nødvendig utstyr

Standard isohemagglutinerende sera av gruppene O (I), A (II), B (III) og AB (IV) i to forskjellige serier. Serum for å bestemme blodgrupper er laget i spesielle serologiske laboratorier fra donert blod. Serum oppbevares ved en temperatur på 4-8 "C (i kjøleskap).

Utløpsdatoen til serumet er angitt på etiketten. Serumtiter (også angitt på etiketten) må være minst 1:32 (for serum B (III) - minst 1:16/32). Serumtiter refererer til den maksimale fortynningen som en agglutinasjonsreaksjon kan oppstå ved. Mysen skal være gjennomsiktig, uten tegn til forråtnelse. For enkelhets skyld er standard hemagglutinerende sera av forskjellige grupper tonet i en bestemt farge: O (I) - fargeløs (grå), A (II) - blå, B (III) - rød, AB (IV) - lys gul.

Hvit porselen eller emaljerte plater eller annen fuktbar plate merket 0(1), A(S), VCP), AB(IV).

Isotonisk natriumkloridløsning.

Nåler, pipetter, glassstenger (glassglass).

Reaksjonsteknikk

Under passende betegnelser for blodgruppen påføres standard isohemagglutinerende sera av gruppe I, II, III på platen (platen) i et volum på 0,1 ml (en stor dråpe ca. 1 cm i diameter).

For å unngå feil påføres to serier sera av hver gruppe, siden en av seriene kan ha lav aktivitet og ikke gi en tydelig agglutinasjon. Totalt oppnås 6 dråper, som danner to rader med tre dråper i følgende rekkefølge fra venstre mot høyre: O (I), A (II), B (III).

Blod for forskning tas fra en finger eller fra en blodåre. Seks dråper testblod omtrent på størrelse med et 0,01 ml knappenålshode (liten dråpe) overføres suksessivt med en tørr glassstang til en plate ved 6 punkter, hver ved siden av en dråpe standardserum (mengden blod som skal testes bør være ca. 10 ganger mindre enn mengden standardserum som det blandes med), deretter blandes de forsiktig med glassstaver med avrundede kanter.

En enklere teknikk er mulig: en stor dråpe blod påføres platen, hvorfra den tas med hjørnet av et glassglass og overføres til hver dråpe serum, forsiktig blandes med den siste. Samtidig, hver gang blodet tas med et nytt hjørne av glasset, pass på at dråpene ikke smelter sammen.

Etter blanding ristes platen med jevne mellomrom. Agglutinasjonen starter i løpet av de første 10-30 sekundene, men observasjon må utføres inntil 5 minutter på grunn av muligheten for senere agglutinering, for eksempel med gruppe A2(H) erytrocytter.

I de dråpene hvor agglutinering har oppstått, tilsettes en dråpe isotonisk natriumkloridløsning, hvoretter resultatet av reaksjonen vurderes.

Tolking av resultater

Agglutinasjonsreaksjonen kan være positiv eller negativ.

Med en positiv reaksjon, vanligvis i løpet av de første 10-30 sekundene, vises små røde korn (agglutinater) synlige for det blotte øye i blandingen, bestående av limte røde blodlegemer. Små korn smelter gradvis sammen til større korn, og noen ganger til uregelmessig formede flak.

I dette tilfellet er serumet delvis eller fullstendig misfarget. Ved en negativ reaksjon forblir dråpen jevn farget rød og ingen korn (agglutinater) finnes i den.

Tilhørigheten av det studerte blodet til den tilsvarende gruppen bestemmes av tilstedeværelsen eller fraværet av agglutinasjon i reaksjonen med de tilsvarende sera.

Det skal bemerkes at dersom sera fra alle tre gruppene ga en positiv reaksjon, indikerer dette at testblodet inneholder både agglutinogener - A og B og tilhører AB(IV)-gruppen.

Men i slike tilfeller, for å utelukke en uspesifikk agglutinasjonsreaksjon, er det nødvendig å gjennomføre en ekstra kontrollstudie av testblodet med standard isohemagglutinerende serum fra gruppe AB (IV) som ikke inneholder agglutininer.

Bare fraværet av agglutinasjon i denne dråpen i nærvær av agglutinasjon i dråper som inneholder standard sera fra gruppene 0(1), A(I) og B(III) gjør at vi kan vurdere reaksjonen som spesifikk og å tilskrive blodet som studeres til AB0 (IV) gruppen.

Det skal bemerkes at i nærvær av en svak subtype av A2-antigenet i testblodet, begynner agglutinasjonsreaksjonen med hemagglutinerende sera av gruppe 0 (1) og B (III) senere (ved 3-4 minutter).

For nøyaktig å bestemme undertypen av antigen A, er det nødvendig å utføre en ekstra reaksjon med den såkalte anti-A, et reagens laget av frøene til planten Dolichos bitforis, som bare inneholder anti-A-antistoffer (utført i et serologisk laboratorium ).