Тест кит за имунохроматографско едноетапно качествено определяне на окултна кръв във фекалиите.

Стомашно-чревни заболявания като рак на дебелото черво, язви, полипи, колит, дивертикулит и ректални фисури са ранни стадииразвитието може да не причини никакви видими симптоми. Откриването им през този период е трудно.
Прост и надежден диагностичен метод в този случай може да бъде откриването на фекална окултна кръв (FOB).

Съединение:

• индивидуална таблетка, индивидуално опакована вакуумна опаковкаот алуминиево фолио със сушител,
• пипета с контейнер за въвеждане на проба,
• реагент за разреждане на фекална проба.

Чувствителност: 50 ng/ml или 6 mcg в 1 грам изпражнения.
Време за анализ: 5 минути.
Една таблетка е предназначена за едно определяне.

Срок на годност: 24 месеца.

КРАТКИ УКАЗАНИЯ ЗА УПОТРЕБА

Извършване на анализ

1. Преди да започнете определянето, всички проби от серум (плазма) или цяла кръвтрябва да се съхранява при стайна температура (+18 - 25 o C) най-малко 20 минути.

2. Отворете флакона с реагента, за да разредите пробата.

3. Вземете фекална проба с пръчка за вземане на проби, поставете я във флакона, затворете капачката и разклатете, за да смесите пробата и буфера.

4. Отворете опаковката на таблета, извадете таблета и го поставете върху чиста повърхност с тестовата зона нагоре.

5. Добавете 5 капки (~ 120 µl) в кръглото прозорче на таблетката, отбелязано с S (Проба).

6. След 5 минути (но не по-късно от 10 минути) визуално оценете резултата от реакцията.

Интерпретация на резултатите от анализа

Откриване на 2 успоредни розови ивици на нивото на маркиране в тестовата зона на таблета TИ СЪСпоказва положителен резултатанализ.

Откриване на първата линия на червен цвят в тестовата зона на таблета на нивото на маркиране СЪСпоказва отрицателен резултат от теста.

В случай, че в тестовата зона червената линия е на нивото на маркировката СЪСлипсваща или една червена линия на нивото на маркировка Tрезултатът от теста е невалиден и определянето трябва да се извърши с друга таблетка.

Условия за съхранение и работа

Комплектът трябва да се съхранява в опаковката на производителя при температура от +2 - 30 o C на сухо място през целия срок на годност. Замразяването на компонентите на комплекта не е разрешено.

Срокът на годност на комплекта е 24 месеца.

За получаване на надеждни резултати е необходимо стриктно спазванеинструкции за употреба.

Обща информация за изследването

Колоректалният рак е един от най-често срещаните видове тумори, както по отношение на честотата, така и по отношение на смъртни случаи. Заема второ място по смъртност сред злокачествени новообразуванияпри мъжете и жените. Всяка година в света има повече от 1 милион нови случая на заболяването, а годишната смъртност надхвърля 500 000. Рискът от развитие на заболяването нараства с възрастта, 90% от засегнатите са над 55 години. Според епидемиологичните данни наследствеността е причина за развитието на колоректален рак при 5-30% от пациентите. ДА СЕ наследствени синдроми, при които рискът от развитие значително нараства, включват фамилна аденоматозна полипоза, синдром на Линч, ювенилна полипоза и някои по-редки състояния. 5-годишната преживяемост на пациента зависи от стадия на рака към момента на поставяне на диагнозата.

Колоректалният рак се развива бавно в продължение на няколко години. Туморът често възниква в резултат на трансформацията на полип на чревната лигавица. Този процес може да отнеме от 8 до 12 години. Не всички видове полипи са способни да се превърнат в тумор, но тяхното присъствие, особено в големи количества, значително увеличава риска от развитие на колоректален рак. Други предракови състояния включват дисплазия, която е характерна за хора с улцерозен колит и болест на Crohn.

При колоректален рак кръвта със изпражненияможе да се освободи много преди първите симптоми на заболяването. Скрининговото изследване на изпражненията за окултна кръв сред хората в риск помага за навременното диагностициране на заболяването и намаляване на смъртността от колоректален рак с 15-33%. Ефективността на такъв скрининг е потвърдена от няколко проучвания.

За откриване на скрита кръв в изпражненията най-често се използват тестове с гваяк или бензидин, но те изискват стриктно спазване на определени правила, по-специално спазване на диета няколко дни преди изследването. Освен това, за разлика от гваяковия тест, съвременните имунохимични методи са високочувствителни и специфични.

Имунотестът за фекална окултна кръв (FOB) е доказано, че е най-удобният метод за изследване поради своята лекота и ефективност при управлението на пациентите. Позволява ви да определите точно количеството хемоглобин (Hb) в изпражненията, без да се налага пациентите да спазват диета или да променят начина си на живот. Методът се основава на реакция на аглутинация антиген-антитяло между човешкия хемоглобин, присъстващ в пробата, и антихемоглобиновото антитяло върху латексови частици. Аглутинацията се измерва като увеличение при абсорбция от 570 nm, чиято единица е пропорционална на количеството човешки хемоглобин в пробата. Проучването определя скрита кръв, които навлязоха в чревния лумен в долните отдели стомашно-чревния тракт, тъй като хемоглобинът от горните секции се разрушава при преминаване през храносмилателния тракт.

Положителният резултат от теста изисква допълнително изследване за изясняване на причините, тъй като източникът на малка кръвозагуба може да бъде доброкачествен полип, дивертикул, хемороиди или възпалително заболяване на червата. Средно 1-5% от хората имат положителен тест за скрита кръв, от които 2-10% са диагностицирани с рак, а 20-30% са диагностицирани с аденоматозни полипи на дебелото черво. Ако окултната кръв е положителна, се правят допълнителни изследвания за търсене на рак, полип или друга причина за кървене. За потвърждаване на диагнозата на пациентите при липса на противопоказания се предписва колоноскопия, сигмоидоскопия или рентгенография с двоен контраст. Липсата на кръв в изпражненията не изключва напълно възможността за колоректален рак, така че хората с висок риск(ако има фамилна анамнеза), ендоскопията се препоръчва дори ако резултатът от теста е отрицателен.

За какво се използва изследването?

• За скрининг за рак на дебелото черво и ректума.
• За диагностициране на кървене от долни секциистомашно-чревния тракт с някои доброкачествени и възпалителни заболявания(полипи на дебелото черво, болест на Crohn, язвен колит, хемороиди).

Кога е насрочено изследването?

• При профилактичен годишен преглед на лица на възраст 50-75г.
• Ако подозирате скрито чревно кървене.

Каталожен номер: 4091-3L Опаковка: 20 теста/оп

справка

Има повече от 600 000 случая на колоректален рак по света всяка година, който е третият най-често срещан рак (1). Както при всеки друг сорт ракови заболявания, откриване на огнища на ранна фазазначително увеличава процента на преживяемост на пациентите (2). Сред хората над 45 години 10% имат колоректални полипи, от които 1% стават ракови (3). Въз основа на факта, че много полипи, по-големи от 0,5 cm, могат да кървят, изследването за окултна кръв в изпражненията изглежда е прост и евтин метод за скрининг за диагностициране на рак на дебелото черво в сравнение с колоноскопията. В продължение на много години се използват химични техники, базирани на псевдопероксидазната активност на хемоглобина, чиито недостатъци са ниската чувствителност и липсата на специфичност (4). В момента започва да се използва имунологичниметоди с подобрена чувствителност и специфичност за човешка кръв, въпреки по-голямата си техническа сложност в сравнение с други тестове (5). Наскоро беше потвърдена пряка връзка между концентрацията на фекален хемоглобин и колоректален рак (6).

Цел и принцип на метода

Количествен имунохроматографски бърз тест за откриване на скрита кръв в изпражненията. Методът за определяне се основава на използването на специфичен комплекс от конюгирани с багрило миши моноклонални антителакъм човешки хемоглобин и моноклонални миши антитела към човешки хемоглобин, имобилизирани в тестовата зона на касетата за селективното му идентифициране с висока степенчувствителност и специфичност. След вземане на проба със специална спринцовка, съдържаща разтвор за екстракция, няколко капки от получения фекален екстракт се поставят в ямката за проби на тест касетата. Когато тестовата проба преминава през адсорбентния слой, белязаният конюгат антитяло-багрило се свързва с човешкия хемоглобин, образувайки комплекс антиген-антитяло. Този комплекс се свързва с антителата срещу хемоглобина в реакционната зона, образувайки розова лента. При липса на хемоглобин линията не се образува. Продължавайки да се движи по адсорбентния слой, несвързаният конюгат се свързва с реагентите в контролната зона, за да образува контролна лента, показваща реактивността на теста. В зависимост от концентрацията в кръвта, в прозореца на теста се появяват линии различна интензивност, което ви позволява да измервате количествено хемоглобина с помощта на имунохроматографския експресен анализатор „Easy Reader” (VEDALAB).

Съединение

Тестови касети 20

Устройства за вземане на проби (спринцовка с 2 ml разтвор за екстракция) 20

Инструкция 1

Стабилност и съхранение

1. Да се ​​съхранява при температура от 4 до 30°C в запечатана оригинална опаковка.

2. Да не се замразява!

3. Тестът е стабилен до изтичане на срока на годност, отбелязан върху етикета.

Предпазни мерки

Този тест е само за диагностични цели. в витрои професионална употреба.

Когато работите с мостри, използвайте предпазни дрехии ръкавици за еднократна употреба.

Не яжте, не пийте и не пушете на закрито, където извършва се работас мостри.

При вземане и изследване на проби не докосвайте с ръце лигавицата на очите и носа.

Не използвайте тестовата касета, ако защитната й опаковка е повредена.

Не използвайте тестова касета с изтекъл срок на годност.

Екстракционният разтвор може да причини дразнене на кожата, очите и лигавиците. Ако разтворът попадне върху кожата ви, незабавно го измийте с вода.

Изхвърляне на отпадъци

Всички проби трябва да се считат за потенциално заразни. След приключване на процедурата за тестване, пробите трябва да се изхвърлят внимателно и само след стерилизация в автоклав или третиране с 0,5–1% разтвор на натриев хипохлорит за най-малко 1 час.

Подготовка на реагента

Всички реактиви са готови за употреба.

Пробни проби

Екстракт от изпражнения.

Вземане и подготовка на проби

1. Напишете името, възрастта, адреса и датата на вземане на пробата на пациента върху етикета на устройството за вземане на проби.

2. Отворете горна частустройства за вземане на проби, където се намира сондата за вземане на проби.

3. Вземете проба от изпражнения, като използвате горната част на устройството за събиране на пробата, като го потопите в 3 различни местасъщата проба от изпражнения и я поставете в устройството.

4. Поставете сондата за вземане на проби, заредена с проба, обратно на мястото й в устройството за вземане на проби и завийте здраво щепсела.

5. Съхранявайте устройството за вземане на проби при температура 2-8°C.

Процедура за тестване

1. Доведете всички проби и тестови касети до стайна температура.

2. Извадете тестовата касета от защитната й опаковка.

3. Отчупете върха на устройството за вземане на проби, разпределете 6 пълни капки от екстрахираната проба (150 µl) в ямката за пробата на тестовата касета, като оставите предишната капка да се абсорбира.

4. Резултатите от теста в ng/ml се отчитат на уреда “Easy Reader” 10 минути след добавяне на пробата.

Подробно описание на работата на четеца е дадено в инструкцията към устройството.

Характеристики на теста

а) Диапазон на измерване

Количественият резултат от теста се изразява в ng хемоглобин на ml екстракционен разтвор. Линейният диапазон на резултатите е от 10 до 500 ng/ml, диапазонът е даден в таблицата:

б) Точност

Проучването е проведено върху панел от 24 фекални проби, изпратени от болница Брадфорд (Обединеното кралство) на Йоркширската външна система за осигуряване на качеството (YEQAS). Тези проби, съдържащи известна концентрация на хемоглобин (в mg/g изпражнения), бяха тествани чрез качествен визуален бърз тест и този количествен тест. Получените резултати показват пълна корелация между резултатите. В допълнение, количествените резултати корелират добре с количеството на хемоглобина (YEQAS данни в mg/g изпражнения). Във всички случаи пробите са ясно идентифицирани като отрицателни (<10 нг/мл), пограничные (10-25 нг/мл) и позитивные (500-5,000 нг/мл).

в) Чувствителност

Концентрации близки до 5 ng/ml се определят от апарата. В този случай резултатът се показва като "<10 ng/ml». Результаты выше 100 нг/мл рассматриваются как патологические.

г) Ефект на висока доза (ефект на куката)

Не се наблюдава хук ефект до 2 mg/ml благодарение на собствения метод VEDALAB.

д) Кръстосана реактивност:

Тестът не показва кръстосани реакции с говежди, свински, заешки, конски и овчи хемоглобин.

д) Възпроизводимост:

При тестване на две търговски проби с концентрации на окултна кръв от 3,35 и 26,67 ng/ml в 25 повторения, коеф. вариациирезултатите са съответно 8,5% и 11,4%.

ж) Диагностична значимост

Както е обсъдено по-долу (вижте Ограниченията на метода), има много причини за наличието на кръв в изпражненията и лекарят трябва да потвърди резултатите от този тест с други клинични методи, като например колоноскопия.

При изследване на 54 фекални проби беше установено, че резултатите под 100 ng/ml трябва да се тълкуват като отрицателни, от 100 до 200 ng/ml като гранични и над 200 ng/ml като положителни. Въпреки това, ако са налице други симптоми, е необходимо допълнително изследване, дори ако установената концентрация е под 100 ng/ml.

Ограничения на метода

1. Тестът е предназначен за количествено определяне на човешка кръв (хемоглобин) в изпражненията.

2. Кръвта в изпражненията може да бъде причинена от няколко причини, различни от рак на червата, като хемороиди, кръв в урината или стомашно дразнене. Кървенето от горната част на храносмилателния тракт (напр. в случай на язва на стомаха или дванадесетопръстника) може да не се открие постоянно поради смилането на протеини и трудността на антитялото да разпознае хемоглобиновия антиген след протеолиза.

3. Не всяко чревно кървене може да бъде причинено от предракови или ракови полипи.

4. Както при всяка диагностична процедура, лекарят трябва да потвърди резултатите от този тест с други клинични методи, като бариева клизма, сигмоидоскопия или колоноскопия.

5. Отрицателните резултати не изключват кървене, тъй като кървенето може да не е постоянно.

6. Колоректалните полипи в много ранен стадий на заболяването може да не кървят. Поради тази причина, за по-сигурно, се препоръчва периодично (веднъж годишно) да се проверяват лица над 45 години.

7. Тестът е предназначен само за четене на устройството “Easy Reader”. Тестът не е предназначен за визуално четене.

8. Ако времето за отчитане (10 минути) не бъде спазено, може да се наблюдават грешни резултати.

9. Както се наблюдава при други методи за анализ, има известна променливост в резултатите от измерването. Следователно за клиничните данни се препоръчва да се въведе коефициент на вариация от +/- 25% спрямо получения резултат.

Имунохроматографски тест за откриване на хемоглобин в изпражненията (окултна кръв)

Предназначение

Тестът “ЧЕРВЕНА окултна кръв” е предназначен за in vitro едноетапно, бързо качествено откриване на хемоглобин (окултна кръв) във фекалиите.

кратка информация

Тестът за скрита кръв в изпражненията се използва за идентифициране на различни видове патология на долния стомашно-чревен тракт, характеризираща се с кървене (полипи на дебелото черво, колоректален рак, болест на Crohn, улцерозен колит). Съдовете на повърхността на колоректален полип или злокачествена неоплазма често са крехки и лесно се увреждат при преминаване на изпражненията. В този случай в изпражненията се отделя малко количество кръв, което рядко се забелязва за окото.

Тестът "ЧЕРВЕНА окултна кръв" проявява висока чувствителност и специфичност при откриване на кървене на ниво дебело и право черво, като в същото време е нечувствителен към скрито кървене в горните отдели на стомашно-чревния тракт, където се усвоява протеиновата част на хемоглобина.

Принцип на метода

Определянето се основава на принципа на имунохроматографския анализ. Анализираната проба от течен биологичен материал се абсорбира от абсорбиращата част на тест лентата. Ако в пробата има хемоглобин, тя реагира със специфични моноклонални антитела срещу хемоглобина, маркирани с цветни частици, нанесени върху началната зона и продължава да се движи с потока течност. В аналитичната зона на тест лентата се осъществява взаимодействие със специфични моноклонални антитела, имобилизирани върху повърхността на мембраната, образувайки цветен имунен комплекс.

В контролната зона на тест лентата се образува специфичен оцветен имунен комплекс, независимо от наличието на хемоглобин в изследвания биологичен материал.

При наличие на хемоглобин в анализираната проба върху тест лентата се образуват две успоредни цветни линии (червена аналитична, обозначена с буквата Т, и зелена контролна, обозначена с буквата С), което показва положителен резултат от теста. Ако в анализираната проба няма хемоглобин, върху тест лентата се образува една зелена контролна линия (C), което показва отрицателен резултат от теста.

Съединение

Един набор от тестове за окултна кръв RED включва:

• имунохроматографски тест ленти „ЧЕРВЕНА скрита кръв” в бели пластмасови касети – 5, 10 или 20 бр.;
• епруветки с капачка-капкомер и пръчка за събиране на изпражнения, съдържащи буфер за разтваряне на пробата - съответно 5, 10 или 20 бр.;
• етикети на самозалепваща основа за етикетиране на епруветки от потребителя - съответно 5, 10 или 20 бр.;
• инструкция за използване на теста „ЧЕРВЕНА окултна кръв” – 1 бр.

Касетите с тест ленти са опаковани в индивидуална вакуумна опаковка от алуминиево фолио, съдържаща сашета силикагел.

Тестовият комплект „ЧЕРВЕНА окултна кръв” е опакован в картонена кутия.

Необходимото оборудване и материали не са включени в комплекта

• Контейнери за събиране на проби от изпражнения;
• гумени или пластмасови ръкавици за еднократна употреба;
• часовник или таймер.

Аналитични характеристики

• Чувствителността на теста за ЧЕРВЕНА окултна кръв е >99%.
• Специфичността на теста за ЧЕРВЕНА окултна кръв е >99%.
• Време за анализ: 10 минути.

Тестът "ЧЕРВЕНА окултна кръв" е специфичен за човешки хемоглобин и не реагира кръстосано с хемоглобин и миоглобин от животински произход, идващи от храната.

Всеки RED тест за окултна кръв е предназначен да определи наличието на хемоглобин (окултна кръв) в изпражненията на човек.

Предпазни мерки

Тестът "ЧЕРВЕНА окултна кръв" е предназначен само за ин витро диагностична употреба.

Всички компоненти на теста за окултна кръв RED са нетоксични в използваните концентрации.

Червените тестове за окултна кръв не трябва да се използват след изтичане на срока на годност.

Когато извършвате определянето, трябва да носите гумени или пластмасови ръкавици за еднократна употреба, т.к пробите от изследвания биологичен материал трябва да се считат за потенциално заразени.

Използваните тестове и останалият биологичен материал трябва да се поставят в специален контейнер за санитарни отпадъци.

Анализирани проби

Прясно събран биологичен материал (изпражнения), който не съдържа консерванти.

Пробите от изпражненията трябва да се събират в чист контейнер.

Преди определяне, пробите от изпражненията могат да се съхраняват при температура 2–4 ° C за не повече от 2 дни; ако е необходимо по-дълго (до 1 година) съхранение, при температура -20 ° C и по-ниска.

Преди анализ пробите от изпражненията трябва да бъдат напълно размразени и доведени до стайна температура.

Многократното замразяване и размразяване на пробите е неприемливо.

приготвяне на пробата

1. Отстранете капачката на капкомера от епруветката и използвайте пръчката на капачката, за да отстраните малко количество от пробата за анализ. За да направите това, вкарайте пръчката в пробата 3 пъти, като съберете приблизително 100 mg фекалии (фиг. 1-1). Ако пробата е течна, пипетирайте 100 µl.

2. Поставете пръчката с пробата в епруветката с буфер за разтваряне на пробата и завийте плътно капачката на капкомера (фиг. 1-2).

3. Разклатете епруветката няколко пъти, за да улесните разтварянето на пробата (Фигура 2-1).

Извършване на анализ

Анализираните проби от изпражнения и тестовете за ЧЕРВЕНА окултна кръв трябва да бъдат доведени до стайна температура (15–25°C) преди анализ.

4. Разклатете епруветката, съдържаща разтвора на пробата (Фигура 2-1). Отрежете или отчупете върха на капачката на капкомера.

5. Непосредствено преди започване на анализа отворете опаковката на теста „ЧЕРВЕНА окултна кръв“, като я разкъсате по процепа. Извадете касетата с тест ленти и я поставете върху равна хоризонтална повърхност.

6. Поставете 4 капки (приблизително 100 µl) от течната проба в кръглото прозорче на касетата, обозначено с буквата S, като избягвате включването на твърди частици от пробата заедно с течността (фиг. 2-2). За всяка проба или контрола трябва да се използва отделна епруветка с буфер за възстановяване на пробата и отделен тест за ЧЕРВЕНА окултна кръв.

7. След 10 минути визуално оценете резултата от реакцията.

Тълкуване на резултатите

Идентификация на една зелена касета в тестовия прозорец контролна линия(C) показва отрицателен резултат от теста, т.е. показва липсата на хемоглобин в анализираната проба от изпражнения (фиг. 3-1).

Откриването на две успоредни цветни линии (C и T) в тестовия прозорец на касетата показва положителен резултат от анализа, т.е. показва наличието на хемоглобин в анализираната проба от изпражнения (фиг. 3-2). Интензитетът на червената аналитична линия (T) в тестовото прозорче на касетата може да варира в зависимост от концентрацията на хемоглобин в пробата.

В случаите, когато в тестовото прозорче на касетата не се образува цветна линия или се образува само червена аналитична линия (Т), резултатът от анализа е невалиден (фиг. 3-3). В този случай анализът трябва да се повтори, като се използва друг тест за „ЧЕРВЕНА окултна кръв“.

Прекомерното количество проба от изпражнения може да причини размити, тъмни линии, които не се появяват в тестовия прозорец на касетата. диагностична стойност. В този случай трябва да добавите по-голямо количество разтворител към пробата от изпражненията и да повторите анализа с друг тест за окултна кръв ЧЕРВЕНА.

Проби от изпражнения, взети от пациенти с кървящи хемороиди, запек или по време на менструация, могат да покажат фалшиво положителни резултати.

Резултатите, получени с помощта на теста за окултна кръв RED са предварителни. За да ги потвърдите, е необходимо да се извърши допълнителни изследванияпроби от изпражнения с алтернативни методи.

Условия за съхранение и работа

Тестовете за "червена окултна кръв" трябва да се съхраняват при температура от 2 до 25 ° C в опаковката на производителя на сухо място през целия срок на годност. Замразяването на тестове за окултна кръв ЧЕРВЕНА не е разрешено.

Срокът на годност на тестовете "ЧЕРВЕНА окултна кръв" е 24 месеца. от датата на производство.

След отваряне на опаковката, ЧЕРВЕНИТЕ тестове за окултна кръв трябва да се използват в рамките на 2 часа, когато се съхраняват на сухо място при стайна температура.

За получаване на надеждни резултати е необходимо стриктно спазване на инструкциите за използване на теста „ЧЕРВЕНА окултна кръв”.