Mga pamamaraan sa laboratoryo para sa pag-diagnose ng syphilis. Complement fixation reaction (FFR) Ano ang batayan ng serological research method?

Ano ang ipinapakita ng isang serological blood test? Mga hakbang sa diagnostic- Ito ang pinakamahalagang yugto sa paggamot ng anumang sakit. Ang tagumpay ng paggamot ay nakasalalay hindi lamang sa mga iniresetang gamot, ngunit higit sa lahat sa kung paano tama ang pagsusuri ay ginawa.

Bilang karagdagan, ang diagnosis ay nakakatulong na maiwasan ang mga komplikasyon at mga kasamang sakit. Gamit ang isang serological test ng dugo ng pasyente, ang pagkakaroon ng mga antibodies at antigens ay napansin. Ang pag-aaral ay nakakatulong upang makahanap ng maraming sakit, matukoy ang kanilang yugto at subaybayan ang pag-unlad ng paggamot.

Ano ang serology?

Ang serology ay ang sangay ng immunology na nag-aaral ng mga reaksyon ng antigens sa antibodies. Ang sangay ng gamot na ito ay tumatalakay sa pag-aaral ng plasma ng dugo at mga katangian ng immunological nito.

Ngayon, isang serological blood test para sa mga antibodies ay maaasahang paraan pagtuklas ng human immunodeficiency virus, hepatitis, brucellosis, STD at iba pang mga sakit na nagbabanta sa buhay. Alamin natin kung anong mga kaso ang inireseta.

Mga pahiwatig para sa paggamit

Ang isang serological na pagsusuri sa dugo ay kinakailangan upang matukoy ang sanhi ng ahente ng sakit kung mahirap gumawa ng diagnosis.

Upang maisagawa ang reaksyong ito, ang mga antigen ng mga pathogen ay ipinakilala sa plasma, at pagkatapos ay ang patuloy na proseso ay pinag-aralan ng isang katulong sa laboratoryo. O ginagawa nila ang kabaligtaran na reaksyon: ang mga antibodies ay iniksyon sa nahawaang dugo upang matukoy ang tiyak na pagkakakilanlan ng pathogen.

Saklaw ng aplikasyon

Ang pananaliksik na ito ay ginagamit sa iba't ibang sangay ng medisina. Tinutukoy ng reaksyong ito ang mga partikular na selula at antibodies na ginawa ng katawan upang labanan ang mga impeksiyon at mga virus.

Bilang karagdagan, ang uri ng dugo ng isang tao ay tinutukoy gamit ang serological na paraan.

Ang isang katulad na serological blood test ay ginagamit sa ginekolohiya upang masuri ang mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik. Ginagamit din ang paraang ito para sa komprehensibong survey mga buntis na kababaihan (pagtuklas ng toxoplasmosis, HIV, syphilis, atbp.). Ang pagpasa sa pagsusulit na ito ay sapilitan kapag nagparehistro sa isang antenatal clinic.

Sa mga bata, ang isang serological reaksyon ay ginagamit upang kumpirmahin ang diagnosis ng tinatawag na "pagkabata" na mga sakit (chickenpox, tigdas, rubella, atbp.) Kung ang mga sintomas ay walang binibigkas na mga pagpapakita at imposibleng makilala ang sakit sa pamamagitan ng pagsusuri ng mga klinikal na indikasyon .

Pagtuklas ng mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik

Para sa mga venereologist, ang pagsubok na ito ay talagang hindi mapapalitan at nagbibigay-daan sa iyo na gumawa ng diagnosis nang napakatumpak.

Sa isang malabong klinikal na larawan, ang isang serological na pagsusuri ng dugo para sa syphilis, giardiasis, ureaplasmosis, chlamydia, herpes at iba pang mga sakit ay maaaring mabilis na matukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies.

Viral at nakakahawang sakit

Ang serological analysis ay aktibong ginagamit ng mga gastroenterologist, hepatologist at mga espesyalista sa nakakahawang sakit upang masuri ang viral hepatitis.

Ang pag-decipher ng isang serological blood test ay ginagawang posible upang matukoy ang yugto ng sakit at sagutin ang tanong kung gaano kinakailangan ang pag-ospital. sa sandaling ito. Paano maghanda ng maayos?

Paghahanda para sa pagsusulit

Ang mga pagsusuri sa serological na dugo ay ginagawa sa parehong pampubliko at komersyal na mga klinika. Ang kagustuhan ay dapat ibigay sa isang laboratoryo na may modernong kagamitan at mga kwalipikadong tauhan.

Ang mga biological sample para sa pagsusuri ay maaaring laway at dumi, ngunit sa karamihan ng mga kaso ay ginagamit ang venous blood ng pasyente. Ang dugo para sa isang serological test ay kinuha mula sa cubital vein sa isang laboratoryo. Bago kumuha ng pagsusulit, dapat kang kumunsulta sa iyong doktor tungkol sa paghahanda para sa pamamaraang ito.

Upang maghanda para sa isang serological test, kailangan mong sundin ang ilang simpleng mga patakaran.

Ang dugo ay ibinibigay sa isang kalmadong estado bago kumain, iyon ay, sa walang laman na tiyan. Bago ito, hindi ka dapat sumailalim sa iba pang mga pagsusuri, tulad ng x-ray, ultrasound, atbp.

Kinakailangang iwasan ang pag-inom ng antibacterial at ilang iba pang gamot ilang linggo bago mag-donate ng dugo. Ang ilang mga rekomendasyon sa kasong ito ay nakasalalay sa sakit kung saan ginagawa ang pagsusuri. Halimbawa, ang pagsusuri para sa hepatitis ay kinabibilangan ng pagbubukod matatabang pagkain at alkohol 48 oras bago ang pamamaraan.

Reaksyon ng fluorescence

Kabilang sa mga uri ng serological reactions ay mayroong fluorescence reaction. Ang pamamaraan na ito ay gumagamit ng isang reagent na nagpapailaw ng mga antibodies sa serum ng dugo.

Ang pag-set up ng direktang serological reaction ay kinabibilangan ng pagmamarka ng mga partikular na antibodies na may fluorescent substance. Ang reaksyong ito ay ang pinakamabilis at isinasagawa sa isang yugto.

Ang isa pang opsyon para sa pagsasagawa ng naturang pagsusuri ay tinatawag na hindi direkta, o RNIF. Ito ay isinasagawa sa dalawang yugto. Sa unang hakbang, ang mga antibodies ay hindi nilagyan ng label na may mga fluorescent na tag, at sa pangalawa, ang mga antibodies na may naaangkop na label ay ginagamit upang makilala ang mga antigen at antibodies. Ang glow ay nangyayari lamang pagkatapos na nagbubuklod sa isang tiyak na antibody ay nangyayari.

Ano ang ipinapakita ng isang serological blood test? Ang resulta ng buong pamamaraan ay tinasa ng isang espesyal na aparato na sinusuri ang lakas ng radiation at ipinapakita ang hugis at sukat ng bagay na pinag-aaralan. Mga pathogen Nakakahawang sakit ay napansin na may isang resulta na ang pagiging maaasahan ay 90-95%, depende sa uri at yugto ng patolohiya.

Naka-link na immunosorbent assay

Ang mga uri ng serological testing na ito ay gumagamit ng natatangi at matatag na reagents. Ang mga minarkahang sangkap ay tila dumidikit sa ninanais na mga antibodies. Bilang resulta, nakakakuha tayo ng isang husay o dami ng resulta.

Kung walang nakitang binibigkas na mga marker, ang resulta ay ituturing na negatibo. Kung ang pagkakaroon ng mga antibodies sa mga biological sample ay nakita sa panahon ng isang husay na pag-aaral, kung gayon ang resulta ng pagsubok ay itinuturing na positibo. Sa pamamagitan ng pagbibilang ng mga cell, ang pagsusuri ay nagbibigay ng mas tumpak na resulta.

Sa pamamagitan ng pagsusuri sa mga indicator ng pagsusuri (halimbawa, ang kabuuan ng mga nakitang cell), tinutukoy ng espesyalista kung ang sakit ay nasa paunang yugto, V talamak na yugto, o ito ay tumaas talamak na anyo patolohiya. Upang makagawa ng diagnosis, isinasaalang-alang ng doktor hindi lamang ang data ng isang serological na pag-aaral, kundi pati na rin klinikal na larawan mga sakit.

Mga tampok ng pagsubok na ito

Ang pagsasagawa ng pagsusuring ito ay hindi palaging makakapagbigay ng 100% kumpiyansa na ang isang partikular na sakit ay natukoy. Ito ay nangyayari na ang mga resulta ay maaaring hindi maliwanag at iba pang mga pamamaraan ay kinakailangan.

Halimbawa, sa panahon ng pagsusuri para sa brucellosis, ang serum ng dugo ay kinokontrol para sa pagpapanatili sa sarili nang walang antigen. Ito ay makabuluhang pinatataas ang pagiging maaasahan ng pagsubok. Ang pagsusuri para sa brucellosis ay maaaring maging positibo o negatibo, at maaari ring magdulot ng mga pagdududa.

Kung nakatanggap ka ng mga kaduda-dudang resulta na walang malinaw na interpretasyon, inirerekumenda na kumuha muli ng pagsusulit. Bilang karagdagan, ang brucellosis ay maaaring makita ng mga kultura ng dugo, pagsubok Utak ng buto at cerebrospinal fluid.

Mga kalamangan ng serological blood test

Ang mga pamamaraan ng diagnostic na gumagamit ng mga serological na reaksyon ay malawakang ginagamit sa modernong medikal na kasanayan. Ito ay kadalasang ginagawa kapag tinutukoy ang mga viral at nakakahawang pathologies.

Ang parehong mga pagsubok ay ginagamit kapag nagsasagawa ng geographic screening at medikal na pagsusuri upang maiwasan ang epidemiological na pagkalat ng impeksyon.

Ang mga pakinabang ng pamamaraan ay kinabibilangan ng:

  • Mataas na antas ng kumpiyansa.
  • Mabilis na reaksyon at resulta. Ang mga resulta ng RSC ay malalaman sa loob ng 24 na oras. Sa isang espesyal na sitwasyon, sa isang setting ng ospital, ang pagsusuri ay magiging handa sa loob ng ilang oras.
  • Pagsubaybay sa pag-unlad ng sakit at ang pagiging epektibo ng therapy.
  • Mababang gastos at accessibility para sa mga pasyente.

Mga disadvantages ng pamamaraan

Gayunpaman, ang mga pag-aaral ng serological ay mayroon ding mga kakulangan.

Kabilang dito ang katotohanang dapat isaalang-alang ng pagsusuri tagal ng incubation mga sakit upang makakuha ng mas maaasahang larawan.

Halimbawa, ang kahulugan herpes simplex ang una o pangalawang uri ay posible lamang pagkatapos ng 14 na araw mula sa sandali ng impeksyon. Ang pagsusuri para sa pagkakaroon ng immunodeficiency virus ay isinasagawa 30 araw, 90 araw at anim na buwan pagkatapos makipag-ugnayan sa isang taong nahawahan.

Siyempre, ang pagiging maaasahan ng mga resulta ay maaari ding maimpluwensyahan ng kadahilanan ng tao: kapabayaan ang mga patakaran para sa paghahanda para sa sampling ng dugo o isang pagkakamali na ginawa ng katulong sa laboratoryo kapag isinasagawa ang reaksyon.

Ayon sa mga istatistika, ang isang maling resulta ay maaaring makuha sa 5% ng mga kaso. Ang isang nakaranasang doktor, kapag sinusuri ang isang pasyente, na pinag-aralan ang klinikal na larawan, sa karamihan ng mga kaso ay maaaring kalkulahin ang pagkakamaling nagawa.

Talaan ng mga nilalaman ng paksang "Mga pamamaraan para sa pag-detect ng mga virus. Mga pamamaraan para sa pag-diagnose ng mycoses (fungal disease). Mga pamamaraan para sa pag-detect ng protozoa.":










Ang pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum ng dugo. RTGA. RSK. REEF. Mga pamamaraan ng immunosorption para sa pagtuklas ng mga antiviral antibodies.

Isang mas simple at mas madaling paraan - pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum. Ang mga sample ng dugo ay dapat kolektahin ng dalawang beses: kaagad pagkatapos ng paglitaw ng mga klinikal na palatandaan at pagkatapos ng 2~3 linggo. Napakahalaga na suriin ang eksaktong dalawang sample ng serum. Ang mga resulta ng isang pag-aaral ay hindi maituturing na konklusibo dahil sa kawalan ng kakayahang maiugnay ang paglitaw ng AT sa kasalukuyang kaso. Posible na ang mga AT na ito ay umiikot pagkatapos ng isang nakaraang impeksyon. SA katulad na sitwasyon ang papel na ginagampanan ng pag-aaral ng serum na nakuha sa panahon ng convalescence ay hindi maaaring overestimated. Ang pagkakaroon ng sakit sa panahon ng pagkolekta ng unang sample ay ipinahiwatig ng hindi bababa sa apat na beses na pagtaas sa AT titer na nakita sa panahon ng pag-aaral ng pangalawang sample.

Mga pamamaraan na nakalista sa ibaba huwag payagan ang pagkakaiba-iba ng mga antibodies(AT), nabuo sa panahon ng sakit at umiikot pagkatapos ng paggaling (ang tagal ng panahong ito ay nag-iiba para sa iba't ibang impeksyon). Dahil para sa sapat na pagsusuri, kinakailangan upang kumpirmahin ang isang makabuluhang pagtaas sa mga titer ng AT sa dalawang sample, ang unang sample ay sinusuri sa talamak na yugto, at ang pangalawa - sa panahon ng pagbawi (pagkatapos ng 2-3 linggo). Ang mga resultang nakuha ay likas na retrospective at mas angkop para sa pagsasagawa ng mga epidemiological survey.

RTGA nakakakita ng AT na synthesize laban sa hemagglutinin ng mga virus (halimbawa, influenza virus). Ginagawang posible ng pamamaraan na madaling makita ang mga naturang antibodies (AT) sa serum ng pasyente.

RSK- basic serodiagnostic na pamamaraan mga impeksyon sa viral (kabilang sa mga magagamit). Nakikita ng reaksyon ang complement-fixing IgM at IgG, ngunit hindi pinagkaiba ang mga ito; Upang ma-optimize ang mga resulta na nakuha, ang pagtatanghal ng reaksyon ay nangangailangan ng ilang mga kasanayan sa tauhan.

REEF. Kung posible na makakuha ng biopsy ng nahawaang tissue at ang pagkakaroon ng komersyal na fluorescein-labeled AT kit, ang diagnosis ay maaaring makumpirma sa pamamagitan ng direktang immunofluorescence. Ang reaksyon ay nagsasangkot ng pagpapapisa ng tissue sa ilalim ng pag-aaral sa AT, ang kanilang kasunod na pag-alis, at fluorescence microscopy ng sample.

Mga pamamaraan ng immunosorption para sa pagtuklas ng mga antiviral antibodies

Mga paraan ng immunosorption(halimbawa, ang ELISA at RIA) ay mas nagbibigay-kaalaman dahil magkahiwalay silang nakakakita ng IgM at IgG, na nagbibigay-daan sa isa na gumawa ng ilang konklusyon tungkol sa dinamika. nakakahawang proseso o state of convalescence. Upang matukoy ang AT, ang isang kilalang Ag ay na-sorbed sa isang solidong substrate (halimbawa, sa mga dingding ng mga test tube, plastic microplate, Petri dishes) at iba't ibang mga dilution ng serum ng pasyente ay idinagdag. Pagkatapos ng naaangkop na pagpapapisa ng itlog, ang hindi nakatali na AT ay aalisin, ang antiserum sa Ig ng tao na may label na enzyme ay idinagdag, ang pamamaraan ng pagpapapisa ng itlog at paghuhugas ng hindi nakatali na AT ay paulit-ulit, at ang ilang chromogenic substrate (sensitibo sa pagkilos ng enzyme) ay idinagdag. Dahil ang pagbabago ng kulay ay proporsyonal sa nilalaman ng tiyak na AT, ito ay lubos na posible upang matukoy ang kanilang titer spectrophotometrically. Sa diagnosis ng impeksyon sa HIV, natagpuan ng immunoblotting na paraan ang pinakalaganap na paggamit.

Ang complement fixation reaction (FFR) ay isinasagawa sa dalawang yugto: sa unang yugto, ang antigen ay pinagsama sa test serum, kung saan ang pagkakaroon ng mga antibodies ay ipinapalagay, ang pandagdag ay idinagdag, at natupok sa isang thermostat sa loob ng 30 minuto.

Ikalawang yugto: magdagdag hemolytic system(mga pulang selula ng dugo ng tupa + hemolytic serum). Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog sa isang termostat sa loob ng 30 minuto, ang resulta ay isinasaalang-alang.

Sa isang positibong RSC, ang mga serum antibodies, na pinagsama sa antigen, ay bumubuo ng isang immune complex na nakakabit ng pandagdag, at hindi magaganap ang hemolysis. Kung negatibo ang reaksyon (walang antibodies sa test serum), mananatiling libre ang complement at magaganap ang hemolysis.

Ginagamit ang RSC para sa serological diagnosis ng syphilis, gonorrhea, tipus at iba pang sakit.

Ang mga reaksyon ng immune gamit ang mga may label na antigen at antibodies ay batay sa katotohanan na ang isa sa mga sangkap na kasangkot sa reaksyon (antigens o antibodies) ay pinagsama sa ilang uri ng label na madaling matukoy. Ang mga fluorochromes (RIF), enzymes (ELISA), radioisotopes (RIA), at electron-dense compound (IEM) ay ginagamit bilang mga label.

Naka-link na immunosorbent assay(ELISA), tulad ng iba pang immune reactions, ay ginagamit: 1) para makita ang isang hindi kilalang antigen gamit ang mga kilalang antibodies o 2) upang makita ang mga antibodies sa serum ng dugo gamit ang isang kilalang antigen. Ang kakaiba ng reaksyon ay ang isang kilalang sangkap ng reaksyon ay pinagsama sa isang enzyme (halimbawa, peroxidase). Ang pagkakaroon ng enzyme ay tinutukoy gamit ang isang substrate, na nagiging kulay kapag kumilos ang enzyme. Ang pinakalawak na ginagamit ay solid-phase ELISA.

1) Pagtuklas ng antigen. Ang unang yugto ay ang adsorption ng mga tiyak na antibodies sa solid phase, na ginagamit bilang polystyrene o polyvinyl chloride na ibabaw ng mga balon ng mga plastic panel. Ang ikalawang yugto ay ang pagdaragdag ng materyal sa pagsubok, kung saan ang pagkakaroon ng antigen ay ipinapalagay. Ang antigen ay nagbubuklod sa mga antibodies. Pagkatapos nito, ang mga balon ay hugasan. Ang ikatlong yugto ay ang pagdaragdag ng isang tiyak na suwero na naglalaman ng mga antibodies laban sa isang ibinigay na antigen, na may label na isang enzyme. Ang mga may label na antibodies ay nakakabit sa mga antigen, at ang labis ay inaalis sa pamamagitan ng paghuhugas. Kaya, kung ang materyal ng pagsubok ay naglalaman ng mga antigens, isang antibody-antigen-antibody complex na may label na enzyme ay nabuo sa ibabaw ng solid phase. Upang makita ang enzyme, isang substrate ang idinagdag. Para sa peroxidase, ang substrate ay orthophenylenediamine na hinaluan ng H 2 O 2 sa isang buffer solution. Sa ilalim ng pagkilos ng enzyme, ang mga produkto ay nabuo na may kulay na kayumanggi.



2) Pagtuklas ng mga antibodies. Ang unang yugto ay ang adsorption ng mga tiyak na antigens sa mga dingding ng mga balon. Karaniwan, sa mga komersyal na sistema ng pagsubok, ang mga antigen ay na-adsorbed na sa ibabaw ng mga balon. Ang ikalawang yugto ay ang pagdaragdag ng test serum. Sa pagkakaroon ng mga antibodies, nabuo ang isang antigen-antibody complex. Ang ikatlong yugto - pagkatapos ng paghuhugas, ang mga antiglobulin antibodies (antibodies laban sa mga globulin ng tao), na may label na isang enzyme, ay idinagdag sa mga balon. Ang mga resulta ng reaksyon ay sinusuri tulad ng inilarawan sa itaas.

Malinaw na positibo at malinaw na negatibong mga sample, na magagamit sa mga komersyal na sistema, ay ginagamit bilang mga kontrol.

Ang ELISA ay ginagamit upang masuri ang maraming mga nakakahawang sakit, partikular na ang impeksyon sa HIV at viral hepatitis.

Ang immunoblotting ay isang uri ng ELISA (kombinasyon ng electrophoresis at ELISA). Ang mga biopolymer, tulad ng mga antigen ng human immunodeficiency virus, ay pinaghihiwalay gamit ang gel electrophoresis. Pagkatapos ang mga pinaghiwalay na molekula ay inilipat sa ibabaw ng nitrocellulose sa parehong pagkakasunud-sunod kung saan sila ay nasa gel. Ang proseso ng paglipat ay tinatawag na blotting, at ang resultang pag-print ay isang blot. Ang imprint na ito ay apektado ng test serum. Pagkatapos ay idinagdag ang anti-human globulin serum na may label na peroxidase, pagkatapos ay ang substrate, na, sa ilalim ng pagkilos ng enzyme, ay nakakakuha. Kulay kayumanggi. Nabubuo ang mga brown streak sa mga lugar kung saan ang mga antibodies ay pinagsama sa mga antigens. Ang pamamaraan ay nagpapahintulot sa iyo na makita ang mga antibodies sa mga indibidwal na antigen ng virus.



Radioimmunoassay (RIA). Ang pamamaraan ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang dami ng antigen sa sample ng pagsubok. Una, ang isang materyal na sinasabing naglalaman ng isang antigen ay idinagdag sa immune serum, pagkatapos ay isang kilalang antigen na may label na radioisotope, halimbawa I 125, ay idinagdag. Bilang resulta, ang nakikita (walang label) at kilalang may label na antigen ay nagbubuklod sa isang limitadong halaga ng mga antibodies. Dahil ang may label na antigen ay idinagdag sa isang tiyak na dosis, posibleng matukoy kung aling bahagi nito ang nakatali sa mga antibodies, at kung aling bahagi ang nanatiling libre dahil sa kumpetisyon sa walang label na antigen at inalis. Ang dami ng may label na antigen na nakatali sa mga antibodies ay tinutukoy gamit ang isang counter. Ito ay inversely proportional sa dami ng antigen na nakita.

Immunoelectron microscopy (IEM). Ang isang antigen, halimbawa, isang influenza virus, ay nakakabit sa isang partikular na antiserum na may label na may electron-dense substance. Ang mga protina na naglalaman ng metal (ferritin, hemocyanin) o colloidal gold ay ginagamit bilang mga label. Kapag pumasok ang microscopy electron microscope kumuha ng mga litratong nagpapakita ng mga influenza virion na may kalakip madilim na tuldok- mga molekula ng may label na antibodies.

Kontrolin ang mga tanong

Nakuha ang kaligtasan sa sakit, ang pagkakaiba nito mula sa namamana (tiyak, likas). Mga uri ng nakuha na kaligtasan sa sakit.

Gawain. Ang anak ng pamilya na si Valery ay nagkasakit ng dipterya. tatlong taon. Ang ibang miyembro ng pamilya ay hindi nagkasakit, at ang ina ay nagkaroon ng diphtheria sa pagkabata, at ang ama ay nabakunahan ng diphtheria toxoid. Ang nakatatandang kapatid na si Natasha, limang taong gulang, ay hindi nabakunahan ng diphtheria toxoid sa isang pagkakataon dahil sa medikal na contraindications, kaya kailangan kong ibigay sa kanya pang-emergency na pag-iwas gamit ang anti-diphtheria antitoxic serum. Nakababatang kapatid, Si Vitaly, tatlong buwang gulang, ay hindi nagkasakit, kahit na hindi siya nabakunahan ng kahit ano. May pusa at aso sa bahay, wala silang sakit. Para sa bawat miyembro ng pamilya at para sa mga hayop, pangalanan ang uri ng kaligtasan sa sakit na pumigil sa kanila na magkasakit.

Ano ang isang antigen? Anong mga sangkap ang maaaring maging antigens? Mga ganap na antigen at hapten, paano sila naiiba sa isa't isa? Istraktura ng antigen. Ano ang pangalan ng bahagi ng molekula ng antigen na tumutukoy sa pagiging tiyak nito? Pangalanan ang mga antigen na alam mo. Ano ang mga autoantigens? Antigenic na istraktura ng isang microbial cell. Flagellar at somatic antigens; lokalisasyon, pagtatalaga ng liham, likas na kemikal, kaugnayan sa temperatura, paraan ng paghahanda, praktikal na gamit. Anatoxin, mga katangian nito, aplikasyon, produksyon. Anong tissue ang bumubuo sa immune system ng katawan? Tukuyin ang sentral at mga peripheral na organo immune system tao. Ilarawan ang proseso ng pagbuo ng humoral at cellular immune response. Tukuyin ang mga cell na kumukuha at hinuhukay ang antigen; mga cell na nakikipag-ugnayan sa pagbuo ng humoral immunity, cellular immunity; mga selula na nagbabago at nagiging mga selula ng plasma na gumagawa ng mga antibodies; mga selula na nagpapasigla sa prosesong ito; mga cell na pinipigilan ang immune response; mga selula na pumapatay ng mga selulang tumor at mga selulang nahawaan ng virus. Ano ang mga antibodies? Paano makakuha ng immune serum? Paano makakuha ng serum na magne-neutralize sa tetanus toxin? Laban sa anong antigens ang mga antitoxin, agglutinin, at hemolysin na nabuo? Anong mga antibodies ang nabuo kapag ang diphtheria toxoid ay ipinakilala sa katawan? diphtheria bacteria? Ang kemikal na kalikasan at istraktura ng mga antibodies. Ano ang aktibong site ng immunoglobulin? Ilista ang mga klase ng immunoglobulin at ang kanilang mga katangian. Ipahiwatig ang klase ng mga immunoglobulin na maaaring tumagos sa inunan. Anong klase nabibilang ang secretory immunoglobulins? Ang dinamika ng akumulasyon ng antibody. Paano naiiba ang pangalawang tugon sa immune mula sa isang pangunahin? Paano in praktikal na gamot ang kaalaman tungkol sa dinamika ng immune response ay ginagamit? Ano ang mga reaksyon ng immune, ano ang kanilang mekanismo, mga yugto ng reaksyon. Sa anong 2 direksyon ginagamit ang mga immune reaction? Ilista ang mga reaksyon ng immune.

Gawain. Palitan ang mga nawawalang salita ng "anatoxin" o "antitoxin": Ang _________ ay isang antigen, ang _________ ay isang antibody, ang __________ ay lumilikha kapag ipinasok sa katawan aktibong kaligtasan sa sakit, Lumilikha ang __________ kapag ipinakilala sa katawan passive immunity, Ang __________ ay nakukuha sa pamamagitan ng pagbabakuna ng mga hayop, ___________ ay nakukuha mula sa lason kapag nalantad sa formaldehyde at init, ___________ ay nagne-neutralize ng mga lason, __________ nagiging sanhi ng pagbuo ng mga antibodies sa katawan.

Agglutination reaction: ano ang agglutination, ano ang antigen, ano ang antibody; paraan ng pagtatakda, anong mga kontrol ang itinakda at bakit; kung ano dapat ang hitsura ng mga kontrol. Agglutinating serums, kung ano ang nilalaman ng mga ito, kung paano sila nakuha, kung ano ang mga ito ay ginagamit para sa; Ano ang titer ng agglutinating serum? Hindi direktang (passive) hemagglutination reaksyon: kung ano ang nagsisilbing isang antigen sa reaksyong ito, kung paano ito nakuha, ang mekanismo ng reaksyon. Ano ang isang erythrocyte diagnosticum? Ano ang isang antibody erythrocyte diagnosticum? Mga reaksyon sa pag-ulan: ano ang pag-ulan, kung ano ang nagsisilbing isang antigen; Paano makakuha ng precipitating serum? Ano ang precipitating serum titer? Mga paraan ng pagtatakda, praktikal na aplikasyon.

Complement fixation reaction (CFR): prinsipyo ng CFR; kung ano ang nabuo kapag ang immune serum ay nakikipag-ugnayan sa isang tiyak na antigen; ano ang mangyayari upang makadagdag kung ito ay naroroon sa panahon ng pakikipag-ugnayang ito? Ano ang kapalaran ng complement kung walang tiyak na pagkakaugnay sa pagitan ng antigen at antibodies? Kung ang resulta ng RSC ay hemolysis, nangangahulugan ba ito ng positibo o negatibong resulta? Pamamaraan para sa pag-set up ng RSC. Bakit kailangang i-inactivate ang test serum? Hemolytic serum: ano ang nilalaman nito, paano ito nakuha, ano ang titer at paano ito natutukoy? Complement: kalikasan ng kemikal, kaugnayan sa mataas na temperatura, saan ito nakapaloob? Paano masisira ang complement? Ano ang praktikal na ginagamit bilang pandagdag?

Gawain. May nakitang mantsa ng dugo sa damit ng isang lalaking inakusahan ng pagpatay. Anong reaksyon ang maaaring gamitin upang matukoy kung ito ay dugo ng tao; ano sa reaksyong ito ang magiging antigen at ano ang magiging antibodies; Anong diagnostic na gamot ang dapat makuha sa laboratoryo para sa reaksyong ito, paano ito inihahanda?

Gawain. Paano gamitin ang reaksyon ng pag-ulan upang matukoy kung ang isang sample ng karne na inihatid para sa pagsusuri ay malaki baka o karne ng kabayo; anong mga diagnostic na gamot ang kailangan?

Reaksyon ng pag-ulan sa agar gel, mga pamamaraan ng pagbabalangkas, praktikal na aplikasyon.

Serological na pananaliksik (mga pagsubok)mga pamamaraan sa laboratoryo mga pag-aaral batay sa pagtuklas ng mga antibodies o antigens sa biological material ng pasyente. Kadalasan, ang dugo ay ginagamit para sa pagsusuri, mas madalas - ihi, laway, purulent discharge o mga sample ng tissue na kinuha sa panahon ng biopsy.

Lugar ng aplikasyon

  • Pagpapasiya ng pangkat ng dugo.
  • Pagkilala sa mga partikular na protina ng tumor - mga marker ng tumor (halimbawa, kung pinaghihinalaang kanser sa ovarian, prostate gland, Pantog, tiyan, atbp.).
  • Diagnosis ng mga impeksyon sa viral, bacterial, fungal, protozoal (HIV, syphilis, toxoplasmosis, chlamydia, rubella, herpes, helminthiases, tick-borne encephalitis atbp.).
  • Pagpapasiya ng mga hormone, enzymes at mga gamot, na nakapaloob sa pinag-aralan na biomaterial sa mga menor de edad na konsentrasyon (mas mababa sa 10−10 g/l).

Ang kakanyahan ng pamamaraan ay serological test

Ang mga pagsusuri sa serological ay naiiba sa pamamaraan na ginamit, ngunit ang lahat ng ito ay resulta ng pakikipag-ugnayan ng mga antigens (mga dayuhang compound) na may kaukulang mga antibodies. Ang pag-aaral ay binubuo ng dalawang magkakasunod na yugto. Ang unang yugto ay nailalarawan sa pamamagitan ng pakikipag-ugnayan sa pagitan ng mga antigen at antibodies sa pagbuo mga immune complex(positibong reaksyon). Sa ikalawang yugto, lumilitaw ang mga ito panlabas na mga palatandaan, na nagpapatunay sa pagkakaroon ng parehong mga kumplikadong ito (depende sa uri ng reaksyon, maaaring ito ay labo ng solusyon sa pagsubok, isang pagbabago sa kulay nito, pagkawala ng mga natuklap, atbp.). Ang kawalan ng nakikitang pisikal na phenomena ay itinuturing na negatibong resulta ng pagsubok.

Paghahanda para sa mga pagsusuri sa serological

Depende sa uri ng pananaliksik. Tungkol sa mga tampok ng paghahatid tiyak na pagsusuri dapat sabihin ng isang medikal na espesyalista kapag nagrerehistro para sa pamamaraan.

Maaari kang kumuha ng kinakailangang serological test sa Spectra clinic. Nag-order kami ng mga pagsusuri mula sa pinakamahusay na mga laboratoryo sa kabisera, nagtatrabaho ayon sa mga pamantayan ng Europa, na ginagarantiyahan ang mabilis at maaasahang mga resulta. Tutulungan ka ng aming mga doktor na maunawaan ang konklusyon at magbigay ng mga rekomendasyon para sa karagdagang pagsusuri.

Nagbibigay ang site background na impormasyon para sa mga layuning pang-impormasyon lamang. Ang diagnosis at paggamot ng mga sakit ay dapat isagawa sa ilalim ng pangangasiwa ng isang espesyalista. Ang lahat ng mga gamot ay may mga kontraindiksyon. Kinakailangan ang konsultasyon sa isang espesyalista!

Serological pagsusuri ng dugo ay isang paraan pananaliksik sa laboratoryo ilang antigens o antibodies ( mga tiyak na protina) sa serum ng dugo ng pasyente, batay sa mga reaksyon ng immune katawan. Ang pamamaraang ito ginagamit kapag mga diagnostic mga nakakahawang sakit upang makita ang pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ng pasyente sa isang partikular na uri ng virus o bakterya, gayundin upang matukoy grupong kaakibat dugo.

Materyal na pinag-aaralan

Una sa lahat, para sa pagsusuri ng serological, ginagamit ang biological na materyal na nakolekta mula sa pasyente:
  • suwero ng dugo
  • laway
  • dumi
Sa ilang mga kaso, ang materyal na nakahiwalay sa ilang mga bagay sa kapaligiran ay sinusuri:
  • ang lupa

Paraan ng pagsusuri o pag-sample ng dugo

Ang pagsusuri na ito ay hindi nangangailangan ng espesyal na paghahanda ng pasyente. Ang sampling ng dugo ay isinasagawa sa umaga nang walang laman ang tiyan at isinasagawa sa mga silid ng paggamot mga institusyong medikal, ayon sa pangkalahatang tinatanggap na mga pamamaraan ng hematological. Para sa serological testing, ang dugo ay kinokolekta gamit ang dalawang pamamaraan: venous blood ay kinuha mula sa ulnar vein ng pasyente, at ang capillary blood ay kinuha mula sa singsing na daliri. Ang dugo ay inilalagay sa sterile sealed tubes.

Mga tampok ng transportasyon ng dugo at imbakan ng serum

Kaagad pagkatapos ng koleksyon ng dugo, dinadala ito sa isang espesyal na laboratoryo, kung saan ang serum ay inihanda sa parehong araw. Ang whey ay maaaring maimbak nang hindi hihigit sa 4-6 na araw sa refrigerator sa temperatura na 2-4 degrees. Kung kailangan ng mas mahabang imbakan, ang whey ay nagyelo. Upang maiwasang makompromiso ang kalidad ng whey, pinapayagan itong i-freeze nang isang beses at, nang naaayon, i-defrost ito. Sa pangmatagalang imbakan Ang mga antibodies ay nawawala ang kanilang mga katangian at nagiging bahagyang hindi aktibo; ang mga immunoglobulin ng klase ay pinaka-sensitibo sa pagyeyelo. M. Pagkatapos lasaw ang suwero, kinakailangan na lubusan itong ihalo hanggang makinis, na tumutulong sa pagpapanumbalik ng konsentrasyon ng mga antibodies na nakapaloob sa serum na ito.


Ano ang ginagamit ng mga serological test?

Mga pamamaraan ng serological mga diagnostic sa laboratoryo ginagamit sa pagtuklas ng mga sakit tulad ng echinococcosis, trichinosis, toxocarosis, opisthorchiasis, cysticercosis, toxoplasmosis, amebiasis, giardiasis, upang matukoy ang pagiging epektibo ng kurso ng paggamot at, sa wakas, upang makita ang paulit-ulit na sakit pagkatapos na ganap na gumaling ang pasyente.

Mga pangunahing pamamaraan ng serological diagnosis

Immunofluorescence reaction (RIF)

Ang reaksyong ito ay isang hindi direktang bersyon ng isang serological test, iyon ay, ito ay isinasagawa sa dalawang yugto. Sa unang yugto, ang kinakailangang antibody ay natukoy sa nagpapalipat-lipat na antigen-antibody complex gamit ang antiglobulin, na katulad ng istraktura sa mga immune serum na protina. Ang pagkilala sa nais na antibody ay posible rin sa pamamagitan ng pag-aaral ng pre-prepared antigen preparation sa ilalim ng fluorescent microscope, nang walang paggamit ng mga antiglobulin.

Ang reaksyon ng immunofluorescence ay isang napakahirap na proseso na nangangailangan ng maraming oras at responsibilidad mula sa isang espesyalista. Ang reaksyon ay nagsisimula sa paghahanda ng mga solusyon, pagkatapos ay ang sera at ang kanilang mga control sample ay titrated ( isang proseso na nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang nilalaman ng isang tiyak na sangkap sa pamamagitan ng unti-unting paghahalo ng solusyon sa pagsubok sa isang kinokontrol na halaga ng reagent). Ang mga naunang inihandang dilution at ang kanilang mga control sample ay maingat na inilalapat sa mga glass slide na may antigen. Pagkatapos ang mga paghahanda ay incubated, na sinusundan ng paghuhugas at pagpapatuyo ng hangin. Ang isang manipis na layer ng antiserum ay inilapat sa mga slide na may antigen, pagkatapos kung saan ang isang pangalawang pagpapapisa ng itlog ng mga paghahanda ay ginanap at ang buong nakaraang kadena ng mga aksyon ay paulit-ulit, na nagtatapos sa pagpapatayo ng paghahanda. Bilang resulta, ang paghahanda sa isang glass slide ay ginagamot sa gliserol at sinusuri sa ilalim ng isang fluorescent microscope.

Ang mga resulta ng reaksyon ay tinasa sa isang apat na puntos na sukat, na kung saan ay nailalarawan sa intensity ng ibabaw ng dilaw-berdeng glow ng mga antigen cells:
+ napaka mahinang glow ng cell, na mapapansin lamang sa paligid nito
++ mahinang glow ng cell periphery, ngunit may malinaw na kapansin-pansing berdeng tint
+++/++++ maliwanag na liwanag Kulay berde paligid ng cell
Ang titer ng reaksyon ay itinuturing na isang serum dilution kung saan hindi bababa sa 50% ng mga antigen cells ang nagpapakita ng malinaw na glow sa ibabaw, iyon ay, ang resulta ng reaksyon. +++ o ++++ . Ang halaga ng saklaw ng reaksyon ay mula 1/80 hanggang 1/100.

Ang intensity ng reaksyon ay nakasalalay sa bilang ng mga namuong pulang selula ng dugo sa ilalim ng nabuong mga butas:
isang negatibong reaksyon, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagtitiwalag ng mga pulang selula ng dugo sa ilalim ng mga balon sa anyo ng isang maliit na singsing na may makinis na mga gilid o isang "button"
+ mababang intensity, ang reaksyon na ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng maliliit na solong deposito sa ilalim ng butas. Ang di-agglutinated na mga pulang selula ng dugo ay bumubuo ng isang "maliit na singsing" sa gitna ng balon
++ katamtamang intensity, ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbuo sa ilalim ng butas ng isang "malawak na siksik na singsing" ng mga di-agglutinated erythrocytes
+++ matinding reaksyon, ang mga agglutinated erythrocytes ay bumubuo ng tinatawag na "mga payong", sa gitna kung saan ang mga singsing na nabuo ng mga naayos na non-agglutinated erythrocytes ay malinaw na nakikita
++++ isang matinding matinding reaksyon kung saan ang lahat ng mga pulang selula ng dugo ay nagsasama-sama at, na bumubuo ng "mga payong," na linya sa ilalim ng mga balon.
Ang titer ng reaksyong ito ay itinuturing na ang huling serum dilution kung saan ang halatang agglutination ng mga erythrocytes ay nakita ng hindi bababa sa. +++ , iyon ay, na may matinding o matinding matinding reaksyon.

Ang pagiging maaasahan at kalidad ng mga serological diagnostic na pamamaraan ay nakasalalay sa organisasyon ng panloob at panlabas na kontrol sa laboratoryo, na binubuo ng ilang mga independiyenteng pamamaraan na idinisenyo upang masuri ang kalidad ng mga resulta ng pagsusuri.