Антигенната структура на микроорганизмите е много разнообразна. Антигените на някои микроби, например Salmonella, Shigella, Escherichia, са добре проучени. Все още няма достатъчно данни за антигените на други микроорганизми. Микроорганизмите се делят на общи или групови и специфични или типични антигени.
Груповите антигени са общи за два или повече вида микроби, принадлежащи към един и същи род, а понякога и към различни родове. По този начин се откриват общи групови антигени отделни видоверод Salmonella; патогени Коремен тифимат общи групови антигени с патогените на паратиф А и паратиф В (0-1.12).
Специфичните антигени присъстват само в даден тип микроб или дори само в определен тип (вариант) или подтип в рамките на един вид. Определянето на специфични антигени дава възможност да се диференцират микробите в рамките на род, вид, подвид и дори тип (подтип). Така в рамките на рода Salmonella повече от 2000 вида Salmonella са диференцирани чрез комбинация от антигени, а в подвида Shigella Flexner има 5 серотипа (сероварианти).
Въз основа на локализацията на антигените в микробната клетка се прави разлика между соматични антигени, свързани с тялото на микробната клетка, капсулни антигени - повърхностни или обвивни антигени и флагеларни антигени, разположени във флагелата.
Соматичните, О-антигени (от немски ohne Hauch - без дишане), са свързани с тялото на микробната клетка. При грам-отрицателните бактерии О-антигенът е сложен комплекс от липидополизахаридно-протеинова природа. Той е силно токсичен и е ендотоксин за тези бактерии. В патогени кокови инфекции, холерни вибриони, патогени на бруцелоза, туберкулоза и някои анаероби, полизахаридни антигени са изолирани от тялото на микробни клетки, които определят типовата специфичност на бактериите. Като антигени те могат да бъдат активни в чиста формаи в комбинация с липиди.
Флагеларните, Н-антигени (от немски Hauch - дъх), са протеинови по природа и се намират във флагелите на подвижните микроби. Флагеларните антигени се разрушават бързо от топлина и фенол. Те се запазват добре в присъствието на формалдехид. Това свойство се използва при производството на убити диагностични тестове за реакцията на аглутинация, когато е необходимо да се запазят флагелите.
Капсулните, К - антигени, са разположени на повърхността на микробната клетка и се наричат още повърхностни или обвиващи. Те са изследвани най-подробно при микроби от семейството на червата, в които се разграничават Vi-, M-, B-, L- и A-антигени.
От тях Vi антигенът е важен. За първи път е открит в силно вирулентни щамове на тифни бактерии и е наречен вирулентен антиген. Когато човек е имунизиран с комплекс от О- и Vi-антигени, висока степензащита срещу коремен тиф. Vi антигенът се разрушава при 60°C и е по-малко токсичен от O антигена. Намира се и в други чревни микроби, като E. coli.
Защитен (от латински protectionio - защита, защита), или защитен, антиген се образува от антраксни микроби в тялото на животните и се намира в различни ексудати по време на антраксно заболяване. Защитният антиген е част от екзотоксина, секретиран от антраксния микроб и е способен да индуцира развитието на имунитет. В отговор на въвеждането на този антиген се образуват комплемент-фиксиращи антитела. Защитен антиген може да се получи чрез отглеждане на антраксния микроб върху сложна синтетична среда. От протективния антиген е приготвена високоефективна химическа ваксина срещу антракс. Защитни антигени са открити и в патогени, които причиняват чума, бруцелоза, туларемия и магарешка кашлица.
Инфекциозните антигени са антигени на бактерии, вируси, гъбички и протозои.
Съществуват следните видове бактериални антигени:
1) специфични за групата (намерени в различни видовесъщия род или семейство);
2) видоспецифични (откриват се в различни представители на един и същи вид);
3) специфични за типа (определяне на серологични варианти - серовари, антигеновари - в рамките на един вид).
В зависимост от местоположението в бактериалната клетка има:
1) O – AG – полизахарид; е част от клетъчната стена на бактериите. Определя антигенната специфичност на липополизахарида на клетъчната стена; той разграничава серовари на бактерии от същия вид. O – AG е слабо имуногенен. Той е термично стабилен (издържа на кипене за 1-2 часа), химически стабилен (издържа на обработка с формалдехид и етанол);
2) липид А – хетеродимер; съдържа глюкозамин и мастна киселина. Има силна адювантна, неспецифична имуностимулираща активност и токсичност;
3) N – AG; е част от бактериалните флагели, основата му е протеинът флагелин. Термично лабилен;
4) K – AG – хетерогенна група от повърхностни, капсулни антигени на бактерии. Разположени са в капсула и са свързани с повърхностния слой липополизахарид на клетъчната стена;
5) токсини, нуклеопротеини, рибозоми и ензими на бактерии.
Вирусни антигени:
1) суперкапсидни антигени - повърхностна обвивка;
2) протеинови и гликопротеинови антигени;
3) капсид - черупка;
4) нуклеопротеинови (ядрени) антигени.
Всички вирусни антигени са Т-зависими.
Защитните антигени са набор от антигенни детерминанти (епитопи), които предизвикват най-силния имунен отговор, който предпазва организма от повторно заразяване с даден патоген.
Начини за проникване на инфекциозни антигени в тялото:
1) през увредена и понякога непокътната кожа;
2) през лигавиците на носа, устата, стомашно-чревния тракт и пикочно-половия тракт.
Хетероантигените са антигенни комплекси, общи за представители на различни видове или общи антигенни детерминанти на комплекси, които се различават по други свойства. Могат да възникнат кръстосани имунологични реакции поради хетероантигени.
В микроби различни видовеи при хората има общи антигени, които са подобни по структура. Тези явления се наричат антигенна мимикрия.
Суперантигените са специална групаантигени, които в много малки дози предизвикват поликлонално активиране и пролиферация на голям брой Т-лимфоцити. Суперантигени са бактериални ентеротоксини, стафилококови, холерни токсини и някои вируси (ротавируси).
Въпрос 12
Въпрос 13
Въпрос 14
Антитела (имуноглобулини, IG, Ig) са специален клас гликопротеини, присъстващи на повърхността на В-лимфоцитите под формата на мембранно свързани рецептори и в кръвния серум и тъканната течност под формата на разтворими молекули, и имат способността да се свързват много селективно към специфични видове молекули, които в тази връзка се наричат антигени. Антителата са най-важният фактор за специфичния хуморален имунитет. Антителата се използват от имунната система за идентифициране и неутрализиране на чужди обекти - като бактерии и вируси. Антителата изпълняват две функции: антиген-обвързванеи ефектор (те предизвикват един или друг имунен отговор, например, те задействат класическата схема на активиране на комплемента).
Антителата се синтезират от плазмените клетки, които се превръщат в някои В лимфоцити, в отговор на наличието на антигени. За всеки антиген се образуват специализирани плазмени клетки, съответстващи на него, които произвеждат антитела, специфични за този антиген. Антителата разпознават антигените, като се свързват със специфичен епитоп – характерен фрагмент от повърхностната или линейна аминокиселинна верига на антигена.
Антителата се състоят от две леки вериги и две тежки вериги. При бозайниците има пет класа антитела (имуноглобулини) - IgG, IgA, IgM, IgD, IgE, които се различават по структурата и аминокиселинния състав на тежките вериги и по изпълняваните ефекторни функции.
Антителата са относително големи (~150 kDa - IgG) гликопротеини със сложна структура. Състои се от две идентични тежки вериги (H-вериги, на свой ред състоящи се от V H, CH 1, шарнирни, CH 2- и CH 3-домейни) и две идентични леки вериги (L-вериги, състоящи се от V L - и C L - домени) . Олигозахаридите са ковалентно свързани с тежките вериги. Използвайки папаинова протеаза, антителата могат да бъдат разцепени на две Fab. фрагмент антиген подвързване- антиген-свързващ фрагмент) и oneFc (англ. фрагмент кристализиращ се- фрагмент, способен на кристализация). В зависимост от класа и изпълняваните функции, антителата могат да съществуват както в мономерна форма (IgG, IgD, IgE, серумен IgA), така и в олигомерна форма (димер-секреторен IgA, пентамер - IgM). Общо има пет вида тежки вериги (α-, γ-, δ-, ε- и μ-вериги) и два вида леки вериги (κ-верига и λ-верига).
Антителата (имуноглобулините) са протеини, които се синтезират под въздействието на антиген и реагират специфично с него.
Те се състоят от полипептидни вериги. Има четири структури в имуноглобулиновата молекула:
1) първичен – това е последователност от определени аминокиселини. Изграден е от нуклеотидни триплети, генетично е детерминиран и определя основните последващи структурни особености;
2) вторичен (определя се от конформацията на полипептидните вериги);
3) третичен (определя характера на местоположението на отделните участъци от веригата, които създават пространствена картина);
4) кватернер. Биологично възниква от четири полипептидни вериги активен комплекс. Веригите по двойки имат еднаква структура.
Повечето имуноглобулинови молекули са съставени от две тежки (H) вериги и две леки (L) вериги, свързани с дисулфидни връзки. Леките вериги се състоят от две k-вериги или две l-вериги. Тежките вериги могат да бъдат един от пет класа (IgA, IgG, IgM, IgD и IgE).
Всяка верига има две секции:
1) постоянен. Остава постоянен в аминокиселинната последователност и антигенността в рамките на даден клас имуноглобулини;
2) променлива. Характеризира се с голяма вариабилност в аминокиселинната последователност; в тази част от веригата протича реакцията на съединението с антигена.
Всяка молекула IgG се състои от две свързани вериги, краищата на които образуват две антиген-свързващи места. Вариабилният регион на всяка верига съдържа хипервариабилни региони: три в леките вериги и четири в тежките вериги. Вариациите на аминокиселинната последователност в тези хиперпроменливи области определят специфичността на антитялото. При определени условия тези хиперпроменливи области могат да действат и като антигени (идиотипове).
Не може да има по-малко от два антиген-свързващи центъра в имуноглобулинова молекула, но единият може да бъде обвит вътре в молекулата - това е непълно антитяло. Той блокира антигена, така че да не може да се свърже с пълни антитела.
По време на ензимното разграждане на имуноглобулините се образуват следните фрагменти:
1) Fc фрагментът съдържа участъци от двете постоянни части; няма свойството на антитяло, но има афинитет към комплемента;
2) Fab фрагментът съдържа лека верига и част от тежка верига с едно антиген-свързващо място; има свойството на антитяло;
3) F(ab)T2 фрагментът се състои от два взаимно свързани Fab фрагмента.
Други класове имуноглобулини имат същата основна структура. Изключение прави IgM: той е пентамер (състои се от пет основни единици, свързани в Fc краищата), а IgA е димер.
Индивидуалните структури на микроорганизмите, екзо- и ендотоксини, имат свойствата на пълноценни антигени. Различават се общи антигени за сродни видове – видови и групови, и типоспецифични антигени, характерни за определен тип (вариант).
Въз основа на тяхното местоположение в микробната клетка антигените се класифицират на капсулни антигени (при бактериите, които образуват капсули), повърхностни антигени - антигени на клетъчната стена (К-антигени), соматични (О-антигени) и флагеларни (Н-антигени). Капсулните антигени са най-добре проучени в E. coli. Има няколко повърхностни антигена, които изграждат K-антигена, които се обозначават с латинските букви A, B и L. A-антигенът е капсулен, B- и L-антигените са повърхността на клетъчната стена и в тяхната химическа структура са полизахариди и полипептиди.
Соматичните О-антигени са локализирани във вътрешния слой на клетъчната стена и цитоплазмената мембрана на клетката и представляват липополизахарид-полипептиден комплекс със специфичност и имуногенни свойства. При грам-отрицателните бактерии О-антигенът е техният ендотоксин. Соматичният антиген е термостабилен.
Флагеларните Н-антигени присъстват във всички подвижни бактерии. Това са термолабилни протеинови комплекси, които в много ентеробактерии имат два набора детерминанти - специфична (първа) и неспецифична (втора или групова) фази.
Екзотоксините на повечето микроорганизми имат свойствата на пълноценни антигени с изразена хетерогенност в рамките на вида и рода. Спорите също имат антигенни свойства: те съдържат антиген, общ за вегетативната клетка и антиген на спората.
Сред бактериалните антигени се разграничават така наречените защитни или защитни антигени. Антителата, синтезирани срещу тези антигени, предпазват тялото от инфекция от този микроб. Защитни свойства имат капсулните антигени на пневмококите, М-протеинът на стрептококите, А-протеинът на стафилококите, екзотоксинът на антраксния бацил, протеиновите молекули на вътрешните слоеве на стената на някои грам-отрицателни бактерии и др.. Пречистените защитни антигени нямат пирогенни и алергенни свойства. Установено е, че в резултат на естествения подбор сред микробите възникват щамове, чиито антигени са подобни на антигените на човешкия и животинския организъм. При заразяване с такива микроби имунната система не реагира на тях, тъй като лимфоцитите не ги разпознават. Например, стрептококите имат антигени, които са общи за тъканните антигени на бозайници; в този случай, когато са заразени, патогенът ще се размножава безпрепятствено в тялото и ще причини смъртта му.
Антигените на някои микроби имат адхезивни свойства. Природата на адхезивността все още е до голяма степен неясна. В допълнение към връзката с определени антигенни структури се отбелязва такава с определен набор от ензими (например при Vibrio cholerae, невраминидаза, глауронидаза).
Всички антигени (естествени и изкуствени) се състоят от два компонента. Една от тях е представена от високомолекулно колоидно вещество (протеин), което определя неговите антигенни свойства. Другият компонент се състои от аминокиселинни остатъци, полизахариди или липиди, разположени на повърхността на протеина. Тя определя специфичността на антигена и се нарича детерминантна група. Така не цялата антигенна молекула функционира като детерминантна група, а само относително малка част от нея, която директно реагира с антитялото. На повърхността на антигена обикновено има няколко детерминантни групи, които имат еднаква или подобна специфичност, което определя поливалентността на антигена. Изследването на специфичността на антигените и природата на детерминантните групи има важно теоретично и практическо значение. Чрез промяна на детерминантната група на антигена е възможно целенасочено да се промени неговата специфичност, т.е. да се конструират изкуствени антигени с нова имунохимична специфичност.
Общите антигени сред представители на различни видове микроби, животни и растения се наричат хетерогенни. Например, хетерогенен Forsman антиген се намира в органите морско свинче, в овчи еритроцити и в салмонела. Хетерогенните антигени се състоят от протеини, липиди и въглехидрати; липидите и въглехидратите определят тяхната специфичност. Хетерогенните антигени се различават един от друг по своите химичен състав.
Съществуването на общи хетероантигени при животни и паразитни микроби в телата им може да се разглежда като адаптиране на различни патогенни микроби към съществуване в тялото поради общи антигени. В резултат на такова маскиране организмът не реагира достатъчно активно на инфекция, причинена от патогенни агенти, в резултат на което остава незащитен срещу тях.
Различават се следните видове бактериални антигени: групово специфични (откриват се в различни видове от един и същи род или семейство); видово-специфични (откриват се в различни представители на един и същи вид); тип-специфични (определяне на серологични варианти - серовари).
В зависимост от местоположението в бактериалната клетка има:
1) флагеларни N-AG, локализирани във флагелата на бактериите, чиято основа е флагелинният протеин, който е термолабилен;
2) соматичният O-AG е свързан с бактериалната клетъчна стена. Базиран е на LPS; използва се за разграничаване на сероварианти на бактерии от същия вид. Стабилен е на топлина, не се срутва при продължително кипене и е химически стабилен (издържа на обработка с формалдехид и етанол);
3) капсулните K-AG са разположени на повърхността на клетъчната стена. Въз основа на чувствителността към топлина има 3 типа K-AG: A, B, L. Най-голямата термична стабилност е характерна за тип A, тип B може да издържи на нагряване до 60 0 C за 1 час, тип L бързо се срутва при тази температура. На повърхността на причинителя на коремен тиф и други ентеробактерии, които са силно вирулентни, може да се открие специална версия на капсулния антиген - Vi-антиген;
4) бактериалните протеинови токсини, ензимите и някои други протеини също имат антигенни свойства.
Вирусни антигени:
1) суперкапсидни АГ - тези с повърхностна обвивка;
2) протеинови и гликопротеинови антигени;
3) капсид - черупка;
4) нуклеопротеинови (с форма на сърце) антигени.
9.5. Антитела и образуване на антитела: първичен и вторичен отговор. Степен имунен статус: основни показатели и методи за тяхното определяне.”
антитела -това са гама-глобулини, произведени в отговор на въвеждането на антиген, способни специфично да се свързват с антигена и да участват в много имунологични реакции. Те се състоят от полипептидни вериги: две тежки (H) вериги и две леки (L) вериги. Тежките и леките вериги са свързани заедно по двойки чрез дисулфидни връзки. Съществува и дисулфидна връзка между тежките вериги, т. нар. "шарнирна" област, която е отговорна за взаимодействието с първия компонент на комплемента С1 и неговото активиране от класически начин. Има 2 вида леки вериги (капа и ламбда) и 5 вида тежки вериги (алфа, гама, мю, епсилон и делта). Вторичната структура на полипептидните вериги на Ig молекулата има доменна структура. Означава, че отделни зониверигите са нагънати в глобули (домени). Има С-домени - с постоянна структура на полипептидната верига и V-домени (вариабилни с променлива структура). Вариабилните домени на леката и тежката верига заедно образуват регион, който специфично се свързва с антигена. Това е антиген-свързващият център на Ig молекулата, или паротоп. Ензимната хидролиза на Ig произвежда три фрагмента. Два от тях са способни да се свързват специфично с антиген и се наричат антиген-свързващи Fab фрагменти. Третият фрагмент, способен да образува кристали, е наречен Fc. Той е отговорен за свързването с рецепторите на мембраната на клетките на макроорганизма. В структурата на Ig молекулите се откриват допълнителни полипептидни вериги. По този начин полимерните молекули IgM и IgA съдържат J-пептид, който осигурява превръщането на полимерния Ig в секреторна форма. Секреторните Ig молекули, за разлика от серумните, имат специален S-пептид, наречен секреторен компонент. Той осигурява преноса на Ig молекулата през епителна клеткав лумена на органа и го предпазва в секрецията на лигавиците от ензимен разпад. Рецепторът Ig, който е локализиран върху цитоплазмената мембрана на В-лимфоцитите, има допълнителен хидрофобен трансмембранен М-пептид.
Има 5 класа имуноглобулини при хората:
1) имуноглобулин клас Gе мономер, който включва 4 подкласа (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), които се различават един от друг по аминокиселинен състав и антигенни свойства, има 2 антиген-свързващи центъра. Той представлява 70-80% от всички серумни Ig. Полуживот 21 дни. Основните свойства на IgG включват: те играят основна роля в хуморалния имунитет в инфекциозни заболявания; прониква през плацентата и образува антиинфекциозен имунитет при новородени; способен да неутрализира бактериалните екзотоксини, да фиксира комплемента и да участва в реакцията на утаяване. Той се открива добре в кръвния серум в пика на първичния и вторичния имунен отговор. IgG4 участва в развитието алергична реакция 1 вид.
2) имуноглобулин клас М- пентамер, който има 10 антиген-свързващи места. Полуживот 5 дни. Той представлява около 5-10% от всички серумни Ig. Образуван в началото на първичния имунен отговор, той е и първият, който започва да се синтезира в тялото на новороденото - определя се още на 20-та седмица вътрематочно развитие. Свойства: не прониква през плацентата; появява се в плода и участва в антиинфекциозната защита; способни да аглутинират бактерии, да неутрализират вируси и да активират комплемента; играят важна роля в елиминирането на патогени от кръвния поток и активирането на фагоцитозата; се формират върху ранни стадии инфекциозен процес; се характеризират с висока активност в реакциите на аглутинация, лизис и свързване на ендотоксини на грам-отрицателни бактерии.
3) имуноглобулин клас А –съществува в серумни и секреторни форми. Серумният Ig представлява 10-15%, мономер, има 2 антиген-свързващи центъра, полуживот 6 дни. Секреторният Ig съществува в полимерна форма. Съдържа се в млякото, коластрата, слюнката, слъзния, бронхиалния, стомашно-чревния секрет, жлъчката, урината; участват в местния имунитет, предотвратяват прикрепването на бактерии към лигавицата, неутрализират ентеротоксина, активират фагоцитозата и допълват.
4) имуноглобулин клас Е-мономери, които представляват 0,002%. По-голямата част от алергичните антитела - реагини - принадлежат към този клас. Нивата на IgE се повишават значително при хора, които страдат от алергии и са заразени с хелминти.
5) имуноглобулин клас D –това е мономер, представляващ 0,2%. Плазматичните клетки, секретиращи IgD, са локализирани главно в сливиците и аденоидната тъкан. Участва в развитието на локалния имунитет, има антивирусно действие, в редки случаи активира комплемента, участва в диференциацията на В-клетките, допринася за развитието на антиидиотипен отговор, участва в автоимунни процеси.
Макроорганизмът придобива способността да синтезира АТ доста рано. Вече на 13 седмици ембрионален периодВ развитието се появяват В-лимфоцити, които синтезират IgM и на 20-та седмица този Ig може да бъде открит в кръвния серум. Концентрацията на антитела достига максимум по време на пубертета и остава на високи нива през цялото време репродуктивен период. IN старостнивата на антителата намаляват. Увеличаване на количеството Ig се наблюдава при инфекциозни заболявания, автоимунни заболявания, намаление се отбелязва при някои тумори и имунодефицитни състояния. Производството на антитела в отговор на антигенен стимул има характерна динамика. Има латентна, логаритмична, стационарна и намаляваща фаза. По време на латентната фаза производството на антитела практически не се променя и остава на базалното ниво. По време на логаритмичната фаза се наблюдава интензивно нарастване на броя на антиген-специфичните В-лимфоцити и настъпва повишаване на титъра на антителата. В стационарната фаза броят на специфичните антитела и клетките, които ги синтезират, достига максимум и се стабилизира. Във фазата на спад се наблюдава постепенно намаляване на титрите на антителата. При първоначален контактс антигена се развива първичен имунен отговор. Характеризира се с дълги латентни (3-5 дни) и логаритмични (7-15 дни) фази. Първите диагностично значими титри на антитела се регистрират на 10-14-ия ден от момента на имунизацията. Стационарната фаза продължава 15-30 дни, а фазата на спад продължава 1-6 месеца. В резултат на първичния имунен отговор се образуват множество клонинги на антиген-специфични В-лимфоцити: клетки, произвеждащи антитела и В-лимфоцити на имунологичната памет, и вътрешна средаВ макроорганизма IgG и/или IgA (както и IgE) се натрупват във високи титри. С течение на времето отговорът на антителата избледнява. Повторен контакт имунна системасъс същия антиген води до образуването вторичен имунен отговор. Вторичният отговор се характеризира със съкратена латентна фаза (от няколко часа до 1-2 дни). Логаритмичната фаза се характеризира с по-интензивна динамика на растеж и по-високи титри на специфични антитела. По време на вторичен имунен отговор, тялото незабавно, преобладаващо, синтезира IgG. Характерната динамика на производството на антитела се дължи на готовността на имунната система да се срещне отново с антигена поради формирането на имунологична памет.
Феноменът на интензивно образуване на антитела при многократен контакт с антиген се използва широко за практически цели, например при ваксинопрофилактиката. За да се създаде и поддържа имунитет на високо защитно ниво, схемите за ваксиниране предвиждат първично приложение на антиген за формиране на имунологична памет и последващи реваксинации през различни интервали от време.
Същото явление се използва за получаване на високоактивни терапевтични и диагностични имунни серуми (хиперимунни). За да направите това, животните или донорите получават многократни инжекции с антигенни препарати по специална схема.
Имунен статус- тя е структурна и функционално състояниеимунната система на индивида, определена от набор от клинични и лабораторни имунологични параметри.
Имунният статус е повлиян следните фактори: 1) климатогеографски (температура, влажност, слънчева радиация, дължина дневни часове); 2) социални (храна, условия на живот, професионални рискове); 3) околната среда (замърсяване заобикаляща среда радиоактивни вещества, използване на пестициди в селското стопанство); 4) влиянието на диагностичните и терапевтичните манипулации, лекарствена терапия; 5) стрес.
Имунният статус може да се определи чрез извършване на набор от лабораторни изследвания, включително оценка на състоянието на неспецифични фактори на резистентност, хуморален (В) и клетъчен (Т) имунитет. Оценката на имунния статус се извършва в клиниката по време на трансплантация на органи и тъкани, автоимунни заболявания, алергии, за проследяване ефективността на лечението на заболявания, свързани с нарушена имунна система. Оценката на имунния статус най-често се основава на определяне на следните показатели:
1) общ клиничен преглед(оплаквания на пациента, професия, преглед);
2) състоянието на естествените резистентни фактори (определяне на фагоцитоза, комплемент, интерферонов статус, резистентност към колонизация);
3) хуморален имунитет (определяне на имуноглобулини от клас G, M, A, D, E в кръвния серум);
4) клетъчен имунитет (оценява се по броя на Т-лимфоцитите - реакция на образуване на розетка, определяне на съотношението на помощници и супресори на Т4 и Т8 лимфоцити, което обикновено е приблизително 2);
5) допълнителни тестове (определяне на бактерицидния капацитет на кръвния серум, титруване на компонентите на комплемента C3, C4, определяне на съдържанието С-реактивен протеинв кръвен серум, определяне на ревматоидни фактори.
Всеки микроорганизъм, колкото и примитивен да е, съдържа няколко антигена. Колкото по-сложна е структурата му, толкова повече антигени могат да бъдат намерени в състава му.
В различни микроорганизми, принадлежащи към едни и същи систематични категории, се разграничават групово-специфични антигени - те се срещат в различни видове от един и същи род или семейство, видово-специфични - в различни представители на един и същи вид и типоспецифични (вариантни) антигени - в различни вариантив рамките на един и същи вид. Последните са разделени на серологични варианти или серовари. Сред бактериалните антигени има Н, О, К и др.
Флагеларни Н-антигени.Както подсказва името, тези антигени са част от бактериалните флагели. H-антгенът е флагелинов протеин. При нагряване се разрушава, а след обработка с фенол запазва антигенните си свойства.
Соматичен О-антиген.Преди това се смяташе, че О-антигенът се съдържа в съдържанието на клетката, нейната сома, и затова се нарича соматичен антиген. Впоследствие беше установено, че този антиген е свързан с бактериалната клетъчна стена.
О-антигенът на грам-отрицателните бактерии е свързан с LPS на клетъчната стена. Детерминантните групи на този съседен сложен антиген са крайните повтарящи се единици на полизахаридните вериги, свързани с основната му част. Съставът на захарите в детерминантните групи, както и техният брой, различни бактериине същото. Най-често съдържат хексози (галактоза, глюкоза, рамноза и др.), аминозахар (М-ацетилглюкозамин). О-антигенът е термично стабилен: запазва се при варене в продължение на 1-2 часа и не се разрушава след обработка с формалдехид и етанол. Когато животните се имунизират с живи култури, които имат флагели, се образуват антитела към О- и Н-антигените, а при имунизация с варена култура се образуват антитела само към О-антгена.
К-антигени (капсула).Тези антигени са добре проучени при Escherichia и Salmonella. Те, подобно на О-антигените, са тясно свързани с LPS на клетъчната стена и капсулата, но за разлика от О-антигена те съдържат главно киселинни нолизахариди: глюкуронова, галактуронова и други уронови киселини. Въз основа на тяхната чувствителност към температура К-антигените се делят на А-, В- и L-антигени. Най-термостабилни са А-антигените, които издържат на кипене над 2 ч. В-антигените издържат нагряване при температура 60°С за един час, а L-антигените се разрушават при нагряване до 60°С.
К-антигените са разположени по-повърхностно от О-антигените и често маскират последните. Следователно, за да се идентифицират О-антигените, е необходимо първо да се унищожат К-антигените, което се постига чрез кипене на културите. Капсулните антигени включват така наречения Vi антиген. Намира се в тиф и някои други ентеробактерии, които са силно вирулентни, поради което този антиген се нарича вирулентен антиген.
Капсулни антигени с полизахаридна природа са идентифицирани в пневмококи, Klebsiella и други бактерии, които образуват изразена капсула. За разлика от групово-специфичните О-антигени, те често характеризират антигенните характеристики на определени щамове (варианти) на даден вид, които на тази основа се разделят на серовари. При антраксните бацили капсулният антиген се състои от полипептиди.
Антигени на бактериални токсини. Бактериалните токсини имат пълни антигенни свойства, ако са разтворими съединения с протеинова природа.
Ензимите, произведени от бактерии, включително факторите на патогенност, имат свойствата на пълноценни антигени.
Защитни антигени.Първоначално открит в ексудат на засегната тъкан по време на антракс. Имат силно изразени антигенни свойства, осигуряващи имунитет към съответния инфекциозен агент. Някои други микроорганизми също образуват защитни антигени, когато навлязат в тялото на гостоприемника, въпреки че тези антигени не са техни постоянни компоненти.
Антигени на вируси.Всеки вирион на всеки вирус съдържа различни антигени. Някои от тях са специфични за вируса. Други антигени включват компоненти на клетката гостоприемник (липиди, въглехидрати), които са включени във външната й обвивка. Антигените на простите вириони са свързани с техните нуклеокапсиди. Според химичния си състав те спадат към рибонуклеопротеините или дезоксирибонуклеопротеините, които са разтворими съединения и затова се означават като S-антигени (solutio-разтвор). В сложните вириони някои антигенни компоненти са свързани с нуклеокапсиди, други с гликопротеини на външната обвивка. Много прости и сложни вириони съдържат специални повърхностни V-антигени - хемаглутинин и ензима невраминидаза. Антигенната специфичност на хемаглутинина варира при различните вируси. Този антиген се открива в реакцията на хемаглутинация или нейния вариант - реакцията на хемадсорбция. Друга особеност на хемаглутинина се проявява в антигенната функция да предизвиква образуването на антитела - антихемашпотинини и да взаимодейства с тях в реакцията на инхибиране на хемаглутинацията (HRI).
Вирусните антигени могат да бъдат групово специфични, ако се намират в различни видове от един и същи род или семейство, и типоспецифични, присъщи на отделни щамове от един и същи вид. Тези разлики се вземат предвид при идентифицирането на вируси.
Наред с изброените антигени, антигените на клетката гостоприемник могат да присъстват във вирусни частици. Например, грипен вирус, отглеждан върху алантоисната мембрана на пилешки ембрион, реагира с антисерума, получен за алантоисната течност. Същият вирус, взет от белите дробове на заразени мишки, реагира с антисерум на лесни данниживотни и не реагира с антисерум на алантоисна течност.
Хетерогенни антигени (хетероантигени).Общите антигени, открити в представители на различни видове микроорганизми, животни и растения, се наричат хетерогенни. Например, хетерогенен антиген Forsman се намира в протеиновите структури на органите на морски свинчета, овчи еритроцити и салмонела.