Bestemmelse av antall blodplater ved hjelp av en hematologianalysator. Blodplateaggregeringsanalysator, blodplateaggregering er normal

En ny svært sensitiv metode for å studere aggregering - måling av gjennomsnittlig radius - lar deg registrere kinetikken for dannelsen av små aggregater i sanntid
Følsomheten ved måling av spontan aggregering er høyere enn for Breddins apparat
To uavhengige kanaler; i hver kanal måles lystransmisjon og gjennomsnittsradius til aggregatene samtidig
Måleresultater kan registreres ved hjelp av den innebygde skjermen eller datamaskinen

Bruksområder:

Diagnose av tilstanden til blodplatekomponenten av hemostase
Diagnose av medfødte og ervervede hemostaseforstyrrelser
Evaluering av terapieffektivitet
Ny screening medisiner
Vurdering av blodplaters levedyktighet under blodtransfusjon
Toksikologi

NPF BIOLA aggregeringsanalysatorer er designet for å studere aggregeringen av blodplater og andre celler, bestemme konsentrasjonen av celler i en suspensjon, og også vurdere deres form. Aggregering registreres både ved den tradisjonelle turbidometriske metoden og ved en nylig utviklet metode basert på sanntidsestimering av gjennomsnittlig størrelse på aggregater.

Den turbidometriske metoden, foreslått av Born og O'Brien, er for tiden den vanligste i studiet av blodplateaggregering. Den er basert på registrering av endringer i lystransmisjonen av blodplaterikt plasma. Dette gjør det mulig å studere ikke bare aggregering, men også endringer i formen på blodplater. På den annen side kan endringer i form maskere Første etappe aggregering. I tillegg ble det vist at dannelsen av små aggregater (mindre enn 100 blodplater) kanskje ikke påvirker lystransmisjonen til suspensjonen. I 1989 ble Z.A. Gabbasov og medforfattere foreslo ny metode blodplateaggregasjonsstudier.

Metoden er basert på analyse av lystransmisjonsfluktuasjoner (FSP-metoden) forårsaket av en tilfeldig endring i antall partikler i den optiske kanalen. Den relative spredningen av slike fluktuasjoner er proporsjonal med den gjennomsnittlige størrelsen på aggregatene, og brukes til å studere aggregeringskinetikken. Metoden er høysensitiv, noe som gjør den egnet for å studere spontan aggregering og aggregering under påvirkning av lave konsentrasjoner induktorer, samt aggregering av subcellulære partikler og makromolekyler. Utviklingen av denne metodiske tilnærmingen gjorde det også mulig å måle konsentrasjonen av partikler i en omrørt suspensjon.

Programvare leveres med aggregeringsanalysatorer. Programmet kjører på en IBM-kompatibel datamaskin i et Windows-miljø. Den viser aggregeringskurver under et eksperiment, lagrer dem sammen med tidsstempler og tilhørende informasjon på disken, og lar dem ses og behandles senere.

Blodplater, lamellære blodceller, som er fargeløse og er ansvarlige for blodpropp og beskytter kroppen mot blødninger under vevsskade. Når du utfører diagnostikk, blir hver parameter undersøkt i laboratorieforhold. Som et resultat av en blodprøve er kvantitative og kvalitative indikatorer for celler og blodplateaggregering indikert. Basert på innhentede data kan legen trekke en konklusjon om pasientens helsetilstand.

Blodpropp

Situasjonen, kjent for alle, når blodpropper og blødninger stopper, har sine egne standarder for koagulasjonshastigheten. Men hva er blodplateaggregering? Dette er evnen til lamellære celler til å forene seg til en helhet, og danner en blodpropp som dekker den skadede karveggen. Når vev er skadet, beveger individuelle blodplater seg gjennom blodet til skadestedet. På grunn av sine egenskaper er celler i stand til å holde seg sammen (adhesjon) og feste seg til karet. Først forenes lamellcellene til en blodpropp (trombe), den dekker såret og en "skorpe" vises på huden. Dette er hvordan blodplateadhesjon og aggregering skjer i sunn person.

Hvis aggregasjonsindeksen reduseres, kleber ikke lamellære blodceller seg sammen og kan ikke forhindre blødning. Selv mindre vevsskader kan føre til stort blodtap. Alvorlige skader direkte true livet. Inntil limprosessen normaliseres, anbefaler leger å være forsiktig med piercing eller skjærende gjenstander og unngå skader. Hyppige blødninger kan forårsake anemi og utmattelse av kroppen.

Hvis lamellære blodceller opplever økt adhesjon til hverandre, er det fare for blodpropp på innsiden blodårer, som kan føre til veneblokkering. I dette tilfellet vil resultatet av en blodprøve vise at blodplateaggregeringen er økt. Denne tilstanden er kjent som blodfortykkelse eller blodplatehyperaggregering. Eldre alder, og overvektig pasienten øker muligheten for blodpropp. Høy vurderingøker risikoen for hjerneslag, hjerteinfarkt, hjertesykdom.

Blodprøve

Blodplateaggregering og hva det er, gjenspeiles tydelig under testen. Normen og bruddene på indikatoren er også umiddelbart merkbare. Under laboratorieforhold brukes medisinske reagenser til å koagulere blod, noe som fremskynder prosessen med sammenføyning av blodplater.

Basert på reaksjonen gjøres det beregninger og det kan trekkes en konklusjon om pasientens helsetilstand.

Påliteligheten til analyseresultatene påvirkes ikke bare av laboratorieassistenten ogn, men også av pasienten selv. Før du tar en blodprøve, må du forberede deg på den. Testen utføres på tom mage (oftest fra 7 til 10 am) i et privat laboratorium og offentlig klinikk. I flere dager før testen må du følge kostholdet anbefalt av legen din.

24-48 timer før testen, utelukk all stimulerende mat (kaffe, sterk svart te, energiske drinker, alkohol osv.)
Slutt å ta medisiner (etter konsultasjon med legen din) som kan påvirke aggregering
Du må ikke spise mat i 12 timer før testen, du har kun lov til å drikke vann.
Overdreven stress og angst før du donerer blod kan skjeve resultatene
Det anbefales ikke å gi blod hvis du har betennelse, forkjølelse eller under menstruasjon

I laboratorier utstyrt med moderne utstyr utføres mange analyser automatisk, og resultatene beregnes av en datamaskin. En spesiell blodplateaggregeringsanalysator overvåker og teller celler. Denne enheten gjør ikke bare arbeidet til laboratoriepersonalet enklere, men forbedrer også kvaliteten på forskningen. Men også med bruken moderne teknologier I sjeldne tilfeller oppstår feil og resultatet av studien kan bli ugyldig. Fremheve følgende typer aggregeringer:

Spontan blodplateaggregering. Ingen reagenser brukes til bestemmelsen; prøven varmes ganske enkelt opp til en viss temperatur.
Indusert blodplateaggregering. Prøven behandles ved hjelp av et stoff - en induktor.
Økt. Det utgjør en risiko for blodpropp og viser seg fysisk i form av hevelser og andre manifestasjoner.
Redusert. Det kan indikere blodsykdommer og manifesteres fysisk ved utseende av blåmerker, blåmerker, etc.
Moderat. Forekommer hos gravide kvinner.

Etablerte standarder

En overaktiv prosess med aggregering av blodplateblodceller kalles blodplatehyperaggregering. Avvik kan bestemmes ved hjelp av analyse venøst blod. For å utføre forskning bruker klinikker forskjellige reagenser: adenosindifosfat (ADP-aggregering), arakidonsyre, serotonin, ristomycin og andre. Som et resultat av en blodprøve for blodplateaggregering, vil normen ha forskjellige verdier i forskjellige medisinske laboratorier.

Blodplateaggregering med ADP har en normal rate på 30,7–77,7 %
Normen for forskning med ristomycin er 30–60 %
Blodplateaggregering med adrenalin 35–92,5 %
Blodplateaggregering med kollagen er normal 46,4–93,1 %

Induktorer for blodplateaggregering er også forskjellige i konsentrasjonen av stoffet. Vanligvis indikerer resultatet av analysen normen som er vedtatt for et spesifikt reagens, tatt i betraktning sammensetningen og produsenten. Leger anbefaler derfor ikke å dele resultatene av testene med andre pasienter. Ulike prosenter oppnådd ulike metoder, kan faktisk gjenspeile den samme verdien. En blodprøve under graviditet kan vise abnormiteter. I de fleste tilfeller er denne situasjonen normal, og indikatoren går tilbake til normal etter fødsel.

Økt rate

Hvis blodplateaggregasjonstesting viser høy level parameter som studeres, bør du umiddelbart konsultere en lege og begynne behandlingen. En tilsynelatende ubetydelig indikator som gjenspeiler adhesjonen av lamellceller til hverandre er faktisk veldig viktig. Høy blodplateaggregering bør ikke ignoreres. Ifølge statistikk dør hver 250. pasient av trombose.

Blodplateaggregasjonshemmere brukes til behandling, medisinsk utstyr, blodfortynner. Etter ytterligere undersøkelse foreskrives pasienten antikoagulantia, eller novokain og smertestillende.

Blodfortynnere finnes ikke bare i medisiner. Å spise visse matvarer (ingefær, hvitløk, sjømat, sitrusfrukter, etc.) bidrar til å normalisere indikatoren. Etter legens skjønn kan pasienten bli foreskrevet en terapeutisk diett. Avkok av søtkløver og peonrot har vist seg godt.

Redusert sats

Normalisering av indikatoren utføres ved hjelp av medikamenteffekter Og terapeutisk diett. Det er effektive folkemessige rettsmidler Og homøopatiske medisiner Imidlertid bør ethvert middel kun tas etter å ha konsultert en lege. Lavt nivå aggregasjoner er oftest forårsaket av bakteriell eller virusinfeksjoner. Noen ganger er det mangel på ernæring forårsaket av sult eller et ubalansert kosthold.

Behandling medisiner foreskrives når det er et vesentlig avvik fra akseptert norm. I noen tilfeller er pasienten innlagt på sykehus. Apoteker har et utvalg medikamenter (“Dicinone”, “Immunoglobulin”, “Prednisolon” etc.) i en bred prisklasse.

For å sjekke effektiviteten av behandlingen utføres en blodplateaggregasjonstest med noen få dager eller uker etter legen din. Indikatoren måles dynamisk, flere ganger i løpet av behandlingen. Pasienten har forbud mot å innta matvarer og stoffer som forstyrrer blodplateaggregering. Når normalverdien er nådd, stoppes behandlingen som anvist av legen.

Avhengig av testresultatene, hvis pasienten viser seg å ha blodplatehyperaggregering eller omvendt det er en reduksjon i blodplateaggregering, bør du ta forebyggende tiltak om helseforebygging. Den enkleste måten å normalisere en indikator terapeutisk ernæring. I alle aldre er det nødvendig å følge et næringsrikt og balansert kosthold.

I kontakt med

Leverandørkoden: AG02003/LA 230

Nøkkelegenskaper:

En ny svært sensitiv metode for å studere aggregering - måling av gjennomsnittlig radius - lar deg registrere kinetikken for dannelsen av små aggregater i sanntid
Følsomheten ved måling av spontan aggregering er høyere enn for Breddins apparat
To uavhengige kanaler; i hver kanal måles lystransmisjon og gjennomsnittsradius til aggregatene samtidig
Måleresultater kan registreres ved hjelp av den innebygde skjermen eller datamaskinen

Bruksområder:

Diagnose av tilstanden til blodplatekomponenten av hemostase
Diagnose av medfødte og ervervede hemostaseforstyrrelser
Evaluering av terapieffektivitet
Screening for nye medikamenter
Vurdering av blodplaters levedyktighet under blodtransfusjon
Toksikologi

Den turbidometriske metoden, foreslått av Born og O'Brien, er for tiden den vanligste i studiet av blodplateaggregering. Den er basert på registrering av endringer i lystransmisjonen av blodplaterikt plasma. Dette gjør det mulig å studere ikke bare aggregering, men også endringer i formen på blodplater På den annen side kan endringsformen maskere det innledende stadiet av aggregering. I tillegg har det vist seg at dannelsen av små aggregater (mindre enn 100 blodplater) kanskje ikke påvirker lystransmisjonen I 1989 foreslo Z. A. Gabbasov og medforfattere en ny metode for å studere blodplateaggregering.

Metoden er basert på analyse av lystransmisjonsfluktuasjoner (FSP-metoden) forårsaket av en tilfeldig endring i antall partikler i den optiske kanalen. Den relative spredningen av slike fluktuasjoner er proporsjonal med den gjennomsnittlige størrelsen på aggregatene, og brukes til å studere aggregeringskinetikken. Metoden er høysensitiv, noe som gjør den egnet til å studere spontan aggregering, aggregering under påvirkning av lave konsentrasjoner av induktorer, samt aggregering av subcellulære partikler og makromolekyler. Utviklingen av denne metodiske tilnærmingen gjorde det også mulig å måle konsentrasjonen av partikler i en omrørt suspensjon.

Denne typen metoder gjør det mulig å yte mest mulig full vurdering blodplateaggregasjonsevne, siden den er basert på kvantitativ fotometrisk eller spektrofotometrisk registrering av aggregeringsprosessen ved hjelp av aggregografier av ulike design. Slike enheter registrerer grafisk endringer i den optiske tettheten til blodplateplasma når det blandes med aggregeringsstimulerende midler ( ris. 16). Dannelsen av blodplateaggregater fører til en økning i lystransmittansen til blodplateplasma.

Figur 16. Enhet for automatisert studie av blodplateaggregering.

Metoder og underliggende prinsipper.

EN) turbidimetrisk metode Borna er basert på registrering av endringer i lystransmisjonen av blodplaterikt plasma, noe som gjør det mulig å studere ikke bare aggregering, men også endringer i formen til blodplater. En endring i form kan imidlertid maskere det innledende stadiet av aggregering, og dannelsen av små aggregater (50-100 blodplater) påvirker kanskje ikke lystransmisjonen til suspensjonen i det hele tatt.

b) FSP metode Studiet av blodplateaggregering er basert på analysen av lystransmisjonsfluktuasjoner (LTF) forårsaket av en tilfeldig endring i antall partikler i den optiske kanalen. Den relative spredningen av slike fluktuasjoner er proporsjonal med den gjennomsnittlige størrelsen på aggregatene og brukes til å studere aggregeringskinetikken. Metoden er annerledes høy følsomhet, som gjør den egnet for å studere spontan aggregering og aggregering under påvirkning av lave konsentrasjoner av induktorer. Utviklingen av denne metoden gjorde det også mulig å måle konsentrasjon partikler i en omrørt suspensjon.

Et eksempel er å bruke to-kanals laser aggregeringsanalysator blodplater/teller LA220/230(NFP BIOLA, Russland). Denne enheten skiller seg fra et konvensjonelt turbidimetrisk aggregometer hovedsakelig i nærvær av et filter høye frekvenser og en full-bølge likeretter, som tillater bruk av både standard turbidimetrisk metode og FSP metode for å studere blodplateaggregering. Enheten er tilgjengelig i flere versjoner: 220 LA utfører aggregeringsmåling ved å bruke metodene beskrevet ovenfor; 230LA Det har i tillegg funksjon bestemmelse av konsentrasjon blodplater(bruker også FSP-metoden). Evnen til å bestemme blodplatekonsentrasjonen direkte når man studerer deres aggregeringsevne skaper en rekke fordeler: på den ene siden gir den fullstendig diagnostisk informasjon, på den andre gjør den det mulig å bestemme aggregering ved en standard blodplatekonsentrasjon i plasma (200 tusen /μl). Modell 230 LA-2 sammen med de ovennevnte egenskapene lar det deg bestemme von Willebrand-faktoren; Metoden er basert på studiet av agglutinasjon av fikserte blodplater.

Aggregometre BIOLA 230 LA koble til datamaskinen. AGGR 2.41-programvaren er enkel å bruke og lett å lære. Aggregogrammer lagres i datamaskinens minne sammen med pasientdata. Dette gjør det mulig å analysere endringer i aggregeringsindikatorer både hos pasienter under behandling på sykehus og hos polikliniske pasienter.

Resultatene av automatiserte blodplateaggregeringsmålinger presenteres i Figur 17.

Figur 17. Resultater av automatisert bestemmelse av blodplateaggregering (forklaringer i teksten).

De resulterende aggregogrammene analyseres ved flere kvantitative parametere: tidspunkt for begynnelse av aggregering etter tilsetning av tilsvarende stimulator, amplitude av aggregogrammet ved 2. og 6. minutt, total areal av aggregogrammet, etc. Ved bruk av kollagen, trombin, ristomycin som en stimulator for blodplateaggregering, en stor bølge av aggregering registreres, og når det legges til blodplateplasma av små doser ADP - to-bølgeaggregogram ( Fig. 17a).

På normal aggregogrammer oppnådd ved bruk av små doser ADP som stimulator, 1. bølge Den registrerte kurven reflekterer den innledende blodplateaggregeringen forårsaket av introduksjonen av en ekstern stimulator av denne prosessen. 2. bølge assosiert med reaksjonen av frigjøring fra deres egne blodplater biologisk aktive stoffer(adrenalin, ADP, tromboksan A 2 osv.), som forsterker aggregeringen av blodplater som har begynt.

De siste årene har det blitt lagt stor vekt på eksistensen trombocytopati med nedsatt frigjøringsreaksjon, som tilsynelatende inkluderer de fleste av de "uforklarlige" formene for blødning som oppstår i medisinsk praksis. I slike patologier demonstrerer aggregogrammet fraværet av den andre bølgen av aggregering og tidlig blodplate-disaggregering ( ris. 17b).

På Glanzmanns trombasteni i membranene til blodcellene er det ingen spesifikke reseptorer (glykoproteiner IIb og IIIa) som er nødvendige for interaksjonen mellom disse cellene med aggregeringsstimulatorer og fibrinogen. Samtidig blir prosessen med blodplateaggregering under påvirkning av ADP, adrenalin og kollagen kraftig forstyrret ( ris. 17c).

Karakteriser de morfologiske egenskapene til nøytrofiler og deres forløpere.

For tiden brukes i økende grad bestemmelse av antall blodplater og deres fordeling etter størrelse (histogram) ved hjelp av automatiske blodtellere, eller hematologianalysatorer. Disse enhetene er nøyaktige og tillater ekspressdiagnostikk (bestemmelsene er fullført på 1 minutt). Blodplatetelling utføres i henhold til instruksjonene for enheten. Budsjettmodeller av hematologianalysatorer bestemmer bare antall blodplater, mens mer avanserte enheter inneholder en fullstendig analyse av blodplatekomponenten og lar oss snakke om blodplatemorfologi. En detaljert analyse av blodplater på analysatoren lar deg bestemme følgende indikatorer:

· PLT - antall blodplater. Normen er fra 150-400 * 10 9 / l; Når man går utover disse grensene, er utstryksmikroskopi nødvendig.

· MPV - gjennomsnittlig blodplatevolum. "Unge" blodplater har et større volum. MPV øker med alderen. Norm: 8-10 fl

· PDW-bredden på blodplatefordeling etter volum reflekterer graden av blodplate-anisocytose. Normal = 14-16%.

PCT – trombokritt, volumfraksjon fullblod okkupert av blodplater (ligner på hematokrit). Norm = 0,15-0,40 %.

Hematologianalysatoren bygger også en graf over blodplatestørrelsesfordeling:

Ris. 2. Fordeling av blodplater etter volum.

Antall blodplater i blodet til en frisk person varierer fra 150-400 × 10 9 /l.

Redusert antall blodplater (<150 ×10 9 /л) – trombocytopeni- kan observeres i følgende patologiske og fysiologiske tilstander:

Akutt DIC-syndrom;

Akutt leukemi og myelodysplastiske syndromer;

hypo- og aplastisk anemi;

· brudd på dannelsen av trombocytopoietin i kroppen;

· kjemoterapi og strålebehandling;

· trombotisk trombocytopenisk purpura og hemolytisk-uremisk syndrom;

Splenomegali og hepatolienalt syndrom;

heparin-indusert trombocytopeni;

· eclampsia og preeklampsi;

ekstrakorporal sirkulasjon;

· hemodialyse hos pasienter med kronisk nyresvikt, hemosorpsjon;

· intensiv transfusjonsterapi;

paroksysmal nattlig hemoglobinuri;

· immunformer for patologi (SLE og andre kollagenoser, APS, immun trombocytopenisk purpura);

Økt antall blodplater (>400 × 10 9 /l) – trombocytose– observert i følgende tilfeller:

megakaryocytiske og myeloide leukemier,

· erytremi;

· sekundær, reaktiv trombocytose ved splenektomi (etter 1-3 uker),

intrakavitære blødninger etter kirurgiske inngrep,

· 7-10 dager etter utbruddet av subakutt toksisk-infeksiøst DIC-syndrom,

etter akutt blødning,

· kl ondartede neoplasmer(forløper lungesvulster, bukspyttkjertel)

· andre årsaker til kronisk disseminert intravaskulær koagulasjon.

Normal mengde blodplater gir kanskje ikke fullstendig hemostase hvis de funksjonelle egenskapene til blodplater er svekket - trombocytopatier. Derfor studeres også de funksjonelle egenskapene til blodplater, evnen til spontan og indusert aggregering av ulike indusere (agonister) av aggregering: ADP, kollagen, ristocetin, etc. For å studere de funksjonelle egenskapene til blodplater brukes blodplaterikt plasma.

SPØRSMÅL FOR DISKUSJON

1. Internt miljø kropp. Røde blodlegemer: struktur, funksjoner.

2. Erytropoese: stadier og kjennetegn ved forløpere.

3. Regulering av erytropoiesis: vitaminer og mikroelementer.

4. Regulering av erytropoiesis: erytropoietiner og mikromiljø.

5. Erytremi: etiologi, patogenese, symptomer, behandlingsprinsipper.

6. Anemi: definisjon, symptomer, terapi.

7. Klassifisering av anemi etter fargeindeks.

8. Klassifisering av anemi etter alvorlighetsgrad og regenerative evner.

9. Etiologisk og patogenetisk klassifisering av anemi.

10. Trombocytopoiesis: stadier og egenskaper ved forløpere.

11. Metoder for telling av antall blodplater: telling i Goryaev-kammeret.

12. Metoder for å telle antall blodplater: i et tynt blodutstryk.

13. Metoder for telling av antall blodplater: på en hematologianalysator. Blodplateindikatorer.

14. Trombocytopeni: definisjon, årsaker.

15. Trombocytose: definisjon, årsaker. Trombocytopatier.