Anti Lewis ano. Lewis kung ano ito. Impeksyon ng mga hayop sa laboratoryo

Presyo sa kahilingan

Maaari kang magdagdag ng item sa iyong cart sa pamamagitan ng pagtukoy sa dami

Tagagawa: Mga diagnostic system

Bansang Russia

Yunit Meas.: itakda

Uri ng packaging: karton na kahon

Artikulo: L-1823

Paglalarawan

Enzyme immunoassay test system para sa pag-detect ng mga antibodies ng mga klase G, M at A sa Treponema pallidum (T. pallidum) sa serum ng dugo ng tao (plasma) at cerebrospinal fluid para sa layunin ng pag-diagnose ng syphilis, isang kumpletong hanay ng mga reagents para sa 96x2 determinations, na angkop para sa mga manu-manong pamamaraan at awtomatikong pagsusuri ng mga analyzer. Ang pamamaraan ay batay sa prinsipyo ng "bitag", na binubuo sa katotohanan na ang mga tiyak na antitreponemal antibodies ng lahat ng mga klase na naroroon sa sample ay nagbubuklod nang sabay-sabay sa mga recombinant na antigens - mga analogue ng immunodominant na protina ng T. pallidum, na naayos sa mga balon ng plato, at sa parehong mga antigen na may label na peroxidase malunggay, kapag magkasamang ini-incubate ang mga sample ng serum ng dugo ng tao (plasma) o cerebrospinal fluid at ang conjugate. Ang pagbabago sa kulay ng substrate-chromogenic mixture na naglalaman ng TMB kapag idinagdag ito sa mga balon ng plate ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga tiyak na antibodies sa Treponema pallidum sa mga sample ng pagsubok

Functional na layunin

Ang pagtuklas ng mga antibodies sa Treponema pallidum ay gumaganap ng isang mahalagang papel sa pagsusuri ng syphilis, dahil ang T. pallidum ay hindi maaaring ihiwalay sa cell culture, at ang mga sample para sa direktang pagtukoy ng pathogen ay kadalasang hindi magagamit sa panahon ng tago at mga huling yugto mga sakit. Sa serodiagnosis ng syphilis, ginagamit ang mga non-treponemal (RMP, RPR, VDRL) at treponemal (RPGA, RIF, ELISA). Mga pagsusuri sa immunoassay ng enzyme upang matukoy ang kabuuang antibodies, ginagamit ang mga ito para sa mass screening ng donor blood at para sa pag-diagnose ng syphilis bilang bahagi ng isang komplikadong mga serological reactions. Pagkatapos ng matagumpay na therapy, ang reaktibiti ng treponemal test sa karamihan ng mga kaso ay nananatili

Mga pagtutukoy

Itakda ang mga nilalaman:
1. Polystyrene 96-well collapsible plate - 2 pcs.,
2. Ang conjugate ay isang transparent na dilaw na likido,
3. Positibong kontrol - transparent na pulang likido,
4. Negatibong kontrol - transparent na berdeng likido,
5. Hugasan ang solusyon, tumutok, pH mula 6.9 hanggang 7.6,
6. Ang TMB ay isang transparent na walang kulay na likido,
7. Substrate solution - transparent na walang kulay na likido, pH ~4.2.
8. Ihinto ang reagent (0.2M),
9. Mga tagubilin para sa paggamit at sertipiko ng kalidad.
Mga kondisyon ng imbakan: sa temperatura na +2...8°C, hindi katanggap-tanggap ang pagyeyelo.
Ang shelf life ay 15 buwan mula sa petsa ng produksyon na nakasaad sa label ng kit.
Pagsunod sa mga kinakailangan ng TU 9398-182-05941003-2010.
Nakarehistro sa Roszdravnadzor.

Napakahalaga na piliin nang eksakto ang mga pagsusuri, pamamaraan o diagnostic na pamamaraan na talagang makakatulong sa paggawa ng tumpak na diagnosis, at hindi mas malito ang doktor. Ang isang enzyme-linked immunosorbent test ay matagal nang napatunayan ang sarili bilang isang paraan na nagbibigay-daan hindi lamang upang makakuha ng positibo o negatibong sagot sa tanong kung ang isang tao ay may anumang impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik, ngunit upang matukoy din kung anong yugto ng pag-unlad ang sakit. , at upang maunawaan din kung ang pasyente ay nagkaroon ng katulad na problema sa nakaraan. medikal na kasaysayan. Ang ELISA para sa syphilis ngayon ay isa sa mga pinaka-sensitibo at partikular na pagsusuri, at ang katumpakan nito ay halos 90%.

Ang mga sistema ng pagsubok na gumagamit ng enzyme immunoassay diagnostic method ay idinisenyo upang makita hindi lamang ang syphilis, kundi pati na rin ang maraming iba pang mga impeksyon: hepatitis, HIV, CMV, herpes, toxoplasmosis, atbp. Ang ELISA test para sa syphilis ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang mga antibodies (IgG, IgA, IgM) sa Treponema pallidum na nasa dugo ng isang taong may sakit. Ang pamamaraang ito ay nagpapahintulot sa iyo na makita ang pakikipag-ugnayan ng mga antibodies na may mga espesyal na paghahanda na naglalaman ng mga antigen na, kasama ng mga antibodies, ay bumubuo ng isang tanda ng sakit na malinaw na nakikita kapag sa iba't ibang paraan mga diagnostic

Ang enzyme immunoassay para sa syphilis ay batay sa paraan ng pakikipag-ugnayan ng mga antibodies na nakita sa dugo sa antigen ng nakakahawang ahente. Ang diagnosis ay depende sa kung aling mga antibodies ang ginamit: alinman sa mga antibodies ng isang partikular na klase o sa pangkalahatan ay maaaring matukoy. Para sa pagsusuri gamit ang pamamaraang ito, ang dugo ay kinuha sa isang walang laman na tiyan mula sa isang ugat.

Ang isang pagsusuri sa dugo ng ELISA para sa syphilis ay nagsasangkot ng paggamit ng tatlong klase ng mga immunoglobulin: G, M, A. Ang mga immunoglobulin na ito ay may isang mahalagang katangian para sa pag-diagnose ng syphilis gamit ang pamamaraang ELISA: ang mga ito ay ginawa sa isang mahigpit na tinukoy na pagkakasunud-sunod, salamat sa kung saan pinapayagan ka ng ELISA. upang matukoy nang eksakto kung nasaang yugto ang proseso at nasa anong yugto ito. dinamika ng pag-unlad nito:

Ang immunoglobulin M sa dugo ay nagpapakita kung gaano katagal ang lumipas mula noong impeksyon. Gayunpaman, ang mga positibong resulta ng presensya nito ay hindi palaging nangangahulugan ng presensya sakit sa ari: ang tao ay maaaring nakaranas ng paglala ng ilan malalang sakit na nagdulot ng katulad na reaksyon.
Ang pagkakaroon ng IgA antibodies ay nangangahulugan na hindi bababa sa isang buwan na ang lumipas mula noong impeksyon.
Dahil ang kaligtasan sa sakit na ito ay hindi nabuo, ang isang positibong resulta ng pagsusuri para sa IgG ay maaaring magpahiwatig ng parehong peak ng sakit at ang panahon pagkatapos ng therapy.

Ano ang ibig sabihin ng ELISA test positive para sa syphilis?

Dapat tandaan na ang isang positibong ELISA para sa syphilis ay hindi isang dahilan para mag-panic. Ang katotohanan ay ang pamamaraang ito ay nagpapahintulot sa isa na matukoy lamang ang pagkakaroon ng mga antibodies, ngunit hindi ang pathogen. Samakatuwid, kung positibo ang resulta ng syphilis ELISA, hindi pa ito batayan para sa paggawa ng diagnosis. Gayunpaman, sa siyentipikong mundo, ang mga sistema ng pagsubok ay pinapabuti araw-araw, at ngayon ay nangangahulugan ito na sa karamihan ng mga kaso ang mga resulta ng pagsubok ay maaari pa ring mapagkakatiwalaan.

Mayroon lamang dalawang diagnostic na resulta: "positibo" at "negatibo". Sa unang kaso, ang positibong data ay nangangahulugan na ang pasyente ay may sakit sa isa sa mga yugto, o na siya ay kamakailang nakatapos ng isang kurso ng paggamot. Ang negatibong resulta ng pagsusuri ng dugo ng enzyme immunoassay ay nangangahulugan ng alinman sa kawalan ng sakit o isang napakaagang yugto ng pag-unlad nito.

Ang klinikal na larawan ng unang yugto ng syphilis ay lumilitaw na ang pagtuklas ng matigas na chancre sa iba't ibang lugar.

Ang mga unang sintomas ng syphilis ay lilitaw 3-5 na linggo pagkatapos ng impeksiyon. Hanggang sa sandaling ito, ang sakit ay nagpapatuloy nang walang anumang panlabas na pagpapakita.

Kadalasan, pagkatapos ng hindi protektadong pakikipagtalik, ang isang tao ay naghihinala na siya ay may syphilis, HIV o hepatitis.

Mga pagsusuri at komento

Ang asawa ay sinuri para sa syphilis, ELISA para sa syphilis - positibo, RMP para sa syphilis - negatibo. At ano ang ibig sabihin nito?

Sa panahon ng pagbubuntis (ang panahon ay 37 linggo), ang marka ng ELISA ay positibong 2.1. Pagkatapos manganak, kumuha ako ng mga pagsusulit 2 beses - lahat ay negatibo. After 6 months, kinuha ko ulit, positive ang ELISA, CP=1.9.(IgM+IgG). Ano ang ibig sabihin nito.

Kamusta! Ano ang ibig sabihin nito: positibo ang pagsusuri sa dugo para sa syphilis ELISA (total.at.)?

Mangyaring sabihin sa akin kung ano ang ibig sabihin ng rmp1+, rpga 1+ kung ang kabuuan ay negatibo! Salamat nang maaga.

Ang ELISA ay maaaring maging false positive!

Mag-iwan ng pagsusuri o komento LATEST PUBLICATIONS Venereology NEWS Balanoposthitis Syphilis Herpes Contraception ELISA blood test

Para sa isang komprehensibong pagtatasa ng estado ng katawan (sa partikular nito proteksiyon function) isang enzyme-linked immunosorbent test (ELISA) ay inireseta. Ang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay isinasagawa upang masuri ang mga nakakahawang, autoimmune, hematological pathologies, pangunahin at pangalawang immunodeficiencies. Sa artikulong ito, iminumungkahi naming isaalang-alang nang mas detalyado kung ano ang isang pagsusuri sa dugo ng ELISA, pati na rin kung anong mga indikasyon ang umiiral para sa pagpapatupad nito.

Mga indikasyon para sa pagrereseta ng pagsusuri sa dugo gamit ang pamamaraan ng ELISA at ang prinsipyo ng operasyon nito

Gaya ng nabanggit na natin, ang pagsusuri sa dugo gamit ang pamamaraang ELISA ay isang pagsubok sa laboratoryo kung saan ang mga antigen o antibodies ay tinutukoy sa isang sample ng dugo. Ang pagsusuri na ito ay ginagamit upang makita ang antas ng mga hormone, immunological complex at immunoglobulin. Mayroong mga sumusunod na indikasyon para sa pagsusuri ng ELISA:

Diagnosis ng mga allergy.
Diagnosis ng mga sakit na pinagmulan ng viral - Epstein Barr virus, herpes, hepatitis, cytomegalovirus.
Diagnosis ng mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik - mycoplasma, ureaplasma, syphilis, trichomonas, chlamydia.
Kahulugan ng immunodeficiency.
Diagnosis ng oncological pathologies.
Pagsusuri ng pagiging epektibo ng therapy.
Pagpapasiya ng mga antas ng hormone.
Preoperative komprehensibong pagsusuri.

Ang prinsipyo ng pagpapatakbo ng isang enzyme immunoassay ay batay sa isang pagsusuri sa dugo para sa pagkakaroon ng mga immunoglobulin (mga partikular na protina ng antibody). Ang mga immunoglobulin ay ginawa ng immune system kapag ang mga antigens (mga dayuhang mikroorganismo) ay pumasok sa katawan ng tao. Ang mga immune molecule na ito ay nagbubuklod sa iba't ibang mga nakakahawang pathogen at neutralisahin ang mga ito. Mahalaga natatanging katangian na mayroon ang mga immunoglobulin ay ang kanilang pagtitiyak. Dahil sa mga katangiang ito, maaari silang bumuo ng isang antigen-antibody complex sa pamamagitan ng pagbubuklod sa isang partikular na antigen. Kapag nagsasagawa ng pagsusuri sa dugo ng ELISA, ang kumplikadong ito ay tinutukoy sa dami at husay.

Para sa itong pag aaral Madalas ginagamit ang dugo ng tao. Gayunpaman, ang mga nilalaman ng vitreous body, amniotic fluid, at cerebrospinal fluid ay maaaring kunin bilang materyal para sa pagsusuri. Ang sample ng dugo ay karaniwang kinukuha mula sa antecubital vein ng pasyente. Inirerekomenda na mag-abuloy ng dugo nang walang laman ang tiyan (hindi bababa sa 12 oras ang dapat lumipas mula sa oras huling appointment pagkain). Kung ang pasyente ay umiinom ng mga gamot, kinakailangang ipaalam sa doktor, dahil ang ilan sa mga ito ay maaaring makaapekto sa resulta ng pagsusuri. Ang pagiging maaasahan ng mga resulta ng pagsusulit ay apektado din ng paggamit ng droga at alkohol.

Interpretasyon ng pagsusuri ng dugo para sa ELISA

Ang form para sa pagsusuring ito ay karaniwang nagpapahiwatig ng negatibong (-) o positibo (+) na resulta para sa pagkalkula ng bawat klase ng mga immunoglobulin.

Iminumungkahi naming isaalang-alang ang interpretasyon ng posibleng interpretasyon ng pagsusuri sa dugo ng ELISA.

Ang IgG, IgA ay hindi nakita at ang resulta ng IgM ay negatibo - kumpletong pagbawi.
Resulta ng IgM, IgA, Negatibo ang IgG– walang immunity sa impeksyon.
Ang resulta ng IgG, IgA ay positibo at negatibo, pati na rin ang resulta ng IgM ay positibo - ang pagkakaroon ng isang matinding impeksiyon.
Positibo Resulta ng IgG at negatibong resulta ng IgA at IgM – post-bakuna o post-infectious immunity.
Positibo o negatibong resulta ng IgG, IgA at negatibong resulta ng IgM – talamak na impeksiyon.
Ang resulta ng IgG, IgM, IgA ay positibo - paglala ng talamak na nakakahawang patolohiya.

Sa isang enzyme immunoassay ng dugo, bilang karagdagan sa pagtukoy sa mga klase ng antibodies, ang kanilang mga quantitative indicator ay ipinahiwatig sa transcript. Gayunpaman, tanging ang dumadating na doktor lamang ang nagbibigay ng malawak na paliwanag sa kanila.

Mga kalakasan at kahinaan ng pag-aaral na ito

Medyo mababa ang gastos.
Dali ng paggamit.
Posibilidad ng diagnostics on maagang yugto pinaghihinalaang sakit.
Medyo mataas na katumpakan ng nakuhang data.
Ang maikling panahon na kinakailangan upang makuha ang resulta ng pananaliksik.
Kakayahang subaybayan ang dynamics ng pag-unlad nakakahawang proseso sa organismo.
Mataas na antas ng pag-iisa, na ginagawang posible na magsagawa ng mass survey.
Automation ng lahat ng mga yugto ng pananaliksik.

Ang kawalan ng pagsusuri sa dugo ng ELISA ay maaari itong, sa medyo bihirang mga kaso, magbigay ng maling-positibo o maling-negatibong mga resulta. Gayundin, kapag nagsasagawa ng pananaliksik, bilang karagdagan sa mga teknikal na pagkakamali, ang dahilan maling resulta maaaring makinabang ang pasyente rheumatoid factor, ang presensya ng malalang sakit(kung saan ang mga antibodies ay ginawa), pag-inom ng ilang mga gamot mga kagamitang medikal, mga metabolic disorder.

Giardiasis.
Ascariasis.
Cysticercosis.
Amoebiasis.
Trichinosis - ang pag-aaral ay isinasagawa nang higit sa isang beses; ang pinakamataas na antas ng antibodies ay natutukoy sa 4-12 na linggo pagkatapos ng impeksyon.
Taeniasis.
Opisthorchiasis – magsagawa ng differential diagnosis sa pagitan ng talamak at talamak na anyo mga sakit.
Toxoplasmosis.
Fascioliasis - sa talamak na yugto ng sakit, ang pagkakaroon ng mga antibodies ay tinutukoy.
Cutaneous o visceral leishmaniasis.

Kapag gumagamit ng mga materyales mula sa site, ang aktibong sanggunian ay obligado.

Ang impormasyong ipinakita sa aming website ay hindi dapat gamitin para sa self-diagnosis at paggamot at hindi maaaring magsilbi bilang isang kapalit para sa konsultasyon sa isang doktor. Binabalaan ka namin tungkol sa pagkakaroon ng mga contraindications. Kinakailangan ang konsultasyon sa espesyalista.

Anong mga pagsusuri sa dugo ang kinuha para sa syphilis: RW, RPGA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, interpretasyon ng mga resulta ng pagsubok

Ang Syphilis ay isang sakit nakakahawang kalikasan, sanhi ng spirochete Treponema pallidum, madaling kapitan ng progresibo talamak na kurso, na may malinaw na periodization ng mga klinikal na sintomas.

Ang pangingibabaw ng sexual transmission kaysa sa contact at transplacental transmission ay naglalagay ng sakit na ito sa mga sexually transmitted disease (STDs, STIs). Bilang karagdagan sa mga pamamaraang ito ng paghahatid ng impeksyon, ang isang espesyal na papel ay ginampanan ng artipisyal na ruta (mula sa Latin na "artificio" - artipisyal na nilikha).

Ito ay tipikal para sa mga institusyong medikal, pangunahing ipinapatupad sa isang setting ng ospital. Nangyayari ang impeksyon sa panahon ng pagsasalin ng dugo, iba't ibang operasyon ng kirurhiko, at mga invasive diagnostic na pamamaraan.

Sa kabila ng quarantine ng naibigay na dugo, ang problema sa pagtukoy ng syphilis sa mga donor iba't ibang yugto may kaugnayan pa rin ang sakit.

kaya lang mga hakbang sa diagnostic para sa syphilis ay nangangailangan ng standardisasyon, ang pagpapakilala ng mga bagong sensitibo at nagbibigay-kaalaman na pamamaraan ng pagkilala, pati na rin ang pagliit ng mga pagkakamali at maling interpretasyon ng mga resulta ng pagsusulit.

Pag-uuri ng mga pamamaraan mga diagnostic sa laboratoryo

Ang diagnosis ng syphilis ay may ilang mga tampok at naiiba sa diagnosis ng iba impeksyon sa bacterial. Ang kumplikadong istraktura at mga antigenic na katangian ng Treponema pallidum ay nagdudulot ng mga pagkakamali sa interpretasyon ng mga resulta ng serological reaksyon.

Mayroong 3 pangunahing grupo ng mga pasyente na inaalok ng pagsusuri ng dugo para sa syphilis:

1 Pagsusuri at medikal na pagsusuri ng mga pangkat ng populasyon (kabilang ang pagbubuntis, pagpaparehistro sa klinika ng antenatal, pagtatrabaho at pagpaparehistro ng isang medikal na rekord, at iba pa).

2 Pagsusuri sa mga grupong nanganganib (hindi protektadong pakikipagtalik sa isang taong nahawaan ng syphilis, mga tao pagkatapos ng sapilitang pakikipagtalik, HIV-infected at iba pa).

3 Mga taong may sintomas ng sakit o mga taong pinaghihinalaang may impeksyon sa syphilitic.

Ang lahat ng mga pamamaraan sa laboratoryo ay karaniwang nahahati sa direkta at hindi direkta.

Mga direktang pamamaraan

1 Pagkilala sa Treponema pallidum sa isang madilim na larangan (dark-field microscopy).

2 Impeksyon ng mga pang-eksperimentong hayop (paglilinang sa mga hayop sa laboratoryo).

3 PCR (polymerase chain reaction).

4 DNA probe o nucleic acid hybridization.

Mga hindi direktang pamamaraan

Ang mga serological na reaksyon ay mga pamamaraan ng diagnostic sa laboratoryo batay sa pagtuklas ng mga antibodies (dinaglat na AT) sa Treponema pallidum antigens (dinaglat na AG). Ang mga ito ay pangunahing kahalagahan para sa pagkumpirma ng diagnosis.

1 Mga pagsubok na hindi treponemal:

Reaksyon ng Wasserman (WRS);
Ang reaksyon ng microprecipitation (MR, RMP) at ang mga analogue nito, na ibinigay sa ibaba;
Rapid plasma reagin test (RPR, RPR);
Red Toluidine Serum Test (TRUST);
Non-treponemal test ng Venereal Disease Research Laboratory - VDRL.

2 Pagsusuri sa Treponemal:

Treponema pallidum immobilization solution – RIBT/RIT;
Immunofluorescence solution - RIF, FTA (serum dilutions RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
R-tion ng passive hemagglutination (RPGA, TRPGA, TPHA);
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA, EIA);
Immunoblotting.

Figure 1 - Algorithm para sa serodiagnosis ng syphilis

Histomorphological na pamamaraan

Ang mga pamamaraang ito ay kumukulo sa pagtukoy ng mga tampok ng histomorphology ng syphilitic manifestations. Ang pansin ay binabayaran sa mga subtleties ng istraktura ng chancre. Gayunpaman, ang differential diagnosis ng impeksyon gamit ang histology ay napakahirap. Ginagamit ang histomorphology kasama ng iba pang mga laboratoryo at klinikal na pagsubok.

Dark field microscopy ng Treponema pallidum

Ang pamamaraang ito ay batay sa direktang pagtuklas ng treponema pallidum sa materyal ng pagsubok gamit ang isang mikroskopyo at mga espesyal na aparato (madalas na naglalabas mula sa mga pagguho at ulser, mas madalas. cerebrospinal fluid at iba pang mga substrate).

Ang paggamit ng scarification, scraping, squeezing, exudate ay nakuha mula sa erosions at ulcerative defects, pagkatapos ay ang handa na paghahanda ay sinusuri sa ilalim ng mikroskopyo.

Karaniwan, ang treponema pallidum ay napansin sa isang paghahanda na nakuha mula sa chancre, mula sa foci ng pangalawang sariwa, pangalawang paulit-ulit na syphilis, pati na rin ang punctate ng mga lymph node at inunan.

Batay sa hindi pangkaraniwang bagay ng maliliit na particle na kumikinang sa isang madilim na larangan kapag natamaan ng sinag ng liwanag (Tyndall's phenomenon), ang pamamaraan ay perpektong nagbibigay-daan sa pagkakaiba-iba ng causative agent ng syphilis mula sa iba pang mga treponemes batay sa mga pagkakaiba sa morphological at mga pagkakaiba sa mga mode ng paggalaw ng bakterya.

Para sa mikroskopya, ginagamit ang isang espesyal na dark-field condenser ng naaangkop na optical resolution. Ang gamot ay nakuha sa pamamagitan ng durog na paraan ng drop (isang patak ng materyal ay inilapat sa isang malinis, walang grasa na salamin na slide at tinatakpan ng napakanipis na coverslip).

Ang immersion oil ay ibinabagsak sa cover slip. Sa pamamagitan ng pag-ikot ng tubo at pag-ikot ng magnifying lens, ang nais na pag-iilaw ay nababagay.

Sa madilim na larangan ng isang mikroskopyo, ang mga selula ng dugo ay nakita, epithelial cells at ang causative agent ng syphilis mismo. Ang Treponema pallidum ay mukhang isang spiral, napakanipis, nagpapalabas ng isang kulay-pilak na kulay, na may makinis na paggalaw.

Figure 2 - Dark-field microscopy bilang isang paraan upang mailarawan ang Treponema pallidum sa materyal na pinag-aaralan. Pinagmulan ng paglalarawan - CDC

Ang Treponema pallidum ay dapat na nakikilala mula sa iba pang mga treponema, kabilang ang Tr. refringens, na matatagpuan sa oropharynx at sa mauhog lamad ng mga genital organ. Ang bacterium na ito ay gumagawa ng magulong paggalaw, may malawak at walang simetriko, sa halip magaspang na mga kulot. Bilang karagdagan, ang Treponema pallidum ay nakikilala mula sa Tr. Microdentium, Tr. Buccalis at Tr. vincenti.

Ang visualization ng bacteria sa isang madilim na field ay minsan ay dinadagdagan ng fluorescence reaction. Para sa layuning ito, ang mga antitreponemal antibodies na may label na fluorescent dye ay idinagdag sa katutubong materyal. Sa kasong ito, nabuo ang isang kumplikadong tinatawag na antigen-antibody (pinaikling AG-AT), na siyang bagay para sa pag-aaral gamit ang isang fluorescent microscope.

Paraan ng polymerase chain reaction (PCR).

Ang PCR, na binuo noong 1991 upang makita ang molekula ng deoxyribonucleic acid (DNA) ng Treponema pallidum, ay lubos na sensitibo at tiyak, na nagpapahintulot sa pagtuklas ng mga fragment ng DNA ng pathogen.

Batay pagsusuring ito sa pagkopya ng mga maikling seksyon ng DNA ng maputlang spirochete, na nakakatugon sa tinukoy na mga parameter at naroroon sa sample. Ang lahat ng ito ay ginagawa sa artipisyal na kondisyon(sa vitro). Ang reaksyon ay isinasagawa sa isang aparato - isang thermal cycler, na nagbibigay ng periodization ng mga cycle ng temperatura. Ang paglamig ay nangyayari na sinusundan ng pag-init ng mga test tube na may error na 0.1˚C.

Ang DNA matrix ay pinainit ng 2 minuto sa temperatura na 92-98˚C ( Pinakamataas na temperatura ginagamit kung ang polymerase ay thermostable). Kapag pinainit, naghihiwalay ang mga hibla ng DNA dahil sa pagkasira ng mga bono ng hydrogen sa pagitan nila. Sa hakbang ng pagsusubo, ang temperatura ng reaksyon ay binabawasan upang itali ang primer sa single-stranded na template.

Ang pagsusubo ay tumatagal ng humigit-kumulang 30 segundo, kung saan daan-daang mga nucleotide ang na-synthesize. Ang mga bagong synthesize na molekula ay kinopya ng polymerase, bilang isang resulta kung saan ang mga tiyak na fragment ng deoxyribonucleic acid ay pinarami. Ang kasunod na pagtuklas ng mga fragment ay isinasagawa gamit ang agar gel electrophoresis.

Ang diagnosis ng PCR ng syphilis ay likas na pang-eksperimento, ngunit makatwiran kapag natukoy congenital infection, sa mga mahihirap na diagnostic na kaso o may kaunting nilalaman ng Treponema pallidum sa materyal na pagsubok.

Pag-hybrid ng DNA

Ginagawa ang hybridization ng DNA sa vitro at batay sa kumpleto o bahagyang pagsasama ng dalawang single-stranded na molekula ng DNA sa isang molekula. Sa kaso ng kumpletong pagsusulatan ng mga komplementaryong fragment, madali ang pagsasama. Kung ang komplementaryong tugma ay bahagyang, kung gayon ang pagsasama ng mga hibla ng DNA ay nangyayari nang dahan-dahan. Batay sa oras ng chain fusion, maaaring masuri ang antas ng complementarity.

Kapag ang DNA ay pinainit sa isang buffer solution, ang mga hydrogen bond ay nasisira ng mga nitrogenous na base na komplementaryo, na nagiging sanhi ng paghiwalay ng mga chain ng DNA. Susunod, ang isang gamot ay nakuha mula sa dalawang denatured deoxyribonucleic acids. Kapag pinalamig, ang mga single-stranded na rehiyon ay nagiging renatured. Ang tinatawag na DNA hybrid ay nabuo.

Ang pamamaraan ay nagpapahintulot sa iyo na tantyahin at pag-aralan ang rate ng pagsusubo, na isinasaalang-alang ang mga katangian (pagkakatulad at pagkakaiba) ng DNA sa pagitan ng mga species o sa loob ng isang species.

Ang paggamit ng DNA probe ay nagsasangkot ng pag-hybrid ng isang may label na DNA fragment na may partikular na rehiyon ng DNA upang matukoy ang mga pantulong na nucleotide sequence. Ang isang pangkat ng mga unsaturated atoms (chromophores) o radioactive isotopes ay ginagamit upang lagyan ng label ang probe.

Ang DNA probe ay ginagamit para sa heterogenous at homogenous na pagtuklas ng mga nucleic acid. Ang tungkulin ng probe ay tukuyin ang mga lugar kung saan naganap ang target-probe fusion. Ang pagtuklas sa isang homogenous na sistema ay may kalamangan sa pagpapahintulot sa isa na subaybayan ang hybridization ng mga molekula ng DNA sa real time.

Ang kakanyahan ng pamamaraan ay ang DNA denaturation at renaturation (reunification ng DNA chain). Ang proseso ng renaturation ng nucleic acid at DNA probe ay nagtatapos sa pagbuo ng isang "hybrid".

Ang mga partikular na pagkakasunud-sunod ng nucleic acid ay nag-hybrid sa DNA probe at, sa gayon, ay nakita at pinapayagan ang isa na tantyahin ang dami ng DNA sa materyal na pinag-aaralan.

Impeksyon ng mga hayop sa laboratoryo

Ang mataas na sensitivity ng mga kuneho sa Treponema pallidum (mga 99.9%) ay nagpapahintulot sa kanila na magamit sa pagsusuri ng impeksyon sa syphilitic.

Ang impeksyon ng mga kuneho ay isinasagawa sa mga sentro ng pananaliksik at ito ang "pamantayan ng ginto" para sa pagtatasa ng sensitivity ng iba pang mga pamamaraan.

Bumalik tayo sa treponemal at non-treponemal test, dahil madalas silang ginagamit. Isaalang-alang natin ang kanilang mga pakinabang at disadvantages, pati na rin ang mga pagkakamali sa pagbibigay-kahulugan sa mga resulta.

Mga pagsubok na hindi treponemal

Ito ay mga pagsubok para sa pagtukoy ng IgG at IgM antibodies sa isang standardized cardiolipin antigen. Ang kanilang makabuluhang sagabal mayroong medyo maliit na pagtitiyak.

Ang mababang gastos at kadalian ng pagpapatupad ay ginagawang posible na uriin ang mga pagsusuring ito bilang mga pagsusuring diagnostic na kinakailangan para sa pagtatatag ng isang paunang pagsusuri at pagsusuri sa populasyon.

Ito ay mga pagsusuring hindi treponemal na ginagawa kapag nag-aaplay para sa isang medikal na rekord, nag-aaplay para sa isang trabaho, o nagrerehistro sa isang klinika ng antenatal.

1 Pinakamababang sensitivity sa yugto ng pangunahing syphilis - 70%;

2 Pinakamababang sensitivity sa yugto ng late syphilis - 30%;

3 Posibilidad ng maling negatibo at maling positibong resulta;

4 Labour intensity ng pagsasagawa ng RSK.

1 Medyo mababa ang gastos ng paggawa ng pagsubok;

2 Tumanggap ng mabilis na tugon;

3 Posibilidad ng kanilang paggamit para sa screening.

Ang pagkuha ng false-positive o mahinang positibong sample ay posible sa mga sumusunod na kaso:

1 Paglabag sa teknolohiya ng pagpapatupad kapag hinaharangan ang AG-AT complex.

2 Ang presensya ng pasyente mga sakit sa autoimmune(rheumatoid arthritis, rayuma, scleroderma, systemic lupus erythematosus, sarcoidosis, atbp.).

3 Malignant neoplasms.

4 Mga impeksyon sa viral at bacterial.

5 Mga sakit sa endocrine (autoimmune thyroiditis, diabetes mellitus).

6 Pagbubuntis.

7 Pag-inom ng alak.

8 Pagkain ng matatabang pagkain.

9 Senile edad.

Tulad ng nakikita mo mula sa listahan, maraming mga dahilan para sa isang hindi tamang resulta. Samakatuwid, ang isa ay dapat na maging maingat dito. Isaalang-alang natin ang dalawa pang sample kasama ng RSC. Ito ay isang reaksyon ng microprecipitation at VDLR (pagbabago nito).

Complement fixation reaction (RSK, Wasserman, RW)

Ito ay isang pagsubok batay sa kakayahan ng pandagdag na magbigkis sa mga AG-AT complex. Natutukoy ang nabuong complex gamit ang hemolytic system. Antigen ng cardiolipin makabuluhang pinatataas ang sensitivity ng sample.

Ang reaksyon ng Kolmer ay sensitibo din, na binubuo ng pagsasagawa nito sa iba't ibang mga kondisyon ng temperatura. Kaya, ang unang yugto ng reaksyon ng Kolmer ay nagpapatuloy sa temperatura na 20˚C sa loob ng kalahating oras, ang pangalawang yugto sa temperatura na 4-8˚C sa loob ng 20 oras. Sa panahong ito, nangyayari ang pag-aayos ng pandagdag.

Kapag nagsasagawa ng RSC, posibleng makakuha ng mga positibong resulta. Ang dahilan ay malamang na isang mataas na titer ng antibodies sa undiluted serum. Sa kasong ito, ang mga sample ay ibinibigay na may pagbaba ng dosis.

Upang maiiba ang mga yugto ng syphilis at masuri ang pagiging epektibo ng anti-syphilitic na paggamot, ang halaga ng AT sa suwero ay tinutukoy.

Ang positivity ng sample ay tinasa gamit ang mga krus, at ang pagbabanto ng serum ay ipinahiwatig din sa mga reaksyon ng Wasserman, Kolmer at Kann.

Reaksyon ng microprecipitation

Dahil ang pagiging kumplikado ng pagsasagawa ng mga pagsusuri sa itaas ay mataas, para sa lawak ng saklaw ng klinikal na pagsusuri iba't ibang grupo umunlad ang populasyon pinabilis na pamamaraan serodiagnosis ng syphilis, ang tinatawag na express method - reaksyon ng microprecipitation (dinaglat bilang MR, RMP).

Ginagawa ito gamit ang cardiolipin antigen at mga excipients. Ang bentahe nito ay ang koleksyon ng peripheral blood para sa pananaliksik. Ito ay makabuluhang nagpapabilis sa parehong pamamaraan mismo at sa gawain ng mga technician ng laboratoryo.

Figure 2 - Reaksyon ng microprecipitation (scheme)

Upang maisagawa ang MR, ang plasma o hindi aktibo na serum ng dugo ng pasyente ay kinakailangan (naglalaman sila ng mga antibodies). Susunod, ang plasma ay inilalagay sa minarkahang mga balon. Pagkatapos, ang isang patak ng cardiolipin antigen ay idinagdag sa materyal ng pagsubok, halo-halong at inalog. Bilang resulta, lumilitaw ang mga katangian ng mga natuklap sa suwero ng taong nahawahan, na nag-iiba sa intensity.

Ito ay isang kalidad na sample. Para sa quantitative assessment, 10 dilution ng serum ang ginagamit, inilagay sa 10 wells na may naaangkop na label. Sa qualitative MR, ang tugon ay ipinahiwatig sa anyo ng mga krus (pluses) o minus; na may quantitative MR, ang antibody titer ay ipinahiwatig (1:2, 1:4, at iba pa).

Ang pagkakaroon ng mga natuklap ay itinuturing na positibo o mahinang positibong tugon. Ang hitsura ng flocculate ay posible kahit na sa kawalan ng sakit, samakatuwid ang pangwakas na pagtatasa ng resulta na nakuha ay isinasagawa pagkatapos ng isang control study o iba pang mga reaksyon (RIBT, RIF, ELISA, RPGA).

Ang paraan na inirerekomenda ng World Health Organization para sa pagtatanghal ng isang reaksyon na may isang lipoid antigen (AG) ay nararapat na ituring na pinakamahusay sa iba pang karaniwang mga pagsusuri na hindi treponemal. Binuo sa USA, Georgia sa laboratoryo ng mga sexually transmitted disease (Venereal Diseases Research Laboratories).

Ang pagdadaglat ng institusyon ay nagsilbing pangalan para sa sample - VDRL. Ang VDRL ay isang pagbabago ng MR. Ang serum mula sa isang pasyente na may syphilis ay hindi aktibo at inilagay sa isang glass slide. Ang antigen na ginamit ay binubuo ng cardiolipin, cholesterol at lecithin sa iba't ibang porsyento. Ang sagot ay nakarehistro halos kaagad.

Ang kakaibang flocculation ay nangyayari sa pagkakaroon ng mga antibodies sa suwero. Ang serum ay nagiging reaktibo pagkatapos ng 4 na linggo ng impeksyon. Upang masuri ang dami ng antibodies, ang serum ay pre-diluted exponentially.

1 medyo mataas na sensitivity;

2 medyo mataas na pagtitiyak;

3 kadalian ng pagpapatupad;

4 mababang halaga ng mga reagents;

5 nakakakuha ng mabilis na tugon.

Ang kawalan ng VDRL ay ito ay medyo mataas na dalas maling positibong resulta.

Ang kanilang mga sanhi ay ang parehong mga sakit na nakalista sa itaas.

Ang mga pagsusuri sa Treponemal ay isinasagawa gamit ang mga tiyak na Treponema pallidum antigens. Ang mga ito ay kinakailangan at sapilitan upang magtatag ng pangwakas na diagnosis. Ito ay immunofluorescence reaction (RIF), indirect hemagglutination reaction (IPHA), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), atbp.

Pagkatapos ng isang positibong resulta ng isang hindi-treponemal na pagsubok (RPR, MP, VDRL), ang mga pagsusuri sa treponemal ay dapat palaging isagawa (karaniwang kumbinasyon - RPGA, ELISA, RIF).

Ang mga pagsusuri sa treponemal ay mas kumplikadong gawin kaysa sa mga mabilis na pagsusuri at nangangailangan ng mas maraming pera.

Ang reaksyong ito (pinaikling RIF) ay ginagamit upang masuri ang syphilis, kabilang ang mga nakatagong anyo, at i-double-check ang mga positibo at maling positibong sample.

Ang RIF ay batay sa glow ng mga may label na antibodies kapag pinagsama sa isang antigen-antibody complex sa ilalim lampara ng kuwarts. Ang pamamaraan ay nagsimulang gamitin noong 60s at nakikilala sa pamamagitan ng kadalian ng pagpapatupad at mataas na pagtitiyak (na bahagyang mas mababa sa RIBT).

Mayroon itong ilang mga pagbabago: RIF-10, RIF-200 at RIF-abs.

Ang RIF ay pinakasensitibo kapag natunaw ng 10 beses, at ang iba ay mas tiyak. Ang RIF ay isinasagawa sa dalawang yugto. Ang serum ng dugo ng pasyente ay idinagdag sa AG. Ang isang AG-AT complex ay nabuo, na pinag-aralan sa susunod na yugto. Susunod, ang fluorochrome-labeled complex ay kinilala sa pamamagitan ng microscopy. Kung walang glow na naobserbahan, ito ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga tiyak na antibodies sa serum ng dugo.

Ang RIF-200 ay ang pinakamahalaga sa lahat ng dilution. Ang pamamaraan ay inilaan para sa mga diagnostic iba't ibang anyo syphilis, lalo na ang latent syphilis at muling pagsusuri ng mga positibong sample.

Ang immobilization reaction ng Treponema pallidum (pinaikling RIBT, RIT) ay isa sa mga kumplikadong serological test na nangangailangan ng malaking pagsisikap at mga gastos sa pananalapi. Ang RIBT ay ginagamit nang mas kaunti, ngunit ang kaugnayan nito ay nananatili sa diagnosis ng latent syphilis.

Ito ay may malaking kahalagahan sa pagkilala sa mga maling positibong resulta sa mga buntis na kababaihan at batay sa immobilization ng bakterya sa pagkakaroon ng mga immobilsin - late antibodies.

Ang resulta ay tinasa batay sa porsyento (%) ng mga immobilized treponemes gamit ang isang espesyal na talahanayan:

1 Mula 0 hanggang 20 - negatibong pagsubok.

2 Mula 21 hanggang 50 - mahinang positibong pagsubok.

3 Mula sa 50 karagdagang positibong reaksyon.

Posible rin ang mga maling positibong resulta kapag gumagamit ng RIBT. Kaya, ang isang maling sagot ay posible sa impeksyon sa tropikal na trepanematases, pati na rin sa tuberculosis, liver cirrhosis, sarcoidosis at matatandang pasyente.

Ang pagsusuring ito ng dugo para sa syphilis ay tinatawag na passive hemagglutination test (dinaglat bilang blood test para sa RPHA, THRHA).

Ang antigen para sa RPHA ay inihanda mula sa mga pulang selula ng dugo ng tupa na pinahiran ng mga fragment ng Treponema pallidum (nakuha mula sa mga nahawaang kuneho (tingnan ang Larawan 4)). Ginagamit para sa pagsusuri deoxygenated na dugo(plasma o inactivated serum) ng pasyente.

Kapag ang isang antigen ay idinagdag sa suwero ng isang pasyente na may syphilis, isang AG-AT complex ay nabuo, na humahantong sa agglutination ng mga pulang selula ng dugo. agglutination ay tinutukoy subjectively sa pamamagitan ng isang laboratoryo technician.

Figure 3 - Scheme ng RPHA (passive hemagglutination reaction)

Ang sample ay tinatasa bilang positibo kapag lumitaw ang mga agglutinate ng isang pare-parehong kulay rosas. Ang pulang paglamlam ng precipitate ay nagpapahiwatig ng pag-ulan ng mga pulang selula ng dugo. Ang RPGA ay lubos na sensitibo at lubos na tiyak.

Reaksyon ng microhemagglutination

Ito ay isang pinasimpleng bersyon ng RPGA. Naiiba sa pagsubok na inilarawan sa itaas dahil nangangailangan ito ng mas kaunting antigen, diluent, at serum upang maisagawa ang reaksyon. 4 na oras pagkatapos ng incubation ng serum, ang sample ay maaaring masuri. Ginagamit para sa screening at mass examinations para sa syphilis.

Naka-link na immunosorbent assay

Ang enzyme-linked immunosorbent assay (pinaikling ELISA) ay batay sa isang partikular na reaksyon ng antigen-antibody. Ang biological na materyal (serum ng dugo ng pasyente, cerebrospinal fluid) ay ipinapasok sa mga balon sa solidong ibabaw kung saan naayos ang mga antigen ng treponema pallidum. Ang materyal ng pagsubok ay incubated, pagkatapos ay ang mga antibodies na hindi nakagapos sa mga antigens ay hugasan (tingnan ang Larawan 5).

Ang pagkilala sa nagresultang kumplikado ay isinasagawa sa yugto ng pagbuburo gamit ang immune serum na may label na enzyme. Sa kemikal na reaksyon kulay ng enzyme ang mga resultang complexes. Ang intensity ng paglamlam ay depende sa dami ng mga tiyak na antibodies sa dugo ng pasyente at naitala ng isang spectrophotometer.

Figure 4 - Scheme ng ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)

Ang sensitivity ng ELISA ay higit sa 95%. Ang pamamaraan ay ginagamit sa isang automated na mode upang pag-aralan ang mga elektibong pangkat ng populasyon: mga donor, mga buntis na kababaihan at iba pa, upang linawin ang diagnosis ng positibo at maling-positibong mga pagsusuring hindi treponemal.

Immunoblotting

Ang immunoblotting ay isang napakasensitibong pamamaraan, isang pagbabago ng simpleng ELISA. Ang reaksyon ay batay sa electrophoresis na may paghihiwalay ng Treponema pallidum antigens.

Ang mga pinaghiwalay na immunodeterminants ay inililipat sa nitrocellulose na papel at binuo sa ELISA. Susunod, ang serum ay incubated at ang mga hindi nakatali na antibodies ay hugasan. Ang resultang materyal ay ginagamot ng mga immunoglobulin (IgM o IgG) na may label na isang enzyme.

Klinikal na pagtatasa ng mga resulta ng pagsusuri sa laboratoryo ng syphilis

Sa Talahanayan 1 sa ibaba ay nagbigay kami ng mga posibleng resulta ng pagsusulit at ang kanilang interpretasyon. Tulad ng makikita mo sa talahanayan, ang isang komprehensibong pagtatasa ng mga pagsusulit ay pangunahing kahalagahan kapag nagde-decipher.

Talahanayan 1 - Interpretasyon ng mga resulta ng serological reactions (mga pagsusuri sa dugo para sa syphilis). Upang tingnan, mag-click sa talahanayan

Sinusuri din ang reaktibidad ng pagsubok gamit ang "mga krus":

1 Ang pinakamataas na tugon (sharply positive test) ay ipinahiwatig ng 4 na krus.

2 Positibong pagsubok ipinahiwatig ng 3 krus.

3 Ang mahinang positibong reaksyon ay ipinahihiwatig ng dalawang krus.

4 Ang isang krus ay nagpapahiwatig ng kahina-hinala at negatibong resulta.

5 Ang negatibong sagot ay minarkahan ng minus sign.

Ang problema ng pag-optimize ng mga diagnostic ng laboratoryo ng syphilis ay hindi nawala ang kaugnayan nito hanggang sa araw na ito. Mga modernong pamamaraan diagnostics, sa kabila ng pagnanais ng mga siyentipiko na dalhin ang mga diagnostic sa maximum mataas na rate sensitivity at specificity, nangangailangan ng control testing at isang indibidwal na diskarte.

Ang isang tampok ng impeksyon sa syphilitic ay ang kababalaghan ng seroresistance, na hindi pa natatanggap siyentipikong paliwanag. Ang diagnosis ay ginawa pagkatapos ng buong pagsusuri ng pasyente gamit ang mga pamamaraan ng epidemiological, klinikal, at laboratoryo.

Laban sa backdrop ng pang-ekonomiya at teknikal na pag-unlad ng medisina, ang pag-unlad ay sinusunod din sa pagbuo ng mga bagong pamantayan para sa pag-diagnose ng syphilis. Ang lahat ng ito ay magpapahintulot sa iyo na mabilis, matagumpay at tumpak na gamutin ang mga pasyente.

1 FEDERAL CLINICAL GUIDELINES PARA SA PAMAMAHALA NG MGA PASYENTENG MAY SYPHILIS. RUSSIAN SOCIETY OF DERMATOVENEROLOGISTS AND COSMETOLOGISTS. Moscow 2013;

2 MINISTRY OF HEALTH OF THE RUSSIAN FEDERATION ORDER of March 26, 2001 N 87 “ON IMPROVEMENT OF SEROLOGICAL DIAGNOSIS OF SYPHILIS”;

3 Syphilis. Pranatharthi Haran Chandrasekar, MBBS, MD Propesor, Chief of Infectious Disease, Department of Internal Medicine, Wayne State University School of Medicine. Medsacape.com;

Mga Alituntunin sa Paggamot sa Mga Sakit na Naililipat sa Sekswal (CDC).

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ay tinatawag pananaliksik sa laboratoryo, batay sa pagtitiyak at mataas na antas ng pagpili ng immunological na "antigen-antibody" na reaksyon. Nakaugalian na makilala ang ilang dosenang mga pagkakaiba-iba ng ELISA. Ang pinakasikat ay ang heterogenous solid-phase immunoassay o ELISA (enzyme linked immunosorbent assay).

kanin. 1

Ginagamit ang enzyme immunoassay para sa dalawang layunin: kung kinakailangan, upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antigen ng causative agent ng anumang impeksyon, o (na mas madalas na ginagawa) upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies ng klase na IgA, IgM, IgG sa antigen ng causative agent ng sakit. Gamit ang ELISA, tinutukoy ang mga antibodies sa halos anumang impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik.

Ang prinsipyo ng enzyme immunoassay ay batay sa immune reaksyon antigen na may mga antibodies, kapag, sa pamamagitan ng paglakip ng label ng enzyme sa mga antibodies, tinutukoy ng mananaliksik ang mga resulta ng reaksyon ng antibody-antigen, na nagtatala ng hitsura o pagbabago sa antas ng aktibidad ng enzymatic.

Ang unang reaksyon ay sinusunod sa pagitan ng purified pathogen antigen (Ag) at ang naka-install na Ig (Ab) sa pamamagitan ng pag-aayos ng plate ng immunologist sa eroplano ng mga balon.

Ang pangalawang immunological reaction ay isinasagawa upang matukoy ang umuusbong mga immune complex. Dito, ang isang tiyak na nakatali na Ig ay ginagamit bilang isang antigen, at ang isang conjugate ay ginagamit na may mga antibodies laban dito - Ig (Ab) sa isang tiyak na tao na Ig, na may label na enzyme K (peroxidase). Ang enzymatic reaction na nagaganap pagkatapos nito ay na-catalyze ng enzymatic na bahagi ng conjugate molecule. Ang isang walang kulay na sangkap na tinatawag na chromogen ay ginagamit bilang substrate ng reaksyon; sa panahon ng reaksyon, ang chromogen ay nakakakuha ng kulay. Ang dami ng immunoglobulin sa sample ay tinutukoy ng intensity ng paglamlam ng balon.

Sa pagkumpleto ng reaksyon, ang photometry ng balon ay isinasagawa, at ang mga resulta ay naitala gamit ang isang espesyal na aparato. Ang pagpoproseso ng matematika ng mga resulta ng pananaliksik ay nagpapakita ng presensya at dami ng mga katangiang antibodies sa sample.

Para sa serodiagnosis, ginagamit ang isang 96-well polystyrene plate, sa mga gilid na ibabaw ng mga cell kung saan ang antigen ay na-adsorbed nang maaga. Kapag ang test serum ay idinagdag sa mga balon ng plato, ang mga antibodies na homologous dito ay nakakabit sa antigen. Ang mga anti-human antibodies na may label na enzyme (immunoglobulins) ay inilalagay sa mga balon. Kung ang test serum ay naglalaman ng mga nakikitang antibodies, lalabas ang mga ito bilang mga antigen kung saan ang mga may label na antibodies ay magre-react. Ang isang chromogen (tina) na idinagdag pagkatapos ng paghuhugas ay magbibigay-daan sa reaksyon na maitala ng katangiang pangkulay ng mga selula. Ang intensity ng kulay na ito ay magiging proporsyonal sa proporsyon ng enzyme, at, nang naaayon, sa dami ng mga antibodies.

Sa pamamagitan ng pagsukat ng optical density (OD) ng likido sa cell at paghahambing nito sa sample ng template, kinakalkula ang konsentrasyon ng mga antibodies sa bawat unit volume. Kadalasan, ang resulta ay kinakalkula sa mga yunit ng OP. Ito ay katangian na ang bawat sistema ng pagsubok ay nilagyan ng sarili nitong mga tagapagpahiwatig ng patolohiya at normalidad, pati na rin ang mga tagapagpahiwatig para sa pagtatala ng mga resulta, na dapat isaalang-alang kapag binibigyang kahulugan ang mga resulta.

Ang modernong venereology ay gumagamit ng enzyme immunoassay techniques para masuri ang syphilis, viral hepatitis, at mga impeksyon sa HIV. Ginagamit din ang ELISA para sa pagsusuri ng cytomegalovirus at mga impeksyon sa chlamydial, mga impeksyong pinanggalingan ng herpes. Gamit ang enzyme immunoassay, tinutukoy ang mga antibodies para sa lahat ng uri ng Nakakahawang sakit, mga antas ng mga hormone, mga marker ng kanser, mga autoantibodies.

Ito ay kilala na ang pagtukoy sa presensya at antas ng mga antibodies sa dugo sa panahon ng paunang pagsusuri ng mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik ay hindi inirerekomenda. Sa kasong ito, ang pag-on sa enzyme immunoassay technique ay ganap na makatwiran. Ang ELISA ay lubos na may kakayahang makilala ang syphilis. Kailangan mo lamang tandaan na ang pagkakaroon ng mga antibodies sa suwero ay nagpapahiwatig lamang ng pakikipag-ugnay ng katawan sa mga pathogen sa nakaraan o sa kasalukuyang panahon.

Valeria 2018-08-22 16:01:18

Ang MRI ay mahinang positibo, at ang syphilis ay ginamot 8 buwan na ang nakakaraan. Bakit maaaring ito ang kaso?

Makipag-ugnayan sa isang syphilidologist. Ang mga pagsusuri upang masubaybayan ang lunas ng syphilis ay ginagawa sa isang kumplikadong (RPGA, immunoblot). At ang "mga bakas" ng diagnosis na ito ay maaaring naroroon sa mga pagsusuri sa loob ng maraming taon.

Sanya 2018-08-19 13:02:00

Kung ang 1-40 ay positibo at ang sanggunian ay negatibo May sakit ako noon at nagamot, ano ang ibig sabihin nito?

Menshchikova Galina Vladimirovna Dermatovenerologist, dermato-oncologist. Kandidato Siyensya Medikal. Doktor ng unang kategorya. Mahigit sa 15 taon ng karanasan ang mga sagot:

ELISA para sa anong impeksyon? Mangyaring suriin.

Irina 2018-07-25 12:39:58

Magandang hapon Noong 2002, nagkasakit kami ng aking asawa pangunahing syphilis. SA binigay na oras Buntis ako. Nagsagawa kami ng mga pagsusuri: RMP negatibo, IgM negatibong IgG negatibo, IFA positibo, RPHA 4+. Sinasabi ng doktor kung ano ang kailangan pang-iwas na paggamot sa KVD sa linggo 20, 6 na iniksyon bawat araw sa loob ng 10 araw. Mangyaring sabihin sa akin kung mayroon akong mga indikasyon para sa gayong seryosong paggamot.

Bagaeva Madina Dermatovenerologist, miyembro ng Moscow Society of Dermatovenerologists and Cosmetologists na pinangalanan. Sagot ni A.I. Pospelova:

Ito ay isang napaka-pinong punto, dahil ang mga maling-positibong pagsusuri ay posible sa panahon ng pagbubuntis. Ang konsultasyon sa isang syphilidologist ay kinakailangan.

Ang ELISA o enzyme immunoassay ay tumutukoy sa serological na pag-aaral at nilayon para sa pagtuklas at pagsusuri ng mga pathological microorganism sa serum ng dugo.

Tinutukoy ng pagsusuri ang iba't ibang klase ng mga immunoglobulin sa bakterya: IgM - para sa talamak proseso ng pathological, at IgG sa yugto ng pagbawi, na sa ilang mga kaso ay nagpapatuloy sa buong buhay.

Gamit ang mga diagnostic ng immunoassay ng enzyme, ang mga sakit ng iba't ibang etiologies ay napansin:

Ang ELISA ay ipinahiwatig din para sa pag-diagnose ng syphilis kapag ang mga positibong resulta ay nakumpirma ng pamamaraang RT, at pinapayagan kang subaybayan ang pagiging epektibo ng paggamot sa proseso ng pathological.

Ang enzyme immunoassay ay inireseta ayon sa mga indikasyon (kung ang impeksyon sa mga mikroorganismo ay pinaghihinalaang), at sapilitan sa panahon ng pagbubuntis at bago ang operasyon upang matukoy ang pagdadala ng iba't ibang bakterya.

Ang pamamaraan ng pagsusuri ay isinasagawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan, ang materyal (dugo) ay kinuha mula sa isang ugat. resulta diagnostic na pag-aaral maghanda hanggang 10 araw. Positibong ELISA

Ang isang positibong resulta ng ELISA ay kinumpirma ng pagkakaroon ng mga immunoglobulin ng mga klase ng IgG at IgM. Ang mga titer ng IgM na nakita sa dugo ay palaging nagpapahiwatig ng isang sakit sa isang progresibong yugto; ang isang malusog na tao ay walang mga antibodies na ito.

At ang IgG ay nagpapahiwatig ng isang nakaraang impeksiyon o karwahe mga pathogenic microorganism, ang ilan ay nasa maliit na halaga ay isinasaalang-alang sa loob ng normal na mga limitasyon. Halimbawa, ang streptococcus at staphylococcus bacteria ay naroroon sa bawat katawan ng tao.

Syphilis

Ang mga antibodies ng IgM para sa syphilis ay napansin mula sa 2 linggo pagkatapos ng impeksyon at nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang pangunahin, pangalawa o congenital na yugto; sa paggamot, nawawala sila pagkatapos ng halos anim na buwan, nang walang paggamot - pagkatapos ng 18 buwan. Kung ang parehong uri ng immunoglobulins ay nakita nang sabay-sabay, ang syphilis ay nakumpirma sa talamak na yugto. Sa mga taong gumaling mula sa sakit, ang IgG antibodies sa syphilis ay nananatili sa serum habang-buhay.

Viral hepatitis

Ang IgM sa viral hepatitis ay madalas na nakikita sa tagal ng incubation mga sakit, bago ang paglitaw ng mga unang pagpapakita at nagpapatuloy sa kurso ng sakit, pagkatapos ng pagbawi - ay hindi natukoy. Ang exception ay viral hepatitis C, kung saan ang IgM ay nakita pareho sa aktibo at tago o talamak na yugto nito

Ang mga IgG antibodies sa hepatitis A ay maaaring naroroon kahit na sa malusog na tao, na dahil sa nakaraang impeksiyon o pagbaba ng kaligtasan sa sakit, at ang pagkakaroon ng IgG sa hepatitis B, C at D ay hindi sinusunod sa mga malulusog na tao.

CMVI

Ang impeksyon sa CMV ay laganap halos saanman at hindi nagdudulot ng banta sa kalusugan ng publiko. Gayunpaman, nagdudulot ito ng mortal na panganib sa bagong panganak at fetus sa panahon ng impeksyon sa intrauterine.

Nagbubunyag IgM antibodies sa cytomegalovirus ay nagpapahiwatig ng pangunahing impeksiyon o pag-activate ng latent phase. Ang mga titer ng IgG ay nananatili sa mga taong gumaling mula sa sakit sa loob ng 10 taon.

Herpes

Ang mga antibodies sa herpes virus ay karaniwang wala sa malulusog na tao. Ang nilalaman ng IgM ay nagpapahiwatig ng talamak na yugto ng sakit, IgG - ang nakatagong yugto (sa kasong ito, ang tao ay isang carrier ng impeksiyon). Kung mayroon kang IgG sa herpes, dapat mong malaman na ang virus ay maaaring i-activate anumang oras mula sa nakatagong yugto hanggang sa progresibong yugto.

Bulutong

Sa bulutong at sa loob ng 2 taon pagkatapos ng paggamot, ang mga immunoglobulin ng klase ng IgM ay nananatili sa dugo. Karaniwan, ang mga antibodies sa bulutong-tubig ay hindi nakikita sa mga malulusog na tao.

Mga sakit na dulot ng staphylococci at streptococci

Ang lahat ng tao ay may mga immunoglobulin sa staphylococci at streptococci. Samakatuwid, posibleng masuri ang proseso ng pathological na dulot ng mga grupong ito ng bakterya sa pamamagitan ng pagsasagawa ng double enzyme immunoassay method. Kung mayroong isang pagtaas sa mga titer sa paulit-ulit na ELISA (isang linggo pagkatapos ng una), kung gayon ang pagsusuri ay itinuturing na nakumpirma.

Chlamydia

TUNGKOL SA positibong resulta Ang Chlamydia ay ipinahiwatig ng pagtuklas ng mga titer ng IgM na 1:8 at sa itaas, at klase ng IgG - 1:64 at sa itaas, na tumataas sa panahon ng kurso ng sakit at umabot sa mataas na halaga. Halimbawa, sa mga batang may chlamydial pneumonia, tumataas ang titer sa 1:2000 – 1:4000. Ang pagkakaroon ng IgM ay nagpapahiwatig ng aktibidad ng chlamydia; ilang oras pagkatapos ng impeksyon, ang mga IgG globulin ay napansin sa dugo.

Ang isang negatibong enzyme immunoassay ay ipinahiwatig ng kawalan ng IgM antibodies. Ang nade-detect na IgG ay hindi sa lahat ng kaso ay itinuturing na kumpirmasyon ng isang diagnostic test; madalas silang nagpapatuloy ng ilang taon pagkatapos ng impeksyon, minsan habang buhay.

Pagkatapos ng syphilis, nakakahawang mononucleosis Ang mga immunoglobulin ng IgG ay nananatili sa buong buhay at nakikita sa serum ng dugo. Sa loob ng 10 taon, nananatili ang mga mikroorganismo ng CMV, tigdas, rubella, at toxoplasmosis.

Ang titer ng amoebiasis ay nagpapatuloy mula sa ilang buwan hanggang ilang taon. Ang mga antibodies sa staphylococcus at streptococcus bacteria ay nakikita sa ganap na lahat ng tao sa maliit na dami.

Sa mga kaso sa itaas, ang pagtuklas ng mga immunoglobulin ng IgG pagkatapos ng mga sakit ay nagpapahintulot sa amin na ituring ang mga resulta ng ELISA bilang negatibo.

Normal sa panahon ng pagbubuntis

Sa unang trimester ng pagbubuntis, ang bawat babae ay sumasailalim sa isang kumpletong pagsusuri sa katawan, na kinabibilangan ng enzyme immunoassay.

Ang mga pagsusuri para sa toxoplasmosis, CMV, chlamydia, herpes type 2 (genital), rubella, ureaplasma at mycoplasma ay sapilitan, dahil ang mga sakit na ito ay nagdudulot ng malubhang banta sa pag-unlad ng fetus. Nagagawa nilang tumagos sa katawan ng bata, na nilalampasan ang placental barrier.

At nagdudulot sila ng isang partikular na panganib sa unang trimester ng pagbubuntis at halos palaging humahantong sa intrauterine fetal death at kusang pagkakuha.

Ang problema sa mga sakit sa itaas ay ang mga ito ay madalas na nangyayari sa isang asymptomatic stage, nang walang nakikitang clinical manifestations, at maaari lamang silang makilala sa pamamagitan ng enzyme-linked immunosorbent diagnostics.

Masasabi ang magagandang resulta ng pagsusuri kung walang nakitang microorganism sa suwero. Ang detectable IgG ay nagpapahiwatig ng pagdadala ng mga virus at nangangailangan ng patuloy na pagsubaybay sa babae upang makapagbigay ng napapanahong therapy para sa biglaang paglala. Ang positibong IgM ay nagpapahiwatig ng isang progresibong proseso ng pathological at nangangailangan ng agarang pag-aalis ng pathogen.

Ang pagtuklas ng mga titer ng IgG para sa rubella ay nagpapahiwatig ng nakaraang sakit at normal ito sa panahon ng pagbubuntis. Ang IgG sa CMV ay hindi rin nagdudulot ng isang partikular na banta sa fetus, gayunpaman, ang posibilidad ng exacerbation ay hindi maaaring ibukod (dalas ng pagpapakita, humigit-kumulang 1-2%).

Ang isang partikular na banta ay ang pagkakaroon ng IgG sa herpes virus type 2 o genital (HSV2), dahil ang panganib ng exacerbation ay tumataas nang malaki sa panahon ng panganganak. Sa panahon ng gestational, ang saklaw ng talamak na yugto ay nangyayari sa 0.9% ng mga kaso. Ang impeksyon ng fetus na may herpes virus sa panahon ng pagpasa ng genital tract ay nangyayari sa 40% ng mga kaso at humahantong sa kamatayan sa 50%.

Sa mga kaso ng toxoplasmosis, ang IgM ay maaaring tumagal ng hanggang 2 taon pagkatapos ng paggamot. Ang panganib ng impeksyon ng fetus sa kasong ito ay 17% sa unang trimester at tumataas sa 60% ng pangatlo, dahil ang pangunahing ruta ng impeksyon ay transplacental. Maraming mga eksperto ang may posibilidad na suriin ang nakitang IgG sa toxoplasmosis bilang isang negatibong resulta, na halos walang banta sa kurso ng pagbubuntis.

Impormasyon mula sa State Register of Medical Devices:

Natatanging registry entry number

Numero ng pagpaparehistro kagamitang medikal

FSR 2011/10506

Petsa ng pagpaparehistro ng estado ng medikal na aparato

Pangalan ng produktong medikal

Set ng mga reagents "DS-ELISA-ANTI-LEWIS-TOTAL ANTIBODIES" Enzyme immunosorbent test system para sa pag-detect ng mga antibodies sa causative agent ng syphilis ayon sa TU 9398-182-05941003-2010
Available ang reagent set sa tatlong set: - Idinisenyo ang Set 1 para magsagawa ng 96 (isang collapsible plate) na mga pagpapasiya, kabilang ang mga control, na nilayon kapwa para sa manu-manong pagsubok at para sa pagsubok sa mga open-type na ELISA analyzer na may posibilidad ng fractional na paggamit. - Ang Set 2 ay idinisenyo upang magsagawa ng 192 (dalawang collapsible plates) na mga pagpapasiya, kabilang ang mga kontrol, na inilaan para sa parehong manu-manong pagsubok at para sa pagsubok sa mga open-type na ELISA analyzer na may posibilidad ng fractional na paggamit - Ang Set 3 ay dinisenyo upang magsagawa ng 480 (limang). collapsible tablets) determinasyon , kabilang ang mga kontrol, ay inilaan para sa parehong manu-manong setting at para sa pagtatakda sa open-type na ELISA analyzer na may posibilidad ng fractional na paggamit. Kasama sa kit ang mga sumusunod na reagents: - Immunosorbent - isang collapsible polystyrene tablet, sa mga balon kung saan ang mga recombinant antigens ay sorbed - mga analogue ng T. Pallidum proteins: set 1 (1 tablet), set 2 (2 tablets), set 3 (5). tablets), - Conjugate : set 1 (1 bote 14.0 ml), set 2 (1 bote 28.0 ml), set 3 (2 bote 28.0 ml bawat isa), - K+ - positive control sample: set 1 (1 vial 0.25 ml), set 2 (1 vial 0.5 ml), set 3 (1 vial 1.0 ml), - K- - negative control sample: set 1 (1 vial 0.25 ml ), set 2 (1 vial 0.5 ml), set 3 (1 vial 1.0 ml), - PR - solusyon sa paghuhugas: set 1 (1 vial 50.0 ml), set 2 (1 vial 50.0 ml). 120.0 ml), set 3 (2 bote ng 120.0 ml), - Stop reagent: set 1 (1 bottle ng 25.0 ml), set 2 (1 bote ng 50.0 ml), set 3 (2 bote ng 50.0 ml), - TMB - substrate solution: set 1 (1 bote ng 14.0 ml), set 2 (2 bote ng 14.0 ml) , set 3 (5 bote ng 14 .0 ml) o - SB - substrate buffer solution: set 1 (1 fl. 25.0 ml), set 2 (1 fl. 25.0 ml), itakda ang 3 (2 bote ng 50.0 ml) o - TMB - solusyon na naglalaman ng 3,3",5,5"-tetramethylbenzidine: set 1 (1 bote ng 2.5 ml), set 2 (1 bote 2.5 ml), set 3 (2 bote 3.5 ml bawat isa). Mga accessory: - mga proteksiyon na pelikula para sa ELISA plates: set 1 (1 pc.), set 2 (2 pcs.), set 3 (5 pcs.), - disposable tips: set 1 (16 pcs.), set 2 (32 pcs. . .), set 3 (80 pcs.), - mga plastic na paliguan para sa mga likidong reagents: set 1 (2 pcs.), set 2 (4 pcs.), set 3 (10 pcs.), - mga plastic bag na may Zip- Lock lock : set 1 (1 piraso), set 2 (2 piraso), set 3 (3 piraso). Kasama sa set ng paghahatid ang: isang set ng mga reagents (maaaring dagdagan ng mga accessory), mga tagubilin para sa paggamit, at isang pasaporte.

Pangalan ng organisasyon - aplikante ng medikal na aparato

Lokasyon ng organisasyon ng aplikante para sa medikal na aparato

Legal na address ng organisasyon ng aplikante para sa medikal na aparato

603014, Russia, Nizhny Novgorod, st. Comintern, 47

Pangalan ng tagagawa ng aparatong medikal o tagagawa ng aparatong medikal

LLC "NPO "Diagnostic Systems"

Lokasyon ng organisasyon-manufacturer ng medikal na device o organisasyon-manufacturer ng medical device

603093, Russia, Nizhny Novgorod, st. Yablonevaya, 22, PO Box 69